miRNA-145在不同宫颈组织中的表达意义

喻金梅 安云婷 戴红春



miRNA-145在不同宫颈组织中的表达意义

喻金梅 安云婷 戴红春

目的 探讨miR-145表达在不同宫颈癌组织中的意义。方法 应用逆转录聚合酶链反应RT-PCR技术，检测20例正常宫颈组织、20例宫颈鳞状上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasias，CIN)组织及40例宫颈鳞癌(cervical cancer，CC)Ⅱ期中分化组织中miRNA-145表达情况。结果 miR-145的相对表达量在宫颈癌组织中为(0.400±0.242)，明显低于CIN组织[(0.742±0.419)]，低于正常宫颈组织(1.082±0.478)，差异有明显的统计学意义(P<0.001)。结论 miR-145的相对表达量在正常宫颈组织、CIN组织 、宫颈癌组织中逐渐下降，提示miR-145可能参与宫颈癌发生、发展。

miR-145；宫颈组织

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1747～1748)

宫颈癌(cervical cancer)是最常见的女性恶性肿瘤之一，仅次于乳腺癌，在全球范围内，每年约有20多万女性死于宫颈癌。目前世界上每年大约有50万宫颈癌的新发病例，我国每年宫颈癌的新发病例约13.15万，占世界宫颈癌心发病例的1/3[1]。宫颈上皮细胞由正常宫颈上皮发展为上皮内瘤变最后进展为浸润性宫颈癌是内因外因综合作用的结果，其中人类乳头瘤病毒(HPV)家族中的高危型HPV的持续感染是宫颈癌及其癌前病变发生的主要外因。由于宫颈癌筛查是的普遍开展，只有35%～65% CIN-3/CIS,12%～20% CIN-2 和 <5% CIN-1的患者可能发展成浸润癌[2-3]，因此寻找具有预测癌症进展的标记物成为当前研究的热点。有关研究表明miRNA的差异表达与宫颈癌的发生发展关系密切，这可能有助于宫颈癌的早期诊断、治疗及预后的判断，

1 材料与方法

1.1 临床资料

收集江西省妇幼保健院2012年03月至2013年10月新鲜宫颈组织标本80例，其中宫颈鳞癌Ⅱ期中分化组织为40例，CIN组织为20例，因子宫腺肌症、子宫肌瘤等子宫良性病变行全子宫切除的正常宫颈组织20例作为对照组。其中40例宫颈癌组织中患者年龄≤50岁22例，>50岁18例；肿瘤直径≤4 cm 23例，>4 cm 17例；肿瘤类型：溃疡型5例，颈管型2例，内生型9例，外生型24例。所有的宫颈标本离体后30 min内放到液氮中冷冻后转移到-80 ℃冰箱中保存。

纳入标本的标准：①所有的CIN宫颈组织标本和宫颈鳞癌组织均经活组织病理检查证实；②所有患者术前都没有经过物理治疗、放疗、化疗等治疗；③宫颈鳞癌组织经宫颈活检术获得，CIN组织来自行宫颈锥切术切除的组织。④宫颈癌按2009年宫颈癌FIGO临床分期进行分期。

1.2 方法

应用逆转录聚合酶链反应RT-PCR技术，检测20例正常宫颈组织、20例宫颈鳞状上皮内瘤样病变组织及40例宫颈癌组织的miRNA-145表达情况。

1.3 统计学分析

2 结果

从宫颈癌组织、CIN组织及正常宫颈组织中分别提取RNA，经RT-PCR所得目的基因与内参基因U6的灰度值比值结果见表1，图1。宫颈癌组织中miR-145相对表达量为(0.400±0.242)，明显低于CIN组织(0.742±0.419)，低于正常宫颈组织(1.082±0.478)，差异有统计学意义(χ2=28.476，P<0.001)，三组之间两两比较，差异均有统计学意义，提示miR-145有可能参与宫颈癌的恶性生物学行为。

表1 miR-145在三组组织中的表达情况

注：①为对照组和CIN组比较，②为对照组与宫颈癌组比较，③为CIN组和宫颈癌组比较。

图1 miR-145在不同宫颈组织中的表达情况

3 讨论

宫颈癌是1种常见的妇科恶性肿瘤，其中鳞癌超过70%。抑癌基因和癌基因的表达异常或失衡，不能有效控制细胞的增殖和凋亡，在宫颈癌的发生、发展中起至关重要的作用。miRNA作为生物体内1种重要的基因调控分子，其在疾病中的作用特别是在肿瘤中的作用是近年来研究的热点。信号通路和肿瘤的发生密切相关，随着人们对恶性肿瘤研究的不断深入，越来越多的信号通路被发现，其中PI3K信号通路在肿瘤中的作用越来越受重视。miRNAs在宫颈癌组织中表达上调或下调，推断其可能通过调控其靶基因参与多种信号通路，在宫颈癌的发生、发展中起着癌基因或抑癌基因的作用。miR-145是最近研究比较多的1种microRNA，其在肿瘤的形成、发生、发展中的作用越来越受重视。

