苦参素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究*

王雪芬王　磊陈树杰（1.河北省邯郸市第二医院，河北 邯郸 056001；.河北省邯郸市中心医院，河北 邯郸056001）



苦参素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究*

王雪芬1△王磊2陈树杰2
（1.河北省邯郸市第二医院，河北 邯郸 056001；2.河北省邯郸市中心医院，河北 邯郸056001）

目的 研究苦参素（OMT）对大鼠心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用，并探讨其可能的作用机制。方法 120只大鼠随机分为假手术组，模型组，OMT（25、50、100 mg/kg）组和地尔硫（1 mg/kg）组；通过夹闭冠状动脉30 min后松夹的方法制备心肌缺血再灌注损伤大鼠模型；再灌注后立即通过腹腔注射给药治疗（每天1次，疗程7 d），假手术组和模型组给予等体积生理盐水。通过TTC染色分析计算心肌梗死面积，测定心肌组织中抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）活性和丙二醛（MDA）含量，测定血清中心肌酶（AST、CPK、LDH）含量，HE染色观察心肌组织病理性形态学变化，TUNEL染色观察心肌细胞凋亡状况并计算凋亡指数（AI）；RT-PCR法测定心肌组织中Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达并计算Bcl-2/Bax表达比值，Western blot法测定心肌组织中Caspase-3、NF-κB蛋白表达。结果 经OMT（50、100 mg/kg）治疗7 d能够显著降低心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织梗死面积，改善心肌组织中SOD、GSH-Px、CAT活性并降低MDA含量，降低血清中AST、CPK、LDH含量，改善心肌组织病变，抑制心肌细胞凋亡、降低AI，上调Bcl-2 mRNA表达、下调Bax mRNA表达，提高Bcl-2/Bax比值，降低心肌组织中Caspase-3、NF-κB蛋白表达；与模型组比较，上述差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论 OMT能够降低心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织梗死面积、抑制心肌组织病变和心肌细胞凋亡、改善心功能，提示OMT对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用；作用机制可能与OMT能够有效改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤，调节凋亡相关基因表达以及降低NF-kB蛋白表达有关。

缺血再灌注苦参素心肌保护机制

【Abstract】Objective：To investigate the protective effects of Oxymatrine（OMT）on the rats with myocardial ischemia-reperfusion injury and its mechanism.Methods：120 rats were randomly devided into six groups：sham operation group，the model group，OMT（25，50，100 mg/kg）treated groups and diltiazem（1 mg/kg）treated group；rat models with myocardial ischemia-reperfusion injury were made by clamping the artery for 30min；and the drugs were given after operation immediately，once a day for 7 days.The areas of myocardial infarction were analysised by TTC staining，the activity of SOD，GSH-Px，CAT and the content of MDA in myocardial tissue were determined，as well as the content of AST，CPK，LDH in serum；the histopathological changes of myocardial tissue was observed by HE staining，and the apoptosis of cardiomyocytes was observed by TUNEL and the apoptosis index（AI）was calculated；the expression of Bcl-2 mRNA and Bax mRNA were determined and the ratio of Bcl-2/ Bax were calculated；the expression of caspase-3 and NF-kB were examined with Western blot.Results：The myocardial infarction areas in OMT（50，100 mg/kg）treated groups were significantly decreased；the activity of SOD，GSH-Px，CAT in myocardial tissue were significantly increased and the activity of MDA was significantly decreased，as well as the level of AST，CPK，LDH in serum；the myocardial tissue histopathological changes and cardiomyocytes apoptosis were significantly improved；the AI in OMT（50，100 mg/kg）treated groups were significantly decreased；the expression of Bcl-2 mRNA was significantly up-regulated and the Bax mRNA was signifi-cantly down-regulated；the ratio of Bcl-2/Bax was significantly increased；the expression of caspase-3 and NF-kB protein were significantly decreased；compared with the model group，all of the difference above was significant（P <0.05 or P<0.01）.Conclusion：OMT can effectively lower the myocardial infarction areas of myocardial ischemia-reperfusion injury rats，inhibit the histopathological changes and cardiomyocytes apoptosis，and improve heart function，suggesting that OMT has protective effects on the rats with myocardial ischemia-reperfusion injury，which is perhaps related to its effects on enhancing the activity of antioxidant enzymes，inhibiting the oxidative stress，regulating the expression of apoptosis related genes and protein，and lowering the expression of NF-kB protein.

