江苏省南京市猪伪狂犬病血清流行病学调查

李凤玲，吕宗德（南京市动物疫病预防控制中心，江苏南京 210012）



江苏省南京市猪伪狂犬病血清流行病学调查

李凤玲，吕宗德
（南京市动物疫病预防控制中心，江苏南京 210012）

摘 要：为了解南京市猪伪狂犬病野毒感染情况，2015年对南京市40个猪场660份猪血清进行了伪狂犬病毒gE抗体监测和分析。结果显示，全市共发现7个抗体阳性猪场，场阳性率为17.50%；共检出gE抗体阳性血清31份，抗体阳性率为4.69%。经产母猪gE抗体场阳性率最高，达28.57%，血清gE抗体阳性数占总数的8.57%；而8个后备母猪场均没有检测到gE阳性抗体；断奶前仔猪的gE抗体阳性也相对较低。结果表明，南京市猪场仍有伪狂犬野毒感染或因母本感染野毒导致母源抗体的存在。

关键词：猪伪狂犬病；gE抗体；酶联免疫吸附试验

伪狂犬病毒（PRV）属于疱疹病毒科、猪疱疹病毒属，很多动物对其易感，而猪是PRV的唯一自然宿主，感染后的临床症状主要以母猪流产，产死胎、木乃伊胎，仔猪出现神经症状并大量死亡为主要特征[1]。伪狂犬病也被称作奥耶斯基病（Aujezsky Disease，AD）、疯痒病[2]。

我国自1947年首次报道该病以来，已有20多个省（市）相继报道出现过本病。据统计，我国猪群伪狂犬病平均阳性率在20%以上[4]。近年来，一些规模化猪场逐渐实行猪场净化的政策，其中部分规模猪场已经达到了PRV野毒阴性状态。要彻底消灭猪伪狂犬病，需要采取综合防控措施和有效的检测方法，才能最终消除猪伪狂犬病。

相关研究表明，在PRV野毒感染的猪群中均能检测到病毒的gE基因，而目前国内的伪狂犬疫苗大多缺失gE基因[5]。因此gE可作为“标记”基因，来区别感染和疫苗接种猪。本试验使用gE-ELISA诊断试剂盒对南京市猪伪狂犬病野毒感染情况进行了流行病学调查和分析。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1主要试剂及仪器。酶标仪为Bio-RAD Model 550公司产品；猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒（批号：EL680）购自美国IDEXX公司。

1.1.2血清。随机抽检南京市40个规模养殖场的猪血清660份。所有猪场均未免疫普通的伪狂犬弱毒疫苗或灭活疫苗，部分猪群免疫了gE缺失疫苗。

1.2方法

1.2.1制备血清。采血，4℃ 2 000 rpm，离心10 min，取上清，保存备用。

1.2.2酶联免疫吸附试验。按检测试剂盒操作说明进行。反应包括以下三个步骤：血清样品加入后，血清里的抗体和微孔内包被抗原相结合。洗板后加入酶标抗伪狂犬gE单抗，竞争结合gE病毒抗原。如果血清中没有gE抗体，酶标gE抗体就与gE抗原自由反应，相反，酶标gE抗体与抗原反应被阻断。孵育后，没有反应的标记物被洗掉，加入底物后，与显色剂反应产生蓝色物质。被检样品的A（650）值除以阴性对照的平均A（650）值，计算得出样品/阴性值（S/N）。样品中gE抗体的含量与其A （650）值和S/N成反比。如果S/N低于或等于0.60，样品被判定为gE抗体阳性。

2　检测结果

2.1总体检测结果

在全市40个猪场中共发现7个抗体阳性猪场，场阳性率为17.50% ；共检出gE抗体阳性血清31份，抗体阳性率为4.69%。结果表明南京市猪场仍有伪狂犬野毒感染的可能或母本感染了野毒导致存在母源抗体。具体检测结果见表1。

表1　2015年南京市猪场伪狂犬病流行病学调查结果

2.2群间检测结果

不同猪群的检测结果显示，经产母猪gE抗体场阳性率最高，达28.57%，母猪gE抗体阳性数占总数的8.57%；而8个后备母猪场点均没有检测到gE抗体阳性；断奶前仔猪的gE抗体阳性也相对较低。具体检测结果见表2。

