厄洛替尼在大鼠脑脊液和血浆中浓度与其疗效的相关性研究

李晓琴　王秀丽　朱红革　展翼翼　刘春玲

830011 新疆医科大学附属肿瘤医院



厄洛替尼在大鼠脑脊液和血浆中浓度与其疗效的相关性研究

李晓琴王秀丽朱红革展翼翼刘春玲

830011 新疆医科大学附属肿瘤医院

【摘要】目的检测厄洛替尼在大鼠脑脊液和血浆中的浓度，并对其与NSCLC患者疗效间的相关性进行分析。方法随机选取40只健康大鼠，雌雄各半。实验前1日禁食12 h，实验当日分别按照10 mg/kg的剂量注入大鼠尾静脉。另外选取2011年1月至2014年12年收治的110例NSCLC患者作为研究对象，对其临床资料进行回顾性分析。对比大鼠1、4、12、24 h的脑脊液和血浆中厄洛替尼浓度水平，并对两者间相关性进行分析；参照评价标准将110例NSCLC患者分为CR组、PR组、SD组及PD组，对比不同组间的血浆厄洛替尼浓度，并对临床疗效与血浆厄洛替尼浓度的相关性进行分析。结果大鼠1、4、12、24 h脑脊液和血浆中的厄洛替尼浓度水平存在显著性差异，随着时间的推移，其在脑脊液和血浆中的浓度逐渐降低(P<0.05)。不同时刻的大鼠脑脊液与血浆中的厄洛替尼浓度间均呈显著正相关(P<0.05)。不同疗效患者组间血浆中厄洛替尼浓度存在显著性差异(P<0.05)，组间多重比较结果显示不同组间血浆浓度由高至低依次为CR组> PR组> SD组> PD组(P<0.05)。结论厄洛替尼在大鼠脑脊液和血浆中的浓度呈显著正相关，且患者疗效与其血浆中药物浓度具有相关性，血浆浓度越高，疗效越好，故厄洛替尼在治疗非小细胞肺癌脑转移中具有重要的临床意义，可作为放疗等治疗手段的有力补充。

【关键词】厄洛替尼；脑脊液；血浆；疗效；相关性

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:353～355)

肺癌是临床最常见的恶性肿瘤之一，非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)占到80%左右[1]，其中30%的病例会在疾病不同阶段发生脑转移[2]。近年来随着肺部原发病灶治疗手段的日趋完善，脑转移病灶的局控率成为临床研究的热点[3]。患者常出现原发灶稳定或好转，而颅内病灶治疗失败的异质性现象[4]。本研究拟在使用高效液相色谱法测定大鼠体内血浆中与脑脊液中厄洛替尼含量，其数据进行对比，以分析厄洛替尼的疗效、毒性作用及在脑脊液和血浆中浓度的差异，从而解释NSCLC脑转移患者在临床治疗中所出现的异质性现象，为临床用药提供参考依据。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物随机选取40只健康大鼠，雌雄各半。实验前1日禁食12 h，实验当日将厄洛替尼按照10 mg/kg的剂量注入大鼠尾静脉。

1.1.2临床资料选取2011年1月至2014年12年我院收治的110例NSCLC患者作为研究对象，对其临床资料进行回顾性分析。所有患者均经组织病理或细胞学确诊为NSCLC，并经 CT或MRI检查证实存在脑转移。110例患者中男性42例，女性68例；年龄31～75岁，平均年龄(55.45±6.84)岁；其中腺癌97例、大细胞癌13例。所有患者均进行厄洛替尼口服治疗，并在治疗过程中进行厄洛替尼血浆浓度检测。治疗2个月后进行疗效分析，参照RECIST评价标准，将临床疗效分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、病灶稳定(SD)及疾病进展(PD)。

1.2检测方法

选取10只大鼠(5雄5雌)分别于1、4、12、24 h后取静脉血和脑脊液。将标本5 000 r/min 进行离心10 min，提取上清液，于-20 ℃保存。用于高效液相色谱测取厄洛替尼含量。大鼠及NSCLC患者血浆厄洛替尼含量测定：取400 μL血浆置肝素抗凝管中，加100 μL内标溶液，5 mL混合溶液(乙腈一二氯甲烷=1∶4，v/v)，振荡混合10 min，3 000 r/min离心10 min。取上清液于45 ℃氮气吹干，残渣用100 μL流动相复溶，过微孔滤膜(0.45 μm)，取20 μL进HPLC分析。脑脊液不需抗凝剂，其他同上。

