罗氏e601电化学发光仪剩余试剂的再利用评价

于淼琛，潘立阳，朱　鸿

(1.大连医科大学附属第一医院 检验科，辽宁 大连 116011；2.大连市疾病预防控制中心 传染病地方病防治所，辽宁 大连 116011)



罗氏e601电化学发光仪剩余试剂的再利用评价

于淼琛1，潘立阳2，朱鸿1

(1.大连医科大学附属第一医院 检验科，辽宁 大连 116011；2.大连市疾病预防控制中心 传染病地方病防治所，辽宁 大连 116011)

目的对罗氏e601电化学发光仪剩余试剂再利用进行评估。方法将HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb的混合剩余试剂，进行精密度、正确度验证并与新试剂进行比对及相关性分析。结果剩余混合试剂HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb水平1批内精密度分别为3.43、3.88、2.04、1.22，水平2批内精密度分别为1.22、2.40、1.09、1.66；HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb水平1批间精密度分别为5.17、4.55、3.70、3.74；水平2批间精密度分别为4.99、3.93、4.16、6.91；正确度本室测定结果与室间质评回报结果均相符、HBsAb相关系数r为 0.999；HBcAb、HBeAg、HBeAb两试剂盒的阳性符合率和阴性符合率均为100%。结论罗氏e601电化学发光仪剩余试剂可以混合使用，稳定性良好，能保证检测质量。

罗氏e601；剩余试剂再利用；电化学发光

[引用本文]于淼琛，潘立阳，朱鸿.罗氏e601电化学发光仪剩余试剂的再利用评价[J].大连医科大学学报，2016,38(5)：480-482.

罗氏e601全自动电化学发光免疫分析仪应用于临床以来，因重复性好，故障率低，结果可靠稳定，逐步取代了传统的ELISA方法。但是由于配套试剂均为进口试剂，价格相对较高，试剂剩余量大，为了节约成本，本实验室将相同批号的剩余试剂混合，并对其性能进行验证评价。

1　材料和方法

1.1标本来源

标本来源于大连医科大学附属第一医院住院无溶血、无乳糜患者血清。

1.2仪器与试剂

罗氏e601全自动电化学发光免疫分析仪。将仪器显示为“0”的剩余试剂瓶剩余试剂轻轻充分混匀，倒入另一瓶仪器显示为“0”的试剂瓶内，轻轻混匀，注意不要产生气泡，成为一盒新的“混合”试剂(同一项目试剂均为同一批号)。HBsAb、HBeAg、HBeAb需2盒剩余试剂，HBcAb需3盒剩余试剂。HBsAb试剂批号19026703、HBeAg试剂批号18813102、HBeAb试剂批号12375401、HBcAb试剂批号131753122。配套校准品及质控品。

1.3方法

1.3.1精密度验证：依据EP15-A2[1]，选取两个水平的质控，连续重复测定20次，计算批内精密度，要求批内精密度≤1/4允许总误差(TEa)；将两个浓度的质控品每日检测1次，连续检测20 d，得到20个数据，计算批间精密度，要求批间精密度≤1/3允许总误差(TEa)。

1.3.2正确度验证：用室间质评的质控物测定，判断测定结果与室间质评回报结果符合性。

1.3.3比对试验

定量项目：依据EP9-A2[2]，将新盒检测HBsAb的标本，用混合试剂再测，将新试剂盒的结果与混合试剂盒的结果作比较，实验周期≥5 d，至少做20份病人样品(如每天至少做4份病人标本)。比对试验尽量在2 h内检测完成，将样品按1、2、3、4的顺序排列先测一遍，然后将顺序倒过来做第2次测定。计算Y=aX+b，验证线性范围。要求：a值在1±0.03范围内，相关系数r≥0.975。

定性项目：选择20份阴性标本(其它标志物阳性的8份)、20份阳性标本(弱阳性14份、强阳性6份)，使用混合试剂盒和新试剂盒分别检测HBeAg、HBeAb、HBcAb，计算两试剂盒的符合率，评价比对结果的可接受性。

1.4统计学方法

依据EP9-A2文件的要求对方法间离群值进行检查; 用相关系数(r)对相关性作粗略评估，若r>0.975，则认为X范围合适，两种试剂的相关性好，直线回归统计的斜率和截距可靠计算线性回归方程。

