生血宝合剂对心梗后心衰大鼠心功能及心肌结构的影响

张　洋，张　艳，刁凤声，王仁和

(1.大连医科大学附属第二医院 中医理疗科，辽宁 大连 116027；2.辽宁中医药大学附属医院 心内科，辽宁 沈阳 110032；3.辽宁中医药大学 研究生学院，辽宁 沈阳 110032)



生血宝合剂对心梗后心衰大鼠心功能及心肌结构的影响

张洋1,3，张艳2，刁凤声1，王仁和3

(1.大连医科大学附属第二医院 中医理疗科，辽宁 大连 116027；2.辽宁中医药大学附属医院 心内科，辽宁 沈阳 110032；3.辽宁中医药大学 研究生学院，辽宁 沈阳 110032)

目的观察生血宝合剂对心梗后心衰大鼠心功能及心肌结构的影响。方法以冠脉结扎配合力竭式游泳制作心梗后大鼠心衰模型，将造模成功存活的大鼠随机分为模型组、赖诺普利组、生血宝合剂组，每组10只；未行冠脉结扎术的大鼠10只为对照组。各组均通过灌胃给药或蒸馏水，给药6周后超声心动图检测左室收缩末期容积(ESV)、左室舒张末期容积(EDV)、左室射血分数(LVEF)和左室每搏输出量(SV)，后处死全部大鼠，取心肌组织HE染色观察心肌组织结构变化。结果与对照组比较，模型组、生血宝合剂组及赖诺普利组ESV、EDV明显升高，LVEF、SV显著下降，差异均有显著性意义，P<0.05。与模型组比较，生血宝合剂组及赖诺普利组ESV、EDV显著下降，LVEF、SV明显升高，差异均有显著性意义，P<0.05。生血宝合剂组与赖诺普利组比较，ESV、EDV、LVEF及SV数值，差异均无显著性意义，P>0.05。HE染色显示，对照组心肌细胞排列整齐、致密、结构清晰，细胞外间质较少，可见少量成纤维细胞。模型组心肌细胞淡染，排列紊乱，细胞间隙增大、形态模糊，成纤维细胞增多，伴有炎症细胞浸润。生血宝合剂组及赖诺普利组心肌细胞形态较清晰，成纤维细胞和炎症细胞少见。结论生血宝合剂可改善心梗后心衰大鼠心功能，修复受损的心肌组织，起到治疗心衰的作用。

生血宝合剂；心梗后心衰；心功能；心肌结构

[引用本文]张洋，张艳，刁凤声，等.生血宝合剂对心梗后心衰大鼠心功能及心肌结构的影响[J].大连医科大学学报，2016,38(5)：436-439.

心力衰竭(简称心衰)是各种心血管疾病发展的终末阶段，其发病率、致残率以及病死率较高。心室重构引起的心肌结构改变和心功能下降是心衰发生发展的病理生理基础。赖诺普利为血管紧张素转换酶抑制剂，是目前治疗心衰的基石性药物，具有抑制心室重构及改善心功能等作用。生血宝合剂据中医“精血相生”理论组方，已有研究证实具有调节免疫、抗血栓、调血脂，抗氧化、促进红细胞生成及调节细胞分布紊乱等多重作用[1-2]。目前尚鲜见生血宝合剂对心衰相关影响的研究报道。本研究拟通过与赖诺普利疗效进行比较，观察生血宝合剂对心梗后心衰大鼠心功能及心肌结构的影响，研究其作用机制及靶点，为中医药防治心衰提供新策略。

1　材料和方法

1.1实验动物

选用普通级，12周龄，健康雄性SD大鼠100只，体重220～260 g。由辽宁长生生物技术有限公司提供[SCXK(辽)2010-0001]。

1.2造模与分组

选取90只大鼠经1周适应性喂养后采用2%戊巴比妥钠溶液，按48 mg/kg剂量行腹腔注射麻醉。胸部备皮，于左侧第4肋间开胸，分离胸部肌肉，暴露肋骨，分离肋骨间组织，剥离心包膜，于冠状动脉前降支起点处结扎前降支[3]；心脏表面给予利多卡因注射液约0.1 mL，以预防室性心律失常，分层缝合胸壁[4-5]，术后记录心电图。心电图ST段上抬0.05 mV以上或出现病理性Q波为判定心梗造模成功标准。术后连续注射青霉素钠3 d，预防感染。常规喂养1周后，于第2周行力竭式游泳(把大鼠置于长2 m宽1.5 m水池中，水深约1 m，以大鼠头部完全沉入水中，肢体无明显摆动判断为力竭)，1次/d，共4周[6-7]。后行超声心动图检测，以左室射血分数(EF)≤60%或计算心脏指数(CI)≤180 mL/(min/kg)为心衰造模成功标准[8-9]。造模过程中，大鼠存活41只，死亡49只。将存活的大鼠随机分为模型组、赖诺普利组、生血宝合剂组，每组10只；未行冠脉结扎术的大鼠10只为对照组。

