基于川楝子不同部位川楝素含量的古今炮制方法与临床用量研究

黄立辉，张志国，杨磊

（1.湖南省监狱管理局中心医院，湖南长沙410014；2.湖南中医药大学第一附属医院·国家中医药管理局中药炮制学重点学科，湖南长沙410007）

基于川楝子不同部位川楝素含量的古今炮制方法与临床用量研究

黄立辉1，张志国2，杨磊2

（1.湖南省监狱管理局中心医院，湖南长沙410014；2.湖南中医药大学第一附属医院·国家中医药管理局中药炮制学重点学科，湖南长沙410007）

目的建立川楝子不同部位川楝素含量的高效液相色谱法，并探讨古今炮制方法及用量异同。方法以川楝素为指标，对炒川楝子果皮、果肉、果核进行含量测定。色谱柱为Agilent C18柱（250 mm×4.6 mm，5 m），流动相为乙腈-水（33∶77），检测波长210 nm，流速1.0 mL/min，柱温35℃。结果川楝子果皮、果肉、果核中川楝素含量分别为0.058 9%，0.200 5%，0.002 3%。结论古人在使用川楝子时多去皮、去核，是有一定科学依据的。现今川楝子临床用量和古代剂量相仿，但实际有效成分含量降低，临床用量偏轻。

川楝子；川楝素；炮制；剂量

湖南省中医药管理局基金项目，项目编号：2013134。

川楝子来源于楝科植物楝Melia toosendan Sieb.et Zucc的干燥成熟果实，冬季果实成熟时采收。性味苦寒，有小毒，归肝、小肠、膀胱经［1］。主产于四川、贵州、湖南、湖北等地，以四川产的为道地药材，故称之为川楝子［2］。川楝子是我国传统中药材，历史悠久，来源广，价格低廉，临床应用广，疗效确切［3］。历代炮制方法丰富，现今炮制方法与历代文献中记载的炮制方法存在较大区别，主要为是否去皮、去核。川楝素是川楝子中主要活性成分［4］。现今川楝子用量为5～10 g［1］，与古今剂量相仿，有效成分含量却不同。因此，本研究中以川楝子有效成分川楝素为有效成分［5-10］，对其果实的皮、肉、核不同部位川楝素含量进行研究，以期为川楝子的炮制方法和临床用药的剂量提供参考依据。现报道如下。

1　仪器与试药

1.1仪器

LC-20AT型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；T-214型电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；LT-102型粉碎机（北京兴时利和科技有限公司）；DK-S26型电热恒温水浴锅（上海森信实验仪器有限公司）。

1.2试药

川楝子饮片（安徽沪樵中药饮片厂，批号为20150212）；川楝素对照品（中国药品生物制品检定所，批号为58812-37-6）。乙腈为色谱纯（天津科密欧化学试剂），其他试剂均为分析纯，水为超纯水。

2　方法与结果

2.1样品准备

川楝子：取川楝子除去杂质；炒川楝子：取净川楝子按2015年版《中国药典（一部）》（通则0213）炒至表面焦黄色，摊凉。分别将川楝子和炒川楝子的果皮、果肉和果核分离备用。

2.2溶液制备

2.2.1对照品溶液

精密称取川楝素对照品2.8 mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，即得质量浓度为0.28 g/L的对照品溶液。

2.2.2供试品溶液

取炒川楝子各部位样品粉末，过3号筛，称取约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定质量，置水浴锅中水浴（80℃）回流提取1 h，取出，放冷，称重，用甲醇补足减失的质量，摇匀，过滤，取续滤液过0.22 μm微孔滤膜，即得。

2.3川楝素含量测定

2.3.1色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Agilent C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-水（33∶77）；检测波长：210 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：35℃。色谱见图1。

2.3.2方法学考察

线性关系考察：分别精密吸取川楝素对照品溶液0.1，0.5，1.0，3.0，5.0 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至质量浓度分别为每1 mL含川楝子素2.8，14，28，84，140 μg。分别进样10 μL，测定其峰面积，以进样量为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为Y=200 068 X+10 192，r2=0.999 6（n=5）。结果表明，川楝素进样量在0.002 8～1.4 μg范围内与峰面积具有良好的线性关系。

图1　高效液相色谱图

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液，重复进样6次，测定川楝素的含量。结果的RSD为0.65%（n=6）。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0，2，4，6，8，10 h时进行川楝素峰面积测定。结果的RSD为1.22%（n=6）。

重复性试验：取同一批号样品，按照2.2.2项下供试品溶液的制备方法，分别制备6份供试品溶液，测定川楝素的峰面积。结果的RSD为1.41%（n=6），表明方法重复性好。