2　结　果

2.1精密度验证

HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检测，批内精密度和批间精密度结果均合格，见表1。

表1　精密度验证结果

2.2正确度验证

测定结果与卫生部临检中心2016年第一次室间质评回报结果一致，判断结果符合，见表2。

表2　正确度验证结果

2.3比对试验

2.3.1定量项目：HBsAb新试剂盒测定值的平均值为X，混合试剂盒测定值平均值为Y，回归方程Y=0.9809X+0.996，相关系数r=0.999。见图1。

图1　HBsAb新旧试剂相关性Fig 1 Correlation of HBsAb between the two kits

2.3.2定性项目：HBeAg、HBeAb、HBcAb两试剂盒的阳性及阴性符合率均为100%。见表3。

表3HBeAg，HBeAb，HBcAb的新旧试剂阴性、阳性符合率

Tab 3 The coincidence of HBeAg，HBeAb，HBcAb between the two kits

项目阳性符合率(%)阴性符合率(%)评价HBeAg100100可接受HBeAb100100可接受HBcAb100100可接受

3　讨　论

罗氏e601全自动电化学发光免疫分析仪检测试剂用完后，试剂瓶内虽有剩余试剂，但仪器不会再进行检测，但剩余试剂量却超过了50%[3]。电化学发光仪器试剂价格昂贵，如将剩余试剂弃之不用，将造成极大的浪费。混合剩余试剂的混合试剂经本实验室验证，重复性及准确性均可靠。HBsAb新试剂盒和剩余试剂混合试剂盒的比对结果，回归方程良好，相关系数r=0.999，说明两试剂盒高度正相关，且相关性都良好[4]。由于检测标本量大，且两台罗氏e601全自动电化学发光免疫分析仪同时进行，通常今日的剩余试剂，在工作结束后，由岗位人员负责把剩余试剂混合，且做好标注，放入另一台仪器明日备用。第2天质控合格后，才能进行正常标本检测。如当日质控失控，应查找原因，重新复测质控品，质控合格方能进行正常标本检测；如质控还是失控，不能用此混合试剂检测标本，要弃去此混合试剂。

罗氏HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb试剂瓶盖打开后上机稳定期为8周，本科室4种试剂用量大，及时拼装后立即使用，包被的抗原抗体性质与效价未发生改变，不影响继续使用，使用过程中严密监控质控结果，保证实验质量[5]。经本实验室验证，在日常工作中，可将罗氏e601全自动电化学发光免疫分析仪上使用的HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb试剂剩余混合用于检测，与新试剂的检测结果具有可比性，在严格按说明书保存及规定有效期内使用的前提下，既保证了检验质量, 又能有效节约成本, 值得推广[6]。同时，应在同类型的检测仪器项目中推广，科学实验，有效降低科室成本。

[1] Clinical and Laboratory Standards Institute.EP15-A2.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methods[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2000.

[2] National Committee for Clinieal Laboratory Standards. EP9-A2 Method Comparison and BiasEstimation Using patient Samples[S].Wayne,PA:NCCLS,2002.

[3] 刘振杰,钟伟国,曹永坚，等.关于全自动电化学发光免疫分析仪HCV剩余试剂再利用的研究[J].职业与健康,2015,31(8):1114-1119.

[4] 于淼琛,李士军,孙国华，等.生化部分常规项目干湿化学检测结果一致性分析[J].大连医科大学学报,2016, 38(2):172-176.

[5] 黄维纲,贾汝静,张健，等.医学检验领域能力验证计划的比较[J].检验医学,2013,28(10):937-943.

[6] 彭德珍,林武洲. 应用质控品对罗氏混合回收试剂稳定性的观察[J].检验医学与临床,2010,7(4):343-344.

Recycling value of remaining reagent by Roche e601 electrochemiluminescence analyzer

YU Miao-chen1,PAN Li-yang2,ZHU Hong1

(1.ClinicalLaboratory,theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116011,China; 2.DepartmentofInfectiousDiseasesandEndemic,DalianCityCenterforDiseaseControlandPrevention,Dalian116011,China)

Objective To evaluate the recycling value of remaining reagent by Roche e601 electrochemiluminescence analyzer. Methods The precision, accuracy, comparison and correlation analysis were performed between original reagents and recycling reagents for HBsAb、HBcAb、HBeAg、and HBeAb. Results The intra batch precision results of level 1 were 3.43,3.88,2.04,1.22 respectively，the intra batch precision results of level 2 were 1.22,2.40,1.09,1.66 respectively；the inter batch precision results of level 1 were 5.17,4.55,3.70,3.74 respectively；the inter batch precision results of level 2 were 4.99,3.93,4.16,6.91 respectively. The accuracy result was consistent with the EQA result；the correlation coefficient of HBsAb was 0.999；the positive rate and negative coincidence rate(%)of HBcAb,HBeAg,HBeAb were 100%. Conclusion The remaining reagents can be combined and recycled by Roche e601, demonstrate good stability and ensure the quality of measurement.

Roche e601; recycling of remaining reagent; electrochemiluminescence

于淼琛(1982-)，女，辽宁大连人，主管技师。E-mail：ymc7788999@163.com

朱 鸿，主任技师。E-mail：zhuhong0411@126.com

��著

10.11724/jdmu.2016.05.16

R446.69

A

1671-7295(2016)05-0480-03

2016-06-20；

2016-09-11)