B族溶血性链球菌（GBS）感染对妊娠结局的影响

赵小娅　谢月英　周旭丽　谢纲　文佳　洪威



B族溶血性链球菌（GBS）感染对妊娠结局的影响

赵小娅★谢月英周旭丽谢纲文佳洪威

［摘要］目的探讨妊娠晚期孕妇产前筛查B族溶血性链球菌（group B Streptococcus，GBS）感染的临床价值及对妊娠结局的影响。方法以2014年1月至2014年12月在本院产科门诊就诊的4 091例妊娠晚期孕妇为研究对象，采用实时荧光定量PCR（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RT-PCR）检测是否感染GBS，以检测结果为阳性的孕妇为GBS阳性组，共225例，按1∶1比例在检测结果为阴性孕妇中随机抽取225例作为阴性组，随访该2组孕妇的妊娠结局。结果4 091例孕妇GBS阳性检出率为5.4%（225/4 091）。GBS阳性组与阴性组比较，发生胎膜早破［20.4%（46/ 225）和11.1%（25/225）］、宫内感染［19.1%（43/225）和7.5%（17/225）］、新生儿感染［11.5%（26/225）和5.7% （13/225）］概率均明显增高，差异有统计学意义（P＜0.05）。早产和难产发生率在GBS阳性和阴性孕妇中比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论GBS感染会明显增加胎膜早破、宫内感染及新生儿感染的发生率，对妊娠结局造成不良影响，应对孕晚期孕妇常规进行GBS筛查。

［关键词］B族溶血性链球菌；实时荧光定量PCR；感染；妊娠结局；新生儿

★通讯作者：赵小娅，E-mail：364973677@qq.com

B族溶血性链球菌（group B Streptococcus，GBS）是孕妇生殖道感染的重要致病菌，20世纪70年代起，GBS被证实为新生儿及孕妇感染的主要原因［1-2］。正是由于GBS感染的严峻性，1990年美国疾病控制中心制定了GBS筛查和处理指南，美国妇产科协会、美国儿科协会建议对孕35～37周孕妇进行GBS产前检测，可有效降低新生儿早期败血症感染率达80%左右［3］。此观点渐渐引起了我国围生医学研究者的高度重视。自2014年起，本院采用实时荧光定量PCR技术（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RTPCR）对晚期孕妇进行GBS感染检测，旨在探讨妊娠晚期GBS带菌状况及其对妊娠结局的影响，现报道如下：

1　资料与方法

1.1一般资料

2014年1月至2014年12月在本院产科门诊自愿接受GBS产前筛查的4 091例孕妇，年龄20～41岁，平均年龄28.1岁，孕34～39周，平均孕35.6周，一个月内未使用抗生素。

1.2方法

1.2.1标本采集

采集前先擦去外阴过多分泌物，将一根无菌棉拭子置孕妇阴道内旋转一周采集阴道下1/3的分泌物；再将另一根棉拭子置入肛门，在肛门括约肌上2～3 cm处轻轻取得直肠分泌物。标本置于加盖无菌试管中送检。

1.2.2检测方法

GBS RT-PCR检测试剂由福建泰普生物科学有限公司提供，荧光定量PCR仪为美国ABI公司7300Rt-PCR仪，按照B族链球菌抗酸检测试剂盒进行检测主要步骤如下：（1）样本前处理：在取样拭子管中加入1 mL B族链球菌检测清洗液，用震荡器高速震荡2 min制成标本悬浮液；取出全部样品放入1.5 mL离心管中，13 000 rpm离心5 min弃上清，加入1 mL B族链球菌检测清洗液；震荡重悬，13 000 rpm离心5 min弃上清；（2）核酸提取：沉淀用50 μL清洗缓冲液重悬；加入提取固形物，高速涡旋震荡5 min破碎细胞。95℃干浴2 min，立即冰浴2～5 min，13 000 rpm离心1 min，上清液用于PCR扩增。样本检测的其余操作步骤和PCR反应条件按照说明书进行。

1.2.3诊断标准

（1）宫内感染：产时产妇发热、体温≥38℃；产妇脉搏＞100次/min；胎儿心动过速，胎心率持续＞160次/min，孕妇末梢血白细胞计数＞15.0×109/L，中性粒细胞比例明显增高；子宫压痛；羊水有臭味，符合以上任何2项者诊为宫内感染［4］。（2）新生儿感染：孕妇有宫内感染、胎膜早破等高危因素，新生儿体温升高及体温不升，肤色苍白，精神萎靡，拒奶、呕吐等临床表现，末梢血白细胞计数＞25.0× 109/L。