1.3研究方法

对比大鼠1、4、12、24 h的脑脊液和血浆中厄洛替尼浓度水平；并对两者间相关性进行分析。回顾性分析110例NSCLC患者的临床资料，参照评价标准将其分为CR组、PR组、SD组及PD组，对比不同组间的血浆厄洛替尼浓度，并对临床疗效与血浆厄洛替尼浓度的相关性进行分析。

1.4统计学分析

2结果

2.1大鼠1、4、12、24 h的脑脊液和血浆中厄洛替尼浓度水平比较及相关性分析

大鼠1、4、12、24 h脑脊液和血浆中的厄洛替尼浓度水平存在显著性差异，随着时间的推移，其在脑脊液和血浆中的浓度逐渐降低(P<0.05)。见表1。不同时刻的大鼠脑脊液与血浆中的厄洛替尼浓度间呈显著正相关(P<0.05)。见表1。

表1　大鼠1、4、12、24 h的脑脊液和血浆中厄洛替尼浓度

2.2不同疗效患者组间血浆中厄洛替尼浓度比较

不同疗效患者组间血浆中厄洛替尼浓度存在统计学差异(P<0.05)，组间多重比较结果显示不同组间血浆浓度由高至低依次为CR组>PR组>SD组>PD组(P<0.05)。见表2。

表2　不同疗效患者组间血浆中厄洛替尼

3讨论

非小细胞肺癌一旦发生脑转移后则中位生存时间较短，预后较差。一般认为，由于血脑屏障的存在，在肺癌脑转移时，绝大部分化疗药物均无法在脑脊液中达到有效的药物浓度，因此对脑转移灶作用有限[5]。随着研究的进展，小分子酪氨酸激酶抑制剂(TKI)逐渐受到人们关注。厄洛替尼是目前临床上治疗表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)敏感突变的非小细胞肺癌的一线用药[6]。作为1种新型小分子EGFR-TKI，能透过血脑屏障，在EGFR过量表达的实体瘤细胞中穿过细胞膜，与ATP竞争性结合EGFR胞内部分，并与脑内EGFR分子的酪氨酸结构域特异性结合，阻断信号传导，进而抑制酪氨酸激酶活性，降低肿瘤细胞黏附能力、促进肿瘤细胞凋亡[7-8]。与吉非替尼相比，厄洛替尼与表皮生长因子受体酪氨酸激酶区ATP结合的亲和力更高、特异性更强[9]。

本研究中，对大鼠1、4、12、24 h的脑脊液和血浆中厄洛替尼浓度水平比较，结果显示大鼠1、4、12、24 h脑脊液和血浆中的厄洛替尼浓度水平存在显著性差异，随着时间的推移，其在脑脊液和血浆中的浓度逐渐降低(P<0.05)，且不同时刻的大鼠脑脊液与血浆中的厄洛替尼浓度间均呈显著正相关(P<0.05)。符合药物的代谢动力学特点。此外对不同疗效患者组间血浆中厄洛替尼浓度进行比较，结果显示组间存在显著性差异(P<0.05)，组间多重比较结果显示不同组间血浆浓度由高至低依次为CR组> PR组> SD组> PD组(P<0.05)。提示患者的治疗疗效与其血浆中的厄洛替尼浓度呈正相关，血浆中浓度越高，疗效越好，进一步印证了厄洛替尼在杀灭肿瘤细胞中的积极作用。而对于厄洛替尼治疗颅内转移失败者，可采用高剂量脉冲式的给药方法，以提高脑脊液浓度，缩小脑部转移病灶[10]。

综上所述，厄洛替尼在大鼠脑脊液和血浆中的浓度呈显著正相关，且患者疗效与其血浆中药物浓度具有相关性，血浆浓度越高，疗效越好，故厄洛替尼在治疗非小细胞肺癌脑转移中具有重要的临床意义，可作为放疗等治疗手段的有力补充。

参考文献

[1]严丽华，吴向坤.化疗间期序贯应用厄洛替尼治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效观察〔J〕.中国实用医药，2015，11(7)：144-145.

