益生菌对支气管哮喘患儿血清神经生长因子及白细胞介素-33水平的影响

李里力，曹晓莉

(天津市泰达医院 儿科，天津 300457)

益生菌对支气管哮喘患儿血清神经生长因子及白细胞介素-33水平的影响

李里力Δ，曹晓莉

(天津市泰达医院 儿科，天津 300457)

目的 探讨益生菌对支气管哮喘患儿血清神经生长因子(nerve growth factor，NGF)及白细胞介素-33(interleukin-33，IL-33)水平的影响。方法 选取天津市泰达医院儿科收治的74例支气管哮喘患儿，将其随机分为实验组与对照组，每组各37例。对照组患儿在给予控制感染、纠正电解质等常规治疗的基础上，吸入布地奈德气雾剂和特布他林气雾剂，口服酮替芬片、孟鲁司特钠，实验组患儿在对照组的基础上给予益生菌，2组患儿均治疗14 d。比较治疗前后2组患儿血清NGF、IL-33水平及不良反应发生率。结果 治疗后实验组与对照组的血清NGF及IL-33水平均降低，与对照组相比，实验组血清NGF水平较低(P<0.05)，血清IL-33水平较低(P<0.05)；与对照组相比，实验组不良反应发生率比较差异无统计学意义。结论 益生菌能够有效改善支气管哮喘的临床症状和炎症反应，推测其机制可能与益生菌降低支气管哮喘患儿血清NGF及IL-33水平有关。

益生菌；支气管哮喘；血清神经生长因子；白细胞介素-33

支气管哮喘(bronchial asthma，BA)是一种由嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等多种不同细胞及相关细胞组分一同参与的以气道高反应性气道炎症[1]，我国主要城市城区儿童哮喘总患病率为3.02%，2年现患率为2.32%，不同性别、不同年龄、不同地域和不同城市儿童哮喘患病率存在明显差异，仍有近1/3患儿未得到及时和准确诊断，哮喘的用药和管理状况亟待改进[2]，已成为严重威胁公众健康的主要慢性疾病之一。我国儿童哮喘调查显示其患病率约为0.5%～2%, 个别地区则高达约5%。全国至少有2千万左右的患儿[3]。中、重度患儿，临床上多采用支气管舒张类药物，但单纯对症治疗会掩盖炎症发展，使气道高反应性加重。益生菌(Probiotics)是一类能够促进肠道微生物菌群平衡,对宿主健康或生理功能产生有益作用的活性微生物[4]，它不仅能有效的抑制和清除有害菌的生长，还能提升免疫力。目前临床上用益生菌治疗支气管哮喘的研究较少，因此本研究通过观察益生菌对支气管哮喘患儿血清神经生长因子、IL-33水平，以期为益生菌治疗支气管哮喘提供可能的临床依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集天津市泰达医院2013年11月～2015年5月确诊为支气管哮喘的患儿74例。男性42例，女性32例，年龄2～10岁。按照就诊顺序分为实验组和对照组。实验组37例，男性23例，女性14例，年龄2～10岁，平均年龄(6.03±1.46)岁，平均病程(1.03±0.11)年；对照组37例，男性19例，女性18例，年龄2～11岁，平均年龄(6.01±1.40)岁，平均病程(1.09±0.19)年。2组年龄、性别、病程等一般资料比较差异无统计学意义。纳入标准：所有患儿均符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组《支气管哮喘防治指南》[5]关于支气管哮喘的诊断标准；对研究中使用的药物无过敏史；肝肾功能、心电图正常；患儿家属自愿参加本次研究，签署知情同意书，并获得本院伦理协会批准。排除标准：依从性差，不配合治疗者；支气管发作期的危重症患儿；合并严重的心脏疾病、肝肾功能异常等；对研究中所涉及药物过敏。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法：所有患儿均给予控制感染、纠正电解质与酸碱平衡、限制钠盐及水分摄入等常规治疗。对照组：个体化吸入布地奈德气雾剂和特布他林气雾剂，酮替芬片(国药准字H32023240，江苏云阳集团药业有限公司)口服，2～3岁患儿0.5 mg Bid；3～6岁患儿0.75 mg Bid；6～14岁患儿1 mg Bid；在患儿的发病症状得到缓解和控制时停药。孟鲁司特钠(国药准字H20064828, 企业名称：四川大冢制药有限公司)口服，不同年龄段的患儿服用的剂量不同，年龄在4～6岁之间的患儿服药剂量为4 mg qd；年龄在6～14岁的患儿服药剂量为5 mg qd。实验组：在对照组治疗的基础上，加用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片(国药准字S19980004，内蒙古双奇药业股份有限公司)1.0 g/次，3次/d。2组患儿均连续服用14 d。