【Key words】Oxymatrine；Myocardial；Ischemia-reperfusion；Protection；Mechanism

冠心病及其所引发的急性心肌梗死已经发展成为严重危害人类生命健康的主要疾病，目前临床上主要采取溶栓、介入、支架等方法及时恢复血流供应，极大降低了心肌梗死患者的死亡率，但“再灌注损伤”并发症的存在严重影响着该类患者的愈后。因此，研究开发能够有效改善再灌注损伤的药物及治疗方法，成为有效改善心肌梗死患者治疗效果的关键。苦参素（OMT）是从中药苦参（Sophora flavescens Ait.）中提取的一种喹诺西啶类生物碱，具有抗炎、抗病毒、抗凋亡、抗肝纤维化等多种生物学活性［1-3］。有研究发现，OMT对肾脏、肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用［4-5］，但仍未见文献报道OMT是否对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。本实验通过夹闭冠状动脉30 min后松夹恢复血流再灌注的方法制备心肌缺血再灌注损伤大鼠模型，研究OMT对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用，并探讨其可能的作用机制。现报告如下。

1　材料与方法

1.1药物与试剂OMT（南京泽朗医药科技有限公司，批号20141025，纯度≥98%）；注射用盐酸地尔硫（天津田边制药有限公司，批号1408026）；TTC（美国Sigma公司）；超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、T-AOC和丙二醛（MDA）含量测定试剂盒，HE、TUNEL染色试剂盒 （南京建成生物工程研究所）；天门冬氨酸氢基转移酶 （AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶（CPK）测定试剂盒（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）；RNA提取液Trizol试剂盒（北京Trans Gen公司）；bcl-2、bax的上下游引物 （上海博亚生物公司）；Caspase-3、NF-κB单抗 （碧云天生物技术有限公司）。

1.2实验动物清洁级雄性SD大鼠（8周龄，体质量220～260 g），由河北省实验动物中心提供，许可证号：SCXK（冀）2008-1-003，动物合格证号：201408026。

1.3主要仪器DH-150型动物人工呼吸机 （浙江大学医学仪器有限公司）；wi93962生物机能实验系统（北京北瑞达医药科技有限公司）；BS-300全自动生化分析仪 （深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）；UV762型紫外-可见分光光度计 （上海楚定分析仪器有限公司）；RT-PCR仪 （武汉新未来仪器技术有限公司）；BI-2000医用图像分析系统；RM-2135型石蜡切片机 （德国Leica公司）；DYY-11型多用电泳仪、JYSCZ2电泳槽（北京六一仪器厂）。

1.4分组与造模120只实验用大鼠随机分为假手术组，模型组，OMT（25、50、100 mg/kg）组和地尔硫（1 mg/kg）组［6］。模型的制备：麻醉后通过肢体二导联心电图监测心功能，气管切开、插管并连接动物呼吸机（频率60次/min，潮气量20 mL/kg，呼吸比1.5∶1）；稳定10 min后，开胸、剪开心包、暴露心脏，于左心耳下缘约2 mm处夹闭冠状动脉，心电图示ST段抬高或T波高耸表示心肌缺血；30 min后松开动脉夹恢复血流灌注，抬高的ST段降低或高耸的T波得以恢复表示心肌再灌注成功。假手术组行手术通路，除不夹闭冠状动脉外，其余操作与试验组完全一致。再灌注后，OMT各组和地尔硫组立即通过腹腔注射给药治疗，每天1次，疗程7 d，假手术组和模型对照组给予等体积0.9%氯化钠注射液。