1.3统计学处理

所有资料应用SPSS 13.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2　结果

2.1妊娠晚期孕妇GBS感染率

4091例孕检孕妇中，GBS阳性225例，阳性率为5.4%，部分样本实时荧光定量PCR扩增结果见图1。

2.2妊娠妇女的一般情况

检测结果阳性孕妇作为GBS阳性组，共225例，按1∶1比例在检测结果为阴性孕妇中随机抽取225例作为阴性组。GBS阳性组平均年龄26.9岁，平均孕35.5周；GBS阴性组平均年龄27.3岁，平均孕35.7周，两组年龄、孕周情况比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具体结果见表1。

2.3GBS阳性组和阴性组孕妇的妊娠结局

GBS阳性组对用药顾虑未予抗生素干预治疗。GBS阳性组孕妇胎膜早破、宫内感染及新生儿感染率发生率较阴性组明显增高，差异均有统计学意义（P＜0.05），而两组孕妇早产、难产发生率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），结果详见表2。

3　讨论

GBS是一种革兰氏阳性链球菌，寄居于阴道和直肠，20世纪60年代首次发现其可以导致严重的新生儿感染，随后进行了大量的研究，发现GBS在围产期感染中是第一位的致病菌，可以导致围产儿死亡［5］，同时可以明显增加宫内感染的发生率，给母儿预后造成严重威胁。西方国家一直以来对其非常重视，美国疾病控制中心制订的GBS筛查和处理指南［5］已经很大程度上减少了围产期B族链球菌感染的发生率和危害。对于妊娠孕妇GBS带菌率文献报道各不相同，孕期GBS感染率在东西方国家一直存在较大差异，以美国及北欧为首的发达国家中，GBS几乎成为围产期感染的主要致病菌，感染率为5%～35%［6］，另有研究报道为10%～30%［6-7］。

表1　2组妊娠妇女的一般情况Table 1　Information for the 2 groups of pregnant women

表2　GBS阳性与阴性组孕妇妊娠结局比较Table 2　Comparison of the outcomes between the GBS-positive and GBS-negative cases

我国目前产妇GBS带菌情况尚不作为常规检查，也无大标本的流行病学资料，但有条件的地区已经在做筛查和诊断性检查。马延敏等［8］报道北京地区孕妇GBS感染率为11.07%；陈慧慧等［9］检测上海地区992名孕妇带菌率为3.70%，黄永健等［10］报道江西地区孕妇GBS感染率为8.76%。本研究采用RT-PCR对4 091例晚孕期孕妇进行检测，GBS感染率为5.4%，稍高于陈慧慧等的报道，但低于全国其他地区的报道。孕妇的GBS带菌率受很多因素影响，如检测方法，以往常用的筛查方法是细菌培养，但是细菌培养耗时长，假阳性率高。另外，阴道菌种和菌落的可变性。例如，35周或更早的检查结果是阴性，但在分娩前可出现GBS感染。同时，不同人群由于社会经济和卫生保健水平的不同，孕妇GBS带菌率也会存在较大差异。

本研究结果发现，GBS阳性组妊娠晚期孕妇发生胎膜早破、宫内感染概率明显增高，这是由于GBS可上行感染胎膜，通过炎症细胞的吞噬作用及细菌产生的蛋白水解酶的直接侵袭，使胎膜局部张力减少，从而导致胎膜早破，病原微生物可上行入侵宫腔，引起羊水、胎膜、胎盘感染，即宫内感染。同时，GBS感染也将增加新生儿感染的风险，这与其他研究者［8-9］的报道相符。本研究中早产的发生率阳性组稍高于阴性组，但差异无统计学意义，可能与取样孕周定在35周以后，已将大部分早产排除在外，同时也可能与样本量少有关。近年来，RT-PCR因灵敏性和特异性高、稳定、及时、检测时间短，操作方便等优势，已成为临床筛查GBS的热门方法［11］。然而，在妊娠期孕妇GBS筛查之后预防性治疗方面还存在较多问题，有报道指出孕妇产时应使用预防抗生素以应对新生儿GBS感染［12］。但事实上尽管进行预防性治疗防治GBS感染，新生儿发病率和死亡率仍然很高，包括分娩期抗生素治疗实施不当、抗生素耐药等。面对中国庞大的患者群，如何进行筛查普及和预防性的治疗，以及如何避免过度治疗都是需要慎重考虑的。

参考文献

［1］ Pettrsson K.Perinatal infection with group B streptococci［J］.Semin Fetal Neonatal Med，2007，12（3）：193-197.