加样回收试验：精密称定己知含量的样品6份，各1 g，分别精密加入一定量的川楝素对照品，依法测定，计算加样回收率。结果见表1。

2.3.3样品含量测定

取各供试品溶液，按拟订色谱条件，进样10 μL，测定川楝素峰面积，计算含量，结果见表2。

表1　川楝素加样回收试验结果（n=6）

表2　炒川楝子果实不同部位川楝素的含量测定结果（n=3）

3　讨论

《神农本草经》曰：“主温疾伤寒，大热烦狂，杀三虫疥疮，利小便水道。”现代《中国药典》记载：具有疏肝泄热、行气止痛、杀虫的作用，用于肝郁化火，胸胁、脘腹胀痛，疝气疼痛，虫积腹痛［3］。川楝子的炮制方法最早见于《雷公炮炙论》：“……酒拌浸冷湿，蒸，待上皮软，剥去皮，取肉去核，勿单用其核……”。后历代炮制方法中都多去皮核，如去核用（唐《精微》）；蒸去皮核，酒浸去皮核，面炒（宋《太平惠民和剂局方》）；洗过……以刀子削下瓤，去皮核不用（宋《苏沈》）；酒润去核（明《通玄》）；入丸，用核，槌细，入煎用肉不用核（清《外科证治全生集》）；盐水泡去核（清《医宗金鉴》）；近惟酒炒，亦有去肉取皮用，则苦寒性减（清《本草害利》）。由此可见，古人认为川楝子果实的皮、肉和核的作用和药效是不相同的，多以去皮、核用肉为主。2015年版《中国药典（一部）》将川楝子分为生品川楝子和炒川楝子，生品的炮制方法为除去杂质，用时捣碎；炒川楝子炮制方法为取净川楝子，切厚片或碾碎，照清炒法（参照通则0213）炒至表面焦黄色［3］，均未参照古法去皮、核。在临床用量方面，古籍中记载的川楝子用量多为一至三钱，相当于现今的3～9 g。如“治疗妊娠心气痛川楝子、小茴香（炒）各三钱，艾叶末（盐炒）半钱。上作一服，水二钟……（《卫生宝鉴》火龙散）”；“治寒疝，以及偏坠，小肠庙痛：川楝子三钱，小茴香五分，木香一钱……（《医方简义》导气汤）”；“治热厥心痛，或发或止，久不愈者：金铃子、延胡索各一两，上为细末，每服二、三钱，酒调下，温汤亦得（《活法机要》金铃子散）”。

由表2可知，川楝子肉中川楝素含量为0.200 5%，皮和核中分别为0.058 9%，0.002 3%。相当于川楝子中76.6%的川楝素在果肉，22.5%的川楝素在果皮，0.88%的川楝素在果核，经炒制后均有一定程度的降低，故古人在炮制时去皮、去核是有一定科学理论依据的。

川楝子各部位有效成分含量不一，导致临床应用剂量也会出现偏差。川楝子果核含量最低，但果核的质量约占整个川楝子重量的40%。果肉含量最高，古人只用果肉，常用量一至三钱，相当于现今的3～9 g，药典规定剂量为5～10 g，虽与古代用量相仿，但实际有效成分含量却降低，临床用量偏轻，建议药典修改川楝子的加工炮制方法，或提高临床用药剂量。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：42.

［2］李良国，张荣娟.川楝子的炮制历史沿革［J］.中草药，1997，28（1）：49-52.

［3］唐大新，熊静悦，谭正怀.川楝子与炒黄川楝子急性毒性作用比较研究［J］.四川生理科学杂志，2013，35（2）：57-59.

［4］李振华，鞠建明，华俊磊，等.中药川楝子研究进展［J］.中国实验方剂学杂志，2015，21（1）：219-223.

［5］杨东升，张金桐.川楝素对家蝇幼虫中肠细胞及淀粉酶活性的影响［J］.寄生虫与医学昆虫学报，2002，9（1）：39.

［6］Li MF，Wu Y，Wang ZF，et al.Toosendan in，a triterpenoid derivative，increases Ca2+current in NG108-15 cells via L-type channels［J］.Neurosci Res，2004，49（2）：197.

［7］Shi YL，Wang ZF.Cure of experimental botulism and antibotulismic effect of toosendanin［J］.Acta Pharmacol Sin，2004，25（6）：839.

［8］齐双岩，金若敏，周志兰，等.川楝子对大鼠肝毒性的时效和量效关系研究［J］.毒理学杂志，2007，21（4）：301.

［9］时等，刘妍如，杨建云，等.中药川楝子的最新研究进展［J］.中国临床药理学与治理学，2012，17（3）：357-360.

［10］陈敏，胡芳.中药川楝子的化学成分研究进展［J］.北方药学，2013，10（8）：70-71.

Study of Ancient and Present Preparation Based on the Content of Toosendanin in Different Parts of Fructus Toosendan

Huang Lihui1，Zhang Zhiguo2，Yang Lei2
（1.Hunan Judicial Police Hospital，Changsha，Hunan，China410014；2.The First Affiliated Hospital of Hunan University of Traditional Chinese Medicine· Science of Processing Chinese Materia Medica Key Discipline of the State Administration of Traditional Chinese Medicine，Changsha，Hunan，China410007）

ObjectiveTo explore the differences and similarities of methods and the dosage of ancient and present processing through determining the content of toosendanin in different parts of Fructus toosendan.M ethodsThe content of toosendanin in peel pulp and kemel was determined.The chromatographic column was Agilent C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），the mobile phase acetonitrile-water（33∶77），the detective length 210 nm，the flow rate 1.0 mL/min，colum temperature 35℃.ResultsThe contents of toosendanin in peel，pulp and kemel were 0.058 9%，0.200 5%and 0.002 3%.ConclusionThe ancients use fructus toosendan with peeled and pitted has some basis in science.Today，we use the ancient toosendan dose with the same clinical dosage，but in fact，the contents of effective ingredients are reduced and the clinical dosage is insufficient.

Fructus toosendan；toosendanin；preparation；dosage

R284.1；R282.71

A

1006-4931（2016）15-0040-03

黄立辉，女，主管药师，主要从事药品管理与药学服务研究工作，（电子信箱）442391066@ qq.com；杨磊，女，硕士研究生，副主任药师，主要从事中药炮制、中药制剂研究工作，本文通讯作者，（电子信箱）yanglei30@sohu.com。

（2016-04-20）