1.5标本采集与检测1）心肌组织梗死面积的测定：麻醉后开胸取心脏组织，用0.9%氯化钠注射液冲洗干净，-20℃冻存20 min后进行切片，于1%TTC溶液恒温（37℃）避光孵育15 min，正常组织呈红色、梗死区呈灰白色，然后通过BI-2000医用图像分析系统计算心肌组织梗死面积。2）心肌组织中抗氧化酶活性和MDA含量的测定：参照前法取心脏组织，剪碎后加入适量冷裂解液行研磨匀浆，3000 r/min离心10 min后取上清液，然后按照各试剂盒操作方法步骤，通过紫外-可见分光光度计平行测定各组大鼠心肌组织中抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）活性和MDA含量。3）血清中心肌酶含量的测定：于前法取心脏组织前，开腹经腹主动脉取血并离心取血清，然后按照各试剂盒操作方法步骤，通过全自动生化分析仪测定各组大鼠血清中心肌酶（AST、CPK、LDH）含量。4）心肌组织病理性形态学变化的观察：参照前法取心肌组织，经4%多聚甲醛溶液固定、石蜡包埋，切片和展片处理后，行常规HE染色和封片处理，然后通过倒置光学显微镜观察心肌组织病理性形态学变化并照相保存。5）心肌细胞凋亡的检测：取制备的心肌组织石蜡切片，按照试剂盒操作步骤行TUNEL染色（细胞核黄褐色为阳性着色），然后通过光学显微镜观察各组大鼠心肌细胞凋亡状况并照相保存。凋亡指数（AI）的计算：每张染色切片随机选取6个视野，分别计数细胞总数和阳性细胞数，各组分别取平均值，AI（%）=（阳性细胞数/细胞总数）× 100%。6）心肌组织中Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达的检测及Bcl-2/Bax比值的计算：从基因库中查阅大鼠Bcl-2、Bax、β-actin基因cDNA序列并通过Oligo软件设计上、下游引物。Bcl-2：上游5′-GGGATGCCTTTGT GGAACTA-3′，下游5′-TGATTT GACCATTTGCCTGA-3′；Bax上游5′-ATCCAGGATCGAGCAGGGAGGATGG -3′，下游5′-AGATGGTCACTGTCTGCCATGTGGG-3′；β-actin上游5′-CCTGTATGCC TCTGGTCGTA-3′，下游5′-CCATCTCTTGCTCGAAGTCT-3′。取制备的心肌组织匀浆，加入适量Trizol试剂提取总RNA，测定总RNA浓度，取1 μg RNA反转录为cDNA，然后进行PCR反应，扩增完毕后，取PCR产物于琼脂糖凝胶电泳，通过凝胶成像仪观察并照相。以β-actin为内参，由灰度值进行半定量分析Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达，并计算bcl-2/Bax表达比值。7）心肌组织中Caspase-3、NF-κB蛋白表达的检测：取上述所制备心肌组织匀浆液，经12000 r/min低温（4℃）离心10 min后取沉淀，BCA法进行蛋白定量，然后通过Western blot法测定各组大鼠心肌组织中Caspase-3、NF-κB蛋白表达量，实验结果应用Quantity One软件进行分析。

1.6统计学处理运用SPSS15.0统计软件分析。计量资料以（±s）表示，组间均数比较采用单因素方差分析；计数资料采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　果

2.1各组大鼠心肌组织梗死面积比较见表1。模型组大鼠心肌组织梗死面积较假手术组显著增高 （P< 0.01）；与模型组比较，OMT（50、100 mg/kg）组大鼠心肌组织梗死面积显著减小（P<0.05或P<0.01）。

表1　各组大鼠心肌组织梗死面积及心肌细胞AI比较（±s）

表1　各组大鼠心肌组织梗死面积及心肌细胞AI比较（±s）

与假手术组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

2.2各组心肌组织中 SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量比较见表2。模型组大鼠心肌组织中SOD、GSH-Px、CAT活性较假手术组显著降低 （P< 0.01），MDA含量显著升高 （P<0.01）；而与模型组比较，OMT（50、100 mg/kg）组大鼠SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低 （P<0.05或P< 0.01）。