表2　 2015年南京市不同猪群伪狂犬病流行病学调查结果

3　讨论

ELISA方法检测猪群伪狂犬病带毒情况，比较方便、实用，特别适合基层兽医系统的检测。使用gE缺失疫苗，再检测gE基因蛋白抗体，可以有效检验免疫猪是否感染PRV。若血清中显示gE抗体阳性，说明猪体感染了野毒或是母本感染了PRV。本试验中，对gE抗体结果通过S/N的比值显示，大于0.7是阴性，小于或等于0.6则为阳性。如果母猪感染了PRV，可能会使猪群的母源抗体持续到15～16周龄，甚至部分猪群在16周龄之后还有gE抗体。如果在10～12周龄之间检测到较高的PRV抗体水平，表明猪群在10周龄之前可能就已感染了PRV[6]。

本次检测结果显示，南京市部分猪场的PRV带毒现象依然存在，尤其是经产母猪和商品猪。通过对2个阳性经产母猪场进行调查分析，发现这2个猪场没有实行人工受精，而是采用自然配种，可能是种公猪带毒，导致母猪感染；如果猪场中存在PRV，仔猪断奶后在转群过程中，由于应急反应，可能导致商品猪再次感染PRV，这可能是商品猪发生感染的主要原因；而后备母猪均经过严格挑选和检测，所以在检测中没有发现阳性。

因此，净化猪伪狂犬病需要采取综合防控措施。只有坚持“预防为主，防重于治”的方针，才能做到病毒的清除与净化。具体措施包括：引种检疫；坚持自繁自养、全进全出的饲养模式；免疫接种；检测和淘汰净化群体；加强饲养和生物安全管理，做好猪流、车流、人流和物流的管理[7]。疫苗接种可以阻止猪临床发病，降低强毒排出量，缩短强毒排出时间，进而减少带毒猪；同时加强生物安全管理，免疫前检测gE抗体，评估野毒感染情况；免疫gE自然缺失疫苗后，定期检测野毒感染阳性率，淘汰阳性种猪，最终实现净化的目标。

参考文献：

[1] 姜艳芬，杨增岐，祝卫国，等. 陕西省猪伪狂犬病流行病学调查和WG株的分离鉴定[J]. 西北农林科技大学学报：自然科学版，2006（9）：115-158.

[2] 邹敏，杨旭兵，郑辉，等. 2012—2013年我国部分地区猪伪狂犬病流行病学调查[J]. 中国动物检疫，2015（4）：61-63.

[3] 周斌，苏鑫铭，张素芳，等. PCR快速检测伪狂犬病病毒野毒感染[J]. 中国病毒学，2004（6）：89-92.

[4] 程晶，陈艳红，荫硕焱，等. 2006-2008年我国部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查[J]. 中国动物传染病学报，2009 （1）：169-172.

[5] 杜宗沛，吴植，解慧梅. 2009—2010年江苏中部地区部分种猪场主要疫病流行病学调查[J]. 中国动物检疫，2011（2）：72-75.

[6] 陈平洁，余业东，黄庭汝，等. 广东省猪伪狂犬病流行的危险因素分析[J]. 中国兽医学报，2008（3）：101-104.

[7] 聂奎，李竹青，曾政，等. 川渝部分地区育肥猪伪狂犬病血清流行病学调查及危险性因素[J]. 西南大学学报（自然科学版），2013（9）：134-137.

（责任编辑：朱迪国）

Sero-epidemiological Survey of Swine Pseudorabies in Nanjing City of Jiangsu Province

Li Fengling，Lü Zongde
（Nanjing Animal Disease Prevention & Control Center，Nanjing，Jiangsu 210012）

Abstract：In order to understand the status of wild pseudorabies virus（PRV）infection of pigs， 660 serum samples from 40 pig farms in Nanjing city were investigated for detection and analysis on antibodies against glycoprotein E（gE）of PRV in 2015. The results showed that 31 samples from 7 pig farms were positive for gE antibodies，the farm positive rate was 17.5%，and the antibody positive rate was 4.69%. Furthermore，the farm positive rate and antibody positive rate of multiparous sows were 8.57% and 28.57% respectively. No sample was found in farms of replacement gilts and the gE antibody rate of piglets before weaning was relatively low. The results indicated that there was wild virus infection or maternal antibodies of PRV in sows in Nanjing pig farms.

Key words：pseudorabies virus；gE antibodies；ELISA

中图分类号：S851.3

文献标识码：B

文章编号：1005-944X（2016）05-0012-03

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.05.004