1.2.2 观察指标：所有患儿均于治疗前后采集清晨空腹静脉血2 mL，加入肝素抗凝后立即低温离心后取得血清。血清神经生长因子(nerve growth factor，NGF)测定采用人神经生长因子ELISA检测盒测定，试剂盒由上海心语生物科技有限公司生产；白细胞介素-33(interleukin-33，IL-33)测定采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELASA)法，试剂盒由上海化学试剂有限公司生产，所用仪器为FX-6MG酶联免疫光谱分析仪。检测方法严格按照试剂盒说明书进行，并严格按照仪器操作规程进行操作和质控。

2 结果

2.1 治疗前后2组患儿血清NGF水平比较 治疗后2组患儿的血清NGF水平与治疗前相比均降低(P<0.05)；与对照组比较，实验组患儿的血清NGF水平较低(P<0.05)。见表1。

组别 例数时间NGF(pg/mL)对照组37治疗前91 65±11 68治疗后70 12±7 06∗实验组37治疗前92 75±10 57治疗后51 34±5 29∗#

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.2 治疗前后2组患儿IL-33水平比较 治疗后2组患儿IL-33水平与治疗前相比均降低(P<0.05)；与对照组治疗后比较，实验组患儿血清IL-33水平较低(P<0.05)。见表2。

组别 例数时间IL⁃33(pg/mL)对照组37治疗前281 64±32 46治疗后223 94±27 64∗实验组37治疗前283 65±31 46治疗后156 97±20 73∗#

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.3 2组患儿的不良反应比较 实验组出现2例心悸，1例恶心呕吐食欲下降，1例头痛，不良反应发生率为10.81%；对照组出现2例心悸，2例恶心呕吐食欲下降，1例头痛，不良反应发生率为13.51%，差异无统计意义(χ2=0.126，P>0.05)。

3 讨论

支气管哮喘简称哮喘，是一种常见而多发的气道慢性炎症性疾病，其发病机制尚不完全明确[6]，已知的机制有变态反应、气道的慢性炎症、气道神经调节失常、气道重构及其相互作用等。支气管哮喘近年来在全世界的发病率都有明显增加的趋势。哮喘的发病多由过敏反应引起的，益生菌是指一类通过改善肠内菌群平衡,对宿主起到有益作用的活性微生物[7]，能够调节过敏IgE抗体和免疫平衡功能，减少由过敏反应引起的细胞激素反应，改善过敏体质，增强肺部免疫功能，加强呼吸道防御能力。本实验通过对患儿血清神经生长因子、IL-33的水平变化以及安全性的检测，来研究益生菌对支气管哮喘的作用机制。