表2　各组大鼠心肌组织中SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量比较（±s）

表2　各组大鼠心肌组织中SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量比较（±s）

组别假手术组模型组OMT（25 mg/kg）组n 10 10 10 OMT（50 mg/kg）组　10 OMT（100 mg/kg）组　10地尔硫（1 mg/kg）组　10 SOD（U/mg）GSH-Px（U/mg）82.3±11.4　4.9±1.0 47.2±7.6**　2.6±0.8**54.1±8.5　2.9±1.1 62.9±10.3△　3.5±1.1△70.4±12.2△△　4.0±1.5△63.8±9.7△　3.1±1.3 CAT（U/mg）MDA（nmol/mg）4.6±1.3　2.4±0.5 2.5±0.9**　5.1±0.7**2.8±0.7　4.6±0.9 3.4±1.0△　3.5±0.6△△3.9±1.2△△　2.7±0.6△△3.5±0.9△　2.2±0.5△△

2.3各组大鼠血清中AST、CPK、LDH含量比较见表3。模型组大鼠血清中AST、CPK、LDH含量较假手术组显著升高（P<0.01）；而与模型组比较，OMT（50、100 mg/kg）组AST、CPK、LDH含量均显著降低 （P< 0.05或P<0.01）。

表3　各组大鼠血清中AST、CPK、LDH含量比较（U/L，±s）

表3　各组大鼠血清中AST、CPK、LDH含量比较（U/L，±s）

组别假手术组模型组OMT（25 mg/kg）组n 10 10 10 OMT（50 mg/kg）组　10 OMT（100 mg/kg）组　10地尔硫（1 mg/kg）组　10 AST　CPK 276.8±57.1　532.7±64.0 560.4±96.5**1005.4±142.9**519.2±103.7　876.1±137.2 431.6±85.2△　729.5±113.8△△385.7±71.9△△　671.4±98.6△△450.5±93.1△　753.8±120.4△LDH 618.2±73.5 1107.4±136.1**926.8±140.2 815.9±113.4△728.6±108.3△△942.7±144.1

图1　各组大鼠心肌组织比较（HE染色，×400）

2.4各组大鼠心肌组织病变比较见图1。观察心肌组织病理切片发现，假手术组心肌组织结构和心肌细胞形态均未见异常；模型组心肌组织呈现心肌纤维紊乱、断裂，间质水肿变性，心肌细胞呈空泡变性、胞质着色不均、胞核固缩等明显的病理性形态学变化；与模型组比较，OMT组大鼠心肌组织病理性形态学变化明显改善，以OMT（100 mg/kg）组效果最为显著。

2.5各组大鼠心肌细胞凋亡情况比较见图2、表1。假手术组仅可见极少量凋亡心肌细胞，模型组心肌细胞凋亡数量较假手术组明显增多；而与模型组比较，OMT治疗组大鼠心肌细胞凋亡数量明显减少，其中以OMT（100 mg/kg）组最为显著。比较AI发现：模型组心肌细胞AI较假手术组显著升高（P<0.01）；而与模型组比较，OMT（50、100 mg/kg）组大鼠心肌细胞AI显著降低，差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。

图2　各组大鼠心肌细胞凋亡情况比较（TUNEL染色，×400）

2.6各组大鼠心肌组织中Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达和Bcl-2/Bax比值比较见表4。模型组心肌组织中Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达均显著升高 （P< 0.05或P<0.01），Bcl-2/Bax表达比值显著降低 （P< 0.01）；与模型组比较，OMT（50、100 mg/kg）组 Bcl-2 mRNA表达显著升高且Bax mRNA表达显著降低，Bcl-2/Bax表达比值显著升高，差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。

表4　各组大鼠心肌组织中Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达和Bcl-2/Bax比值比较（±s）

表4　各组大鼠心肌组织中Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达和Bcl-2/Bax比值比较（±s）

组别假手术组模型组OMT（25 mg/kg）组n 10 10 10 OMT（50 mg/kg）组　10 OMT（100 mg/kg）组　10地尔硫（1 mg/kg）组　10 Bcl-2（×10-3） Bax（×10-3）35.1±7.4　64.8±17.2 44.8±7.9*　120.5±31.7**51.6±9.3　104.6±35.1 62.4±11.5△　83.9±28.5△△70.1±12.2△△　76.0±24.1△△52.8±10.4　94.2±33.6△Bcl-2/Bax 0.54±0.23 0.36±0.17**0.43±0.21 0.74±0.28△△0.93±0.36△△0.56±0.18△

