CXCL9和碳酸酐酶Ⅸ在鼻咽癌患者血清中的表达及其临床意义

唐江华 周 维



CXCL9和碳酸酐酶Ⅸ在鼻咽癌患者血清中的表达及其临床意义

唐江华 周 维

目的 研究鼻咽癌患者血清趋化因子(CXCL)9和碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨ)水平与其临床病理因素的相关性。方法 选择鼻咽癌患者共32例，结果统计过程中因资料遗失脱落2例，实际完成30例；检测鼻咽癌组和对照组血清CXCL9和CAⅨ水平；分析血清CXCL9和CAⅨ表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、病理类型及淋巴结转移等临床病理参数的相关性；所有患者均给予2年定期随访，比较死亡患者与存活患者血清CXCL9和CAⅨ水平。结果鼻咽癌组较对照组血清CXCL9和CAⅨ水平均明显增高(P<0.01)；血清CXCL9和CAⅨ表达水平与鼻咽癌患者的性别、年龄、大小及病理类型无明显相关性(P>0.05)，而与鼻咽癌患者TNM分期、淋巴结转移呈明显相关(P<0.01)。随访2年显示：6例死亡，24例存活；死亡患者入院时血清CXCL9和CAⅨ水平均明显高于存活者入院时(P<0.01)。结论

鼻咽癌；趋化因子9；碳酸酐酶Ⅸ；相关性

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1795～1798)

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma)在我国范围内发病率较高，调查显示约占43.2%[1]。目前，临床对中晚期鼻咽癌治疗以放化疗为主，但仍有相当部分患者面临复发和转移；因此，在放化疗的同时给予分子靶向治疗，可能对改善患者的生活质量及提高生存率具有重要临床价值[2]。通过免疫组织化学检测鼻咽癌组织内碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨ)蛋白表达显示，CAⅨ的阳性结果明显升高，且与鼻咽癌的临床特征及预后呈显著性相关[3]；但鼻咽癌患者血清CAⅨ水平是否存在一致性结果尚待阐明。趋化因子(CXCL)9在多种肿瘤中高表达，且与复发、转移及预后密切相关[4]，然而其与鼻咽癌的临床病理特征的相关性尚存争议。

现代医学研究证实，在肿瘤的发生及病程中，患者血清内伴有由肿瘤组织所释放的蛋白质以及肿瘤对机体影响而产生的各种蛋白质[5]。因此，检测肿瘤患者血清中上述蛋白质的表达对疾病的诊疗及预后具有重要临床价值。本研究采用酶联免疫吸附法(enzme-linked immunosorbnent assay，Elisa)检测了鼻咽癌患者血清中CXCL9和CAⅨ的表达变化，并探讨其对鼻咽癌的诊断价值及临床病理参数的相关性，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选择本院2012年1月至2013年9月收治的鼻咽癌患者共32例，结果统计过程中因资料遗失脱落2例，实际完成30例，其中男性24例，女性6例；年龄39～61，平均(49.57±6.51)岁。同期收集在本院体检健康者45例作为对照组，男性36例，女性9例；年龄40～65岁，平均(50.68±7.88)岁。2组患者在年龄、性别等基本资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有纳入患者均经本院医学伦理委员会备案。

1.2 诊断标准

依据《新编常见恶性肿瘤诊治规范·鼻咽癌分册》[6]制定标准：①临床症状：回吸涕带血、耳聋、面麻、头痛、耳鸣以及复视；②体检提示鼻咽部肿物，且伴有颈部肿块和/或脑神经麻痹；③鼻咽脱落细胞学检查或鼻咽部活检呈阳性；④血清EB病毒检查进行辅助诊断；⑤采用鼻咽镜检查、CT检查肿瘤病灶的大小及位置等。鼻咽癌的临床分期、分化程度等均参照2002年国际抗癌联盟(UICC)标准[7]。

1.3 病例入选和排除标准

入选标准：①符合鼻咽癌诊断标准；②年龄30～65岁；③首诊患者；④未给予放化疗及其他抗癌治疗者；⑤所有患者知情，且签署同意书。排除标准：①伴有其他系统肿瘤者；②妊娠及哺乳期妇女；③精神病者；④合并心脑血管、肺、肝、肾及造血系统等系统功能不全者；⑤正参与其他临床试验者。

1.4 方法

1.4.1 指标检测 检测2组血清CXCL9和CAⅨ水平。晨起空腹抽取所有研究对象静脉血约4 mL，室温静置约30 min，离心获取血清，-20 ℃保存备用；采用酶联免疫吸附(Elisa)法进行测定，试剂盒由上海恪敏生物科技有限公司提供，指标测定具体由2名经专门培训过的研究人员严格参照说明书操作。

1.4.2 分析指标 ①鼻咽癌组和对照组血清CXCL9和CAⅨ水平比较。②分析血清CXCL9和CAⅨ表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、病理类型及淋巴结转移等临床病理参数的相关性。③所有患者均给予2年定期随访，记录死亡患者例数，比较死亡患者与存活患者血清CXCL9和CAⅨ水平。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 2组血清CXCL9和CAⅨ水平比较