Martinez等[4]利用Northern blot研究发现miR-143、miR-145和miR-218在HPV-16感染的宫颈癌细胞株中表达低于正常宫颈组织，同时该结果和其荧光定量PCR研究的结果一致。Wang等[5]运用miRNA微阵列技术结合RNA印迹检测发现miR-145在宫颈癌组织中的表达比在邻近正常宫颈组织中低，为进一步研究miR-145的低表达对宫颈癌发生、发展的作用，其利用人工合成的miR-145转染到HeLa细胞中，发现上调miR-145能抑制HeLa细胞的生长，从而预测miR-145能抑制宫颈癌细胞生长和增殖，在宫颈癌细胞恶性过程中起着很重要的作用。Huang[6]的研究表明miR-145在晚期小细胞宫颈癌组织(FIGO IB2-Ⅳ)中的表达量明显低于早期宫颈癌组织(FIGOI B1)。Shi等[7]的研究也表明miR-145在宫颈癌组织中低表达，并且表明miR-145能够抑制宫颈癌细胞的侵袭和转移。国内郭丽芬等[8]运用原位杂交技术研究20例正常宫颈组织、43 例CIN组织，68 例宫颈癌组织的miR-145表达发现miR-145在CIN Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中阳性表达逐渐下降，而在子宫颈癌组织中miR-145阳性表达率最低，推测miR-145可能参与了宫颈癌发生及发展的过程，可以为宫颈癌患者的治疗和预后判断提供依据。这些研究结果均提示宫颈癌组织中miR-145的异常表达在宫颈癌的发生、发展中的作用不可忽视。

类似于上述研究结果，本研究发现miR-145的相对表达量在宫颈癌组织中为(0.400±0.242)，明显低于CIN组织(0.742±0.419)，低于正常宫颈组织(1.082±0.478)，可见在正常宫颈组织、CIN组织和宫颈癌组织中miR-145的相对表达量逐渐下降，差异有明显的统计学意义(P<0.05 )，两两比较差异均有统计学意义，由此推测低表达的miR-145可能与宫颈癌发生、发展有关。本研究将进一步研究关于miR-145与宫颈鳞癌临床病理特征之间关系，预示miR-145可能通过调节某一癌基因发挥作用，影响宫颈癌细胞的生物学特性。

[1] 曹汉毅主编.妇科常见肿瘤诊治指南〔M〕.北京:人民卫生出版社,2010:62.

[2] Holowaty P,Miller AB,Rohan T,et al.Natural history of dysplasia of the uterine cervix〔J〕.J Natl Cancer Inst,1999，91(3):252-258.

[3] Hawes SE,Kiviat NB.Screening for cervical cancer.In:Hol-

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[4] Martinez I,Gardiner AS,Board KF,et al.Human papillomavirus type 16 reduces the expression of microRNA-218 in cervical carcinoma cells〔J〕.Oncogene,2008,27(18):2575-2582.

[5] Wang X,Tang S,Le SY,et al.Aberrant expression of oncogenic and tumor-suppressive microRNAs in cervical cancer is required for cancer cell growth〔J〕.PloS one,2008,3(7):e2557.

[6] Huang L,Lin JX,Yu YH,et al.Downregulation of six microRNAs is associated with advanced stage,lymph node metastasis and poor prognosis in small cell carcinoma of the cervix〔J〕.PloS one,2012,7(3):e33762.

[7] Shi M,Du L,Liu D,et al.Glucocorticoid regulation of a novel HPV-E6-p53-miR-145 pathway modulates invasion and therapy resistance of cervical cancer cells〔J〕.J Pathol,2012,228(2):148-157.

[8] 郭丽芬.miR-145在宫颈癌组织中的表达及意义〔J〕.中国现代医学杂志,2012,22(31):58-60.

(编辑：吴小红)

Expression of miRNA-145 in Different Cervical Tissues

YUJinmei，ANYunting，DAIHongchun.

JiangxiMaternalandChildHealthCareHospital,NanChang,330006

Objective To explore the expression of miR-145 in normal cervical tissues.Methods The expressions of miR-145 in 20 cases of normal cervical tissues，20 cases of human cervical intraepithelial neoplasias tissues and 40 cases of stageⅡ cervical cancer were detected by RT-PCR.Results The expression of miR-145(0.400±0.242)in cervical cancer tissues was significantly lower than those of cervical intraepithelial neoplasia tissues(0.742±0.419) and normal cervical tissues(1.082±0.478),and the difference was significant(P<0.001).Conclusion The expression of miR-145 in cervical cancer tissues is less than the cervical intraepithelial neoplasia tissues and normal cervical tissues,those results suggest that miR-145 probably participate in the occurrence and development of cervical cancer.

Cervical cancer；miRNA-145

330006 江西省妇幼保健院

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.11.003

R737.33

A

1001-5930(2016)11-1747-02

2016-04-29

2016-08-08)