1.3药物与给药剂量

生血宝合剂(每瓶100 mL)，由清华德人西安幸福制药生产，国药准字：Z20050770。赖诺普利片(每片10 mg)，由信谊万象药业股份提供，国药准字：H1096026。对照组与模型组灌胃蒸馏水1.5 mL/次，2次/d。给药组按人鼠剂量换算，给药剂量(g/kg)=给出的人的剂量(g)×系数(0.018)/所求动物体重(kg)[10]，灌胃给药。生血宝合剂组，给药为9.2 g生药/kg，2次/d；赖诺普利组，1.5 mg生药/kg，2次/d。各组均灌胃6周。

1.4检测方法

给药6周后，各组大鼠行超声心动图检测左室收缩末期容积(ESV)、左室舒张末期容积(EDV)、左室射血分数(LVEF)和左室每搏输出量(SV)。后处死全部大鼠，取心肌组织1.5 cm3，10%福尔马林溶液固定，HE染色，光学显微镜观察并摄片。

1.5统计学方法

2　结　果

2.1各组大鼠心功能情况

与对照组比较，模型组、生血宝合剂组及赖诺普利组ESV、EDV明显升高，LVEF、SV显著下降，差异均有显著性意义，P<0.05。与模型组比较，生血宝合剂组及赖诺普利组ESV、EDV显著下降，LVEF、SV明显升高，差异均有显著性意义，P<0.05。生血宝合剂组与赖诺普利组比较，ESV、EDV、LVEF及SV数值差异均无显著性意义，P>0.05。见表1。

表1　各组大鼠心功能变化情况

1)与对照组比较，P<0.05；2)与模型组比较，P<0.05

2.2各组大鼠心肌组织HE染色结果

对照组：心肌细胞排列整齐、致密、结构清晰，细胞外间质较少，可见少量成纤维细胞。

模型组：心肌细胞淡染，排列紊乱，细胞间隙增大、形态模糊，成纤维细胞增多，伴有炎症细胞浸润。

生血宝合剂组及赖诺普利组：心肌细胞形态较清晰，成纤维细胞和炎症细胞少见。见图1。

图1　各组大鼠心肌组织HE染色Fig 1 The rats myocardial tissue HE staining results(HE ×40)A:对照组；B:模型组；C:赖诺普利组；D:生血宝合剂组

3　讨　论

现代医学中的心衰与中医文献记载的心衰存在着一定差异，属中医学“胸痹、痰饮、不寐、水肿、喘证、心悸”等范畴[11-12]。其病机之根为阳微阴弦本虚标实之证候，本虚以心肾气虚为主，标实则以心血亏虚为重。故补益心肾，调和气血为其有效治则。心室重构是心衰发生发展的病理生理基础[13]；心室重构发生后，心室射血功能的下降和心室容量的增加可导致心室肥厚，出现心肌细胞结构排列紊乱，进而加速了心衰进程[14-15]。

生血宝合剂为棕褐色液体，气微香，味甜、微苦，其主要成分为黄芪、白芍、桑葚、何首乌、女贞子、黑早莲、狗脊等，具有益气生血，滋补心肾之功效。赖诺普利为血管紧张素转换酶抑制剂，具有抑制心室重构及改善心功能等作用。本实验通过对大鼠行冠脉结扎术及配合力竭式游泳的方法，成功制作了大鼠心梗后心衰模型，予生血宝合剂及赖诺普利进行干预观察。行超声心动图发现，与对照组比较，模型组大鼠心功能明显下降，生血宝合剂组及赖诺普利组大鼠心功能较模型组有明显改善。行心肌组织HE染色发现，模型组心肌细胞淡染，排列紊乱，细胞间隙增大、形态模糊，成纤维细胞增多，伴有炎症细胞浸润。生血宝合剂组及赖诺普利组心肌细胞形态较清晰，成纤维细胞和炎症细胞少见。本实验结果提示生血宝合剂与赖诺普利均可改善心梗后心衰大鼠心功能，可修复受损心肌组织。其作用机制可能是通过改善受损心肌纤维的抗牵拉性、弹性及提高心室顺应性，进而达到治疗心衰的作用。本研究表明，生血宝合剂中各味中药配伍后，其功效在治疗心衰过程中起到了协同及促进作用，为中医“气能生血，血能养气”的理论提供了科学客观的实验依据，佐证了“补益心肾，调和气血”治则在治疗心衰中的重要意义。本研究为生血宝合剂防治心衰提供了实验研究基础。生血宝合剂价格较为低廉，具备较好的经济依从性，可期待其作为防治心衰的新手段。但其防治心衰的疗效还有待于进一步临床研究予以证实。

[1] 易小兰，杨华，张飞飞，等.生血宝合剂的多成分HPLC指纹图谱[J].中国实验方剂学杂志，2016，22(1):57-60.