与对照组比较，鼻咽癌组血清CXCL9和CAⅨ水平均明显增高，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 2组血清CXCL9和CAⅨ水平比较

2.2 血清CXCL9和CAⅨ表达与鼻咽癌临床病理因素间的相关性

血清CXCL9和CAⅨ表达与患者的TNM分期、淋巴结转移呈明显相关(P<0.01)，见表2。

2.3 死亡与存活患者血清CXCL9和CAⅨ表达水平比较

随访2年发现：6例死亡，24例存活；死亡患者入院时血清CXCL9和CAⅨ水平均明显高于存活者入院时，比较差异有统计学意义(P<0.01)，见表3。

3 讨论

鼻咽癌的病因病机非常复杂，大部分在确诊时已处于疾病晚期阶段，故早期诊断、及时有效干预对该病的治疗具有重要临床价值。为了提高鼻咽癌的诊疗效果，探寻高灵敏度和特异性的早期诊断、临床治疗以及预后评估标志物十分必要。目前，肿瘤的血清标志物检测是临床重要诊断方法，具有便捷、灵敏等优点[8]。近年，测定的鼻咽癌血清学标志物有乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenas)[9]、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase)[10]以及肿瘤坏死因子(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(CCL2)[11]等。但上述血清学标志物仅代表鼻咽癌某一方面的特性，为提高该病的临床诊疗率及临床疗效、预后等判断，探寻更多敏感指标具有重要临床价值。

表2 血清CXCL9和CAⅨ水平与鼻咽癌临床病理因素的相关性

表3 死亡和存活患者血清CXCL9和CAⅨ水平比较

组别CXCL9CAⅨ死亡组(n=6)903.43±93.72303.71±33.15存活组(n=24)733.87±75.27234.79±25.62t4.115.61P<0.01<0.01

CAⅨ为碳酸酐酶(carbonic anhydrase，CA)家族成员，是一种肿瘤相关抗原。CAⅨ与肿瘤侵袭性、转移有关蛋白如表皮生长因子受体(EGFR)、c-erbB-2等的表达呈正相关[12]。研究发现，CAⅨ与β-catenin相互作用降低ECD介导的细胞黏附作用，而ECD功能的丧失或不稳定与肿瘤的侵袭性密切有关[13]。CAⅨ与多种肿瘤的发生、发展以及生物学特性紧密联系。本组资料显示，与对照组比较，鼻咽癌组血清CAⅨ水平均明显增高，差异有统计学意义(P<0.01)；血清CAⅨ表达水平与鼻咽癌患者的性别、年龄、大小及病理类型无明显相关性(P>0.05)，而与鼻咽癌患者的TNM分期、淋巴结转移呈明显相关(P<0.01)；随访2年发现：6例死亡，24例存活；死亡患者入院时血清CXCL9和CAⅨ水平均明显高于存活者入院时，比较差异有统计学意义(P<0.01)。以上结果表明，血清CAⅨ的表达水平可能与鼻咽癌的发生及恶性程度紧密联系，对其临床预后具有重要评估价值。

CXCL9属趋化因子CXC亚家族，参与调节细胞生长、凋亡以及介导血管稳定等作用，在肿瘤的发生发展中发挥重要作用[14]。CXCL9在多种肿瘤如胃癌、淋巴瘤、结直肠癌等中均呈高水平表达[15]。本组研究发现，与对照组比较，鼻咽癌组血清CXCL9水平均明显增高，差异均有统计学意义(P<0.01)。血清CXCL9表达水平与鼻咽癌患者的性别、年龄、大小及病理类型无明显相关性(P>0.05)，而与鼻咽癌患者的TNM分期、淋巴结转移呈明显相关(P<0.01)。 随访2年发现：6例死亡，24例存活；死亡患者入院时血清CXCL9水平均明显高于存活者入院时，比较差异有统计学意义(P<0.01)。以上结果均提示，血清CXCL9表达水平可能与鼻咽癌的发生、恶性程度密切相关，也可能是评判鼻咽癌患者临床预后评估的重要指标。

综上所述，鼻咽癌患者血清CXCL9和CAⅨ表达水平显著升高，两者与鼻咽癌的临床病理因素呈显著相关性，可能作为临床评判鼻咽癌患者预后的重要血清学标志物。

[1] 陈奕辉.AP-2α的表达在鼻咽癌患者的临床意义〔J〕.中华临床医师杂志(电子版),2013,7(24):11842-11845.

[2] 曹秀娟,都俊芳,于金明,等.鼻咽癌组织中EGFR和n-

m23基因表达与预后关系研究〔J〕.中华放射肿瘤学杂志,2011,20(2):87-90.