2.7各组大鼠心肌组织中Caspase-3、NF-κB蛋白表达比较见图3、表5。模型组大鼠心肌组织Caspase-3、NF-κB蛋白表达量较假手术组显著升高（P<0.01）；而与模型组比较，OMT（50、100 mg/kg）组Caspase-3、 NF-κB蛋白表达量均显著降低（P<0.05或P<0.01）。

图3　OMT对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织Caspase-3、NF-κB蛋白表达的影响

表5各组大鼠心肌组织中Caspase-3、NF-κB蛋白表达比较（±s）

组别假手术组模型组OMT（25 mg/kg）组n 10 10 10 OMT（50 mg/kg）组　10 OMT（100 mg/kg）组　10地尔硫（1 mg/kg）组　10 Caspase-3/β-actin　NF-κB/β-actin 0.20±0.04　0.17±0.03 0.46±0.09**　0.43±0.09**0.41±0.10　0.39±0.08 0.36±0.07△　0.32±0.09△0.27±0.06△△　0.24±0.05△△0.32±0.08△　0.30±0.07△

3　讨　论

缺血再灌注损伤是病理机制非常复杂，近年来Han ShX等［7］和Zhao YJ等［8］研究发现再灌注后，随着氧的涌入和抗氧化酶活性降低氧自由基大量产生和过剩，而引发广泛的氧化应激损伤以及其继发的细胞凋亡可能是心肌缺血再灌注损伤重要的病理机制，这也为学者研发改善心肌缺血治疗效果的新型药物提供了新的思路。OMT是中药苦参的主要活性成分之一，是喹诺西啶类生物碱，具有抗氧化和抗凋亡的生物学活性［5-9］。本实验通过夹闭冠状动脉30 min后松夹恢复血流再灌注的方法制备的心肌缺血再灌注损伤大鼠模型进行研究发现，OMT能够显著降低心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌梗死面积、抑制细胞凋亡、改善心肌组织病变，提示OMT对缺血再灌注损伤大鼠具有保护作用。

正常生理状态下，体内氧自由基的生成与清除处于动态平衡，而缺血再灌注后氧的大量涌入与抗氧化酶活性的降低，将导致该平衡的破坏而引发氧化应激损伤。SOD是体内非常重要的抗氧化酶，它能够催化还原氧自由基生成H2O2，并且能够在GSH-Px或CAT的进一步催化作用下还原生成对人无害的H2O 和O2［10-11］，所以SOD、GSH-Px、CAT的活性能够反映机体抗氧化能力；而脂质过氧化终产物MDA的含量也能间接反映机体氧化应激损伤程度。本实验研究表明，经OMT（50～100 mg/kg）治疗7 d能够显著改善抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）活性、降低MDA含量，降低血清中心肌酶（AST、CPK、LDH）含量，提示OMT具有降低心肌缺血再灌注大鼠氧化应激损伤、改善心功能的作用。

细胞凋亡是一种由多种基因参与调控的程序性死亡的过程，存在着非常复杂的调控机制。Bcl-2基因家族在细胞凋亡过程中起着非常重要的调控作用，其中Bcl-2抑制细胞凋亡、Bax促细胞凋亡，二者间相互作用共同调控细胞凋亡；并且细胞凋亡不仅与Bcl-2和Bax的表达密切相关，甚至更依赖于Bcl-2/Bax比值［12-13］。Caspases蛋白家族参与细胞凋亡启动以及整个过程的调节，其中Caspase-3被认为是各种凋亡刺激因子激活的关键蛋白酶，Cspsase-3激活并介导心肌细胞凋亡被认为是心肌缺血再灌注损伤的重要机制之一［14］。细胞凋亡具有多种诱发因素，包括氧化应激损伤，而NF-κB蛋白则是连接氧化应激和细胞凋亡的“桥梁”；常态下，NF-κB以无活性形式存在于胞质中，而当受到外界因素刺激时NF-κB将进入胞核并调控靶基因的转录与表达，Zhang Q等［15］研究发现NF-κB激活与氧化应激诱导的心肌细胞凋亡密切相关。本实验研究发现，OMT（50～100 mg/kg）治疗7 d能够明显改善心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡状况，显著上调Bcl-2表达、下调促Bax表达、提高Bcl-2/Bax比值，降低凋亡相关蛋白NF-κB、Caspase-3表达，提示OMT能够通过调节凋亡相关基因和蛋白的表达而起到抑制心肌细胞凋亡的作用。

综上所述，OMT可能通过降低氧化应激损伤和抑制细胞凋亡对心肌缺血再灌注损伤大鼠起到保护作用；今后可通过培养心肌细胞并制作缺氧复氧损伤细胞模型、给予OMT进行干预，从而在体外细胞水平上进一步探讨OMT对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。

［1］黄秀梅，李波.氧化苦参碱对TNF-α、IL-6和IL-8的影响［J］.中成药，2003，25（11）：903-906.