[2] 赵岗，惠爱武，杨甫昭，等.生血宝合剂与环磷酰胺合用治疗S180的增效作用和升高白细胞作用[J].陕西中医，2011，32(9):1252-1253.

[3] 李军，吕双红，薛剑，等. 大鼠心肌梗死后心力衰竭模型的建立及评价[J].标记免疫分析与临床，2015，22(10):1037-1041.

[4] 礼海.益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌MMP-1、TIMP-1影响相关性及抗心室重构机制的研究[D].沈阳：辽宁中医药大学，2010.

[5] 马金.益气活血复方联合运动训练对慢性心衰大鼠的心功能及左室重构影响的实验研究[D].沈阳：辽宁中医药大学，2011.

[6] 张艳，廖佳丹，王彩玲.益气活血利水不同配伍对慢性心衰大鼠MMP-9影响的实验研究[J].时珍国医国药，2012，23(8):1937-1939.

[7] 张艳，胡晓红，廖佳丹，等.不同中药复方对慢性心衰大鼠MMP-2、TIMP-2影响的实验研究[J].辽宁中医杂志，2012，39(7):1205-1207.

[8] 廖佳丹，张艳，宫丽鸿，等.益气活血利水不同配伍对慢性心衰大鼠AT1、ERK2影响的实验研究[J].中华中医药学刊，2012，30(10):2270-2273.

[9] 宫丽鸿，张艳，高峰.益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织MMP-1、I型胶原、BNP的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志，2011，9(2):189-190.

[10] 张艳，廖佳丹，王彩玲.不同中药复方对慢性心衰大鼠MMP-2、TIMP-2的影响[J].北京中医药大学学报，2013，36(6):409-410.

[11] 罗良涛，付帮泽，郭淑贞，等.中医古籍中的“心衰”及其与心力衰竭的关系[J].中医杂志，2014，55(6): 532-534．

[12] 张艳,礼海，王彩玲.慢性心衰气虚血淤临床辨证规律研究[J].时珍国医国药，2010，21(12): 1-2．

[13] 徐玉平，钱海兵.益母草碱对梗死后心衰大鼠的实验研究[J].时珍国医国药，2015，13(11): 144-145．

[14] 张洋.益气活血复对慢性心衰大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原表达影响的实验研究[D].沈阳：辽宁中医药大学，2011.

[15] 贾政，魏玲，刘茜，等.重组腺病毒介导Klotho基因转导对大鼠心力衰竭心肌重构的影响[J].中华心血管病杂志,2015,43(3):219-220.

Shengxuebao mixture effect on cardiac function and cardiac structure for heart failure after myocardial infarction rats

ZHANG Yang1,3, ZHANG Yan2, DIAO Feng-sheng1, WANG Ren-he3

(1.DepartmentofTraditionalChineseMedicineandPhysicalTherapy,theSecondAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116027,China; 2.DepartmentofCardioiogy,AffiliatedHospitalofLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shenyang110032,China;3.GraduateSchool,LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shenyang110032,China)

Objective To observing Shengxuebao mixture effect on cardiac function and cardiac structure for heart failure after myocardial infarction rats. Methods coronary artery ligation method and swimming exhaustion caused by the rats heart failure model after myocardial infarction，the Survivals were randomly divided into model group，Lisinopril group，Shengxuebao mixture group，no coronary artery ligation in rats as control group，10 rats in each group，by gavage administration or distilled water. After 6 weeks of medication，by doppler echocardiography machine detected between groups in the rats cardiac function；Using HE staining to observe the structure changes of myocardial tissue. Results Compared with control group, model group, Shengxuebao mixture group and lisinopril group ESV and EDV were significantly higher, LVEF and SV dropped significantly,P<0.05. Compared with model group, Shengxuebao mixture group and lisinopril group ESV, EDV dropped significantly, LVEF and SV increased significantly,P<0.05.Shengxuebao mixture group Compared with Lisinopril group，ESV,EDV,LVEF and SV were no significant difference，P>0.05.HE staining results: Control group myocardial cell neatly, compact, the structure was clear, the outer cell mass was less, can be found in a small amount of fibroblasts.Model group myocardial cell light dye, disordered arrangement, intercellular space increases, ambiguous, fibroblasts increased, accompanied by inflammatory cells infiltration. Shengxuebao mixture group and lisinopril group myocardial cell morphology was clear, that can be found small amount of fibroblast cells and inflammatory cells. Conclusion Shengxuebao mixture can improve cardiac function in rats with heart failure after myocardial infarction and repair damaged heart tissue, thus achieve effect for the treatment of heart failure.

Shengxuebao mixture; heart failure after myocardial infarction; cardiac function; cardiac structure

辽宁省科学事业公益研究基金项目(2013001002)

张 洋(1983-)，男，辽宁新民人，博士研究生。E-mail:yangzhang44944 @163.com

刁凤声，教授。E-mail:Diaofs1964@163.com

��著

10.11724/jdmu.2016.05.05

R289.9

A

1671-7295(2016)05-0436-04

2016-06-04；

2016-09-10)