[3] 陈宇翰,李先明,吴事海,等.HIF-l α和碳酸酐酶Ⅸ在鼻咽癌中表达及其与患者预后关系〔J〕.中华放射肿瘤学杂志,2015,24(1):46-47.

[4] 路慧丽,俞 眉,韩 伟.趋化因子CXCL9/Mig的研究进展〔J〕.中国生物工程杂志,2006,26(10):59-63.

[5] 廖秋林,张卫云,张宏斌,等.鼻咽癌患者血清sICAM-1和SAA1及HSP70检测临床意义分析〔J〕.中华肿瘤防治杂志,2013,20(2):110-112,132.

[6] 中国抗癌协会.新编常见恶性肿瘤诊治规范.鼻咽癌分册〔M〕.北京:北京医科大学协和医科大学联合出版社,1999.

[7] International Union Against Cancer.TMN classification of malignant tumours〔M〕.6th ed.NewYork(NY):Wiley,2002:102.

[8] 周 伟,魏 平,王兴远,等.血清肿瘤标志物水平改变对胃癌患者化疗效果的评价价值〔J〕.实用癌症杂志,2015,30(7):979-981.

[9] Zhang W,Chen Y,Zhou G,et al.Pretreatment serum lactate dehydrogenase and N classification predict long-term survival and distant metastasis in patients with nasopharyngeal carcinoma who have a positive family history of cancer〔J〕.Medicine(Baltimore),2015,94(37):e1505.

[10] Jin Y,Yuan MQ,Chen JQ,et al.Serum alkaline phosphatase predicts survival outcomes in patients with skeletal metastatic nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Clinics(Sao Paulo),2015,70(4):264-272.

[11] Lu X,Qian CN,Mu YG,et al.Serum CCL2 and serum TNF-α--two new biomarkers predict bone invasion,post-treatment distant metastasis and poor overall survival in nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Eur J Cancer,2011,47(3):339-346.

[12] Bane AL,Whelan TJ,Pond GR,et al.Tumor factors predictive of response to hypofractionated radiotherapy in a randomized trial following breast conserving therapy〔J〕.Ann Oncol,2014,25(5):992-928.

[13] 朱 诺,黄关宏,王忠明.碳酸酐酶Ⅸ在肿瘤研究中的进展〔J〕.蚌埠医学院学报,2011,36(4):432-434.

[14] F Marchesi,F Grizzi,L Laghi,et al.Molecular mechanisms of pancreatic cancer dissemination:The role of the chemokine system〔J〕.Curr Pharm Des,2012,18(17):2432-2438.

[15] Verbeke H,Geboes K,Van Damme J,et al.The role of CXC chemokines in the transition of chronic inflammation to esophageal and gastric cancer〔J〕.Biochim Biophys Acta,2012,1825(1):117-129.

(编辑：甘 艳)

Expression and Clinical Significance of Serum CXCL9 and Carbonic Anhydrase Ⅸ in Nasopharyngeal Carcinoma

TANGJianghua,ZHOUWei.

TheNinthPeople'sHospitalofChongqing,Chongqing，400700

Objective To study the correlation of serum levels of chemotactic factor(CXCL) 9 and carbonic anhydrase Ⅸ(CAⅨ) and clinicopathological parameters of nasopharyngeal carcinoma.Methods 32 patients with nasopharyngeal carcinoma were selected,2 cases were weeded out by data missing and 30 cases were completed.Serum levels of CXCL9 and CAⅨ were detected in nasopharyngeal carcinoma group and the control group.Expressions of serum CXCL9 and CAⅨ and its correlation with clinicopathological parameters such as age,gender,tumor size,lymphatic metastasis,TNM staging and pathology type were analyzed.All patients were given 2-year follow-up.Serum CXCL9 and CAⅨ were compared in both survival and death group.Results

Nasopharyngeal carcinoma；Chemotactic factor(CXCL) 9；Carbonic anhydrase Ⅸ(CAⅨ)；Correlation

400700 重庆市第九人民医院

周 维

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.11.016

R739.63

A

1001-5930(2016)11-1795-04

2016-01-08

2016-05-17)

鼻咽癌患者血清CXCL9和CAⅨ的表达水平明显升高，与鼻咽癌的恶性程度呈显著性相关，可能是评估鼻咽癌患者预后的重要指标。

Compared with the control group,serum levels of CXCL9 and CAⅨ of nasopharyngeal carcinoma group obviously increased(P<0.01).Serum levels of CXCL9 and CAⅨ had no significant correlation with age,gender,size,and pathological type(P>0.05),while had significant correlation with TNM staging and lymph node metastasis(P<0.01).After 2-year follow-up,6 cases were dead and 24 survived.Serum levels of CXCL9 and CAⅨ on admission of dead patients were remarkably higher than survival patients(P<0.01).Conclusion Serum levels of CXCL9 and CAⅨ of nasopharyngeal carcinoma obviously increased and are closely related with malignancy grade,and could be important prognostic indicator in evaluating prognosis.