[2]张洁霞，蔡迪，李时悦，等.非小细胞肺癌脑转移厄洛替尼和吉非替尼治疗临床比较〔J〕.中华肿瘤防治杂志，2015，8(4)：285-288.

[3]何志惠，洪涛，苏群豪，等.自体DC/CIK联合厄洛替尼维持治疗老年晚期非小细胞肺癌的临床疗效分析〔J〕.肿瘤防治研究，2014，10(6)：645-648.

[4]郝艳坤，杜宇，王涓.厄洛替尼辅助全脑放疗治疗肺癌脑转移疗效分析〔J〕.医学综述，2014，14(6)：2660-2661.

[5]展翼翼，顾国民.厄洛替尼治疗化疗后进展的晚期非小细胞肺癌的临床疗效观察〔J〕.吉林医学，2014，35(26)：5800.

[6]刘姣.厄洛替尼在Lewis肺癌小鼠时辰药代动力学特点及相关代谢酶昼夜节律性的研究〔D〕.青岛大学，2014.

[7]傅小龙，牛飞玉.吉非替尼/厄洛替尼联合同期放疗治疗晚期肺癌〔J〕.循证医学，2013，4(1)：41-42.

[8]占美，刘潇，卢静，等.厄洛替尼治疗老年非小细胞肺癌的系统评价〔J〕.中国循证医学杂志，2013，14(9)：1084-1089.

[9]周迪.厄洛替尼联合全脑放疗治疗非小细胞肺癌脑转移的临床研究〔D〕.吉林大学，2013.

[10]刘璐，王永生，何雅億，等.晚期非小细胞肺癌患者血清细胞因子IL-1β、IL-2R、IL-6及TNF-α水平与厄洛替尼疗效的相关性研究〔J〕.第三军医大学学报，2012，20(9)：2056-2059.

(编辑：甘艳)

Concentration of Erlotinib in Rat Cerebrospinal Fluid and Plasma and its Correlation with Efficacy

LIXiaoqin，WANGXiuli，ZHUHongge，etal.

AffiliatedTumorHospitalofXinjiangMedicalUniversity，Urumqi，830011

【Abstract】ObjectiveTo detect the concentration of Erlotinib in rat cerebrospinal fluid and plasma and its correlation with efficacy.Methods40 healthy rats were selected，half male and half female rats.Before testing，the rats took absolute diet for 12 h.10 mg/kg of Erlotinib were separately injected into the tail vein of rats.The clinical data of 110 NSCLC patients were reviewed.The concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma in 1 h，4 h，12 and 24 h were compared and their correlations were analyzed；according to evaluation criterion，110 NSCLC patients were divided into CR group，PR group，SD group and PD group.The concentration of Erlotinib of the 3 groups were compared.The correlation of clinical effects with the concentration of Erlotinib in plasma was analyzed.ResultsThe concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma in 1 h，4 h，12 h and 24 h were significantly different.As time passed，the concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma was gradually reduced(P<0.05)；at different moments，the concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma had a significant positive correlation (P<0.05)；the concentration levels of Erlotinib in plasma was significantly different(P<0.05)；based on the multiple comparisons，the plasma concentration was arranged from high to low：CR group> PR group > SD group > PD group (P<0.05).ConclusionThe concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma have a significant positive relationship while the clinical efficacy is correlated with the concentration of Erlotinib in plasma.The higher concentration is，the better the clinical efficacy is.Erlotinib has an important clinical significance in the treatment of NSCLC metastasis and can be supplementary to radiation treatment and others.

【Key words】Erlotinib；Cerebrospinal fluid；Plasma；Curative effect；Correlation

(收稿日期2015-05-07修回日期 2015-09-10)

中图分类号：R734.2

文献标识码：A

文章编号：1001-5930(2016)03-0353-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.03.002

通讯作者：刘春玲

基金项目：新疆医科大学创新基金课题(编号：XJC201282)；吴阶平医学基金会临床科研专项资助基金(编号：320.6750.13136)