［2］任衍菊，张玉萍，金敏，等.氧化苦参碱体外抗乙型肝炎病毒作用［J］.中国实验方剂学杂志，2012，18（14）：175-179.

［3］孔秀岩，苏志刚.氧化苦参碱对细胞凋亡影响的研究现状［J］.河北医药，2007，29（12）：1371-1373.

［4］贾昌盛，孙建军，李美德，等.苦参素降低大鼠肾脏缺血-再灌注损伤［J］.基础医学与临床，2012，32（8）：943-947.

［5］ 孟凡强，姜洪池，孙学英，等.苦参素对大鼠肝缺血再灌注中肝细胞的保护作用及其机制探讨［J］.中华医学杂志，2005，85（28）：1991-1994.

［6］陈晓光，王岩，吴岩，等.鹿茸多肽对大鼠心肌缺血损伤的保护作用［J］.中国中药杂志，2009，34（15）：1971-1974.

［7］Han ShX，Yao HL，Li YY，et al.Protective effects of Cuscuta chinensis Lam.extract on myocardial ischemia/reperfusion injury in rats［J］.Chin Pharmacol Bull，2011，27（4）：533-536.

［8］Zhao YJ，Wang YL，Du LJ，et al.Effect of spermine preconditioning on myocardial ischemia/reperfusion injury and cardiomyocyte apoptosis in isolated perfused rat heart［J］.Chin Pharmacol Bull，2012，28（8）：1135-1140.

［9］李文，朱丽君，骈溶亮，等.苦参素对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用及其作用机制［J］.中药药理与临床，2013，29（3）：46-48.

［10］Lartigue A，Burlat B，Coutard B，et al.The megavirus chilensis Cu，Zn-superoxide dismutase：the first viral structure of a typical CCS-independent hyperstable dimeric enzyme［J］.J Virol，2014，2588（14）：254-261.

［11］Jin Y，Liu K，Peng J，et al.Rhizoma dioscoreae nipponicae polysaccharides protect HUVECs from H2O2-induced injury by regulating PPARγ factor and the NADPH oxidase/ROSNF-κB signal pathway［J］.Toxicol Lett，2014，232（1）：149-158.

［12］张彦清，刘保江，田首元.丙泊酚对大鼠离体缺血/再灌注心肌细胞凋亡和Bcl-2/Bax蛋白表达的影响［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2011，9（1）：55-57.

［13］Jayanthi S，Deng X，Bordelon M，et al.Methamphetamine causes differential regulation of pro-death and anti-death Bcl-2 genes in the mouse neocortex［J］.FASEB J，2001，15 （10）：1745-1752.

［14］徐强，司良毅，张红.大鼠心肌再灌注不同时相Caspase-3激活与心功能变化的关系［J］.第三军医大学学报，2005，27（23）：2338-2340.

［15］Zhang Q，Huang WD，Lv XY，et al.Ghrelin pro tects H9c2 cells from hydrogen peroxide-induced apoptosis through NF-κB and mitochondria-mediated signaling［J］.Eur J Pharmacol，2011，654（2）：142-149.

The Protective Effects of Oxymatrine on the Rats with Myocardial Ischemia-reperfusion Injury and Its Mechanism

WANG Xuefen，WANG Lei，CHEN Shujie. Handan Second Hospital，Hebei，Handan 056001，China.

R285.5文献标志码：A

1004-745X（2016）06-0988-05

10.3969/j.issn.1004-745X.2016.06.013

河北省卫生厅重点科技研究计划（20130359）

△（电子邮箱：hdzxyywxl@163.com）

（2015-11-01）