哮喘的病因很复杂，许多因素都能参与和诱发哮喘的发病，在哮喘的气道高反应性上，神经机制发挥着相当重要的作用。NGF是一种能够营养神经元和促进突起生长双重功能的调节因子，对神经的生长具有调节作用，能调控中枢和周围神经元的发育、分化、生长、再生，并在其功能特性的表达中发挥重要作用。NGF还能够影响免疫细胞的活性，来对免疫系统的功能进行调节。NGF与受体结合后，经过一系列反应形成了由轴膜覆盖、含有具备生物活性的NGF的小泡，经轴突转运至胞体，通过某些第二信使体系转导来启动一系列的级联反应，从而对靶细胞中某些蛋白基因的表达进行调控，来发挥它的生物效应。NGF通过对T、B细胞，嗜酸性和肥大细胞等免疫细胞的聚集、活化进行调控，使炎性介质的释放得到促进，并形成恶性循环从而扩大炎症反应[8]。同时，NGF通过对相关细胞生物学效应的启动和增强，使收缩气道的平滑肌神经纤维兴奋性提高，从而使气道的炎症状态长期存在，导致发生气道重塑。有学者研究表明，过敏性疾病尤其是哮喘，其患儿体内神经生长因子的水平明显高于正常人群[9]，且患儿的病情严重程度与NGF升高的水平成正比。实验结果显示，与对照组相比实验组患儿的血清NGF水平明显较低(P<0.05)，证实了益生菌能够减轻支气管哮喘患儿血清NGF水平，进而降低气道高反应性，改善哮喘症状。

IL-33即白细胞介素-33，是IL-1家族的一种细胞因子，它有多种免疫学效应[10]。IL-33的分布比较广泛，在胃、肺等器官组织中的表达程度很高，它在扮演分泌性细胞因子时，能调节和参与Th2免疫反应，起到前炎性因子的作用；在扮演核因子时，能在细胞核内定位，抑制转录。哮喘患儿肺部发生炎症反应，其上皮细胞受损，就会释放大量IL-33入血[11]，之后IL-33与其效应细胞膜上的受体ST2结合，激活MAPK和IRAK4，从而产生TH2相关的细胞因子，例如IL-4、IL-5等，来对Th2类免疫应答产生促进作用，同时使血清IgE和IgA的水平增加，促进哮喘相关因子大量释放，诱导肺的病理性改变。实验结果表明，与对照组比较，实验组患儿的IL-33的生成水平明显较低(P<0.05)，证实了益生菌能够有效改善支气管哮喘患儿的炎症反应。研究结果显示，2组不良反应发生率比较差异无统计学意义，证实了益生菌在治疗过程中的安全性。

本实验通过对74位支气管哮喘患儿的血清生长因子和IL-33的生成水平进行检测分析，以及对安全性的观察和评估，证实了益生菌能够有效降低减轻支气管哮喘患儿的气道高反应性，改善哮喘症状和炎症反应，对临床具有指导意义。

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(编校：王冬梅)

Effect of probiotics on bronchial asthma in children with NGF and IL-33

LI Li-liΔ, CAO Xiao-li

(Department of Pediatrics, Teda Hospital of Tianjin, Tianjin 300457, China)

ObjectiveTo explore the effect of probiotic on bronchial asthma in children with the serum levels of nerve growth factor and IL-33.Methods74 cases of children with bronchial asthma were randomly divided into experimental group and control group, 37 cases in each group. Control group given control infection, correct electrolyte, etc, on the basis of conventional treatment, inhaled budesonide aerosol and terbutaline aerosol, oral methadone for Finn, meng LuSi sodium, on the basis of the experimental group patients in the control group given probiotics, two groups of children with treatment for 14 days.Serum levels of nerve growth factor, IL-33 and incidence of adverse reactions were compared between two groups of children pre and post-treatment.ResultsThe experimental group and control group after treatment, serum levels of nerve growth factor and the level of IL-33 decreased, compared with the control group, experimental group with lower serum levels of nerve growth factor (P<0.05), the lower level of serum IL - 33 (P<0.05); Compared with the control group, incidence of adverse reactions of experimental group was no statistical difference.ConclusionProbiotics can effectively improve the clinical symptoms and inflammation of bronchial asthma, speculated that the mechanism may be related to probiotics reduce children with bronchial asthma on serum levels of nerve growth factor and IL - 33.

probiotics; bronchial asthma; serum levels of nerve growth factor; IL-33

李里力，通信作者，女，本科，主治医师，研究方向：儿内科，E-mail：tjlilili@163.com。

R725.6

A

1005-1678(2016)01-0126-03