［2］ Ahmadzia HK，Heine RP.Diagnosis and management of group B streptococcus in pregnancy［J］.Obstet Gynecol Clin North Am，2014，41（4）：629-647.

［3］ Jordan HT，Failey MM，Craig A，et al.Revisiting the need for vaccine prevention of late-onset neonatal group B streptococcal disease：a multistate，populationbased analysis［J］.Pediatr Infect Dis J，2008，27（12）：1057-1064.

［4］ Sweet RL，Gibbs RS.Infectious diseases of the female genital tract，fifth ddition［J］.Clin Infect Dis，2010，50（7）：1076.

［5］ 林穗青，程蔚蔚.晚期妊娠宫内感染253例临床分析［J］.中国实用妇科与产科杂志，2012，28（12）：935-937.

［6］ Barcaite E，Bartusevicius A，Tameliene R，et al.Prevalence of maternal group B streptococcal colonisation in European countries［J］.Acta Obster Gynecol Scand，2008，87（3）：260-271.

［7］ Park JS，Cho DH，Yang JH，et al.Usefulness of a rapid real-time PCR assay in prenatal screening for group B streptococcus colonization［J］.Ann Lab Med，2013，33（1）：39-44.

［8］ 马延敏，吴连方，黄醒华，等.孕妇B族溶血性链球菌带菌与母婴预后的探讨［J］.北京医学，2005，27（9）：516-518.

［9］ 陈慧慧，范建霞，陆庭嫣，等.孕妇B族溶血性链球菌感染对母婴的影响［J］.上海医学，2009，32（2）：128-130.

［10］黄永健，陈波，张勇，等.孕晚期妇女B族链球菌PCR检测结果分析［J］.江西医药，2013，48（7）：581-584.

［11］Morozumi M，Chiba N，Igarashi Y，et al.Direct identification of Streptococcus agalactiae and capsular type by real-time PCR in vaginal swabs from pregnant women［J］.J Infect Chemother，2015，21（1）：34-38.

［12］Edmond KM，Kortsalioudaki C，Scott S，et al.Group B streptococcal disease in infants aged younger than 3 months：systematic review and meta-analysis［J］.Lancet，2012，379（9815）：547-556.

Influence of group B Streptococcus（GBS）infection on pregnancy outcome

ZHAO Xiaoya，XIE Yueying，ZHOU Xuli，XIE Gang，WEN Jia，HONG Wei
（Deparment of Pathology，Xiangtan City Maternal and Child Health-Care Hospital，Xiangtan，Hunan，China，411104）

［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the group B Streptococcus（GBS）infection rate in pregnant women during late pregnancy and its influence on pregnancy outcomes.MethodsA total of 4 091 women in later stages of pregnancy who had regular antenatal examinations in the Xiangtan City Maternal and Child Health-Care Hospital were chosen from Jan.2014 to Dec.2014.The method of real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction（RT-PCR）was utilized to detect with the presence of GBS.A 1∶1 matching case control study was carried out with 225 pregnant women positive of GBS and 225 women negative of GBS，and the pregnancy outcomes in the 2 groups were followed up.ResultsThe late pregnancy GBS infection ate in 4 091 pregnant women was 5.4%（225/4 091）.Compared with the GBS negative group，the GBS positive group had a higher incidence of premature rupture of membranes［20.4%（46/ 225）vs 1.1%（25/225）］，intrauterine infection［19.1%（43/225）vs 7.5%（17/225）］，neonatal infection ［11.5%（26/225）vs 5.7%（13/225）］，the difference sare statistically significanct（P＜0.05）.There were no statistically significant differences in the premature birth and dystocia（P＞0.05）.ConclusionsMaternal GBS carrier in late gestation are more likely to have adverse pregnancy outcomes due to increased incidences of intrauterine infection，premature rupture of membranes and neonatal infections.It is necessary for women in later stages of pregnancy to take routine screening of GBS infection.

［KEY WORDS］Group B Streptococcus（GBS）；Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction（RT-PCR）；Infection；Pregnancy outcome；Neonate

作者单位：湘潭市妇幼保健院病理科，湖南，湘潭411104