清胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠并发心脏损伤的保护作用

赵　凯　党　群　李永健　高巧营

(天津市南开医院心血管内科，天津　300100)



清胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠并发心脏损伤的保护作用

赵凯党群李永健高巧营1

(天津市南开医院心血管内科，天津300100)

〔摘要〕目的探讨清胰颗粒对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠心脏损伤的保护作用及其机制。方法将45只Wistar大鼠随机分为假手术组(A组)、SAP组(B组)及清胰颗粒治疗组(C组)，术后12 h测定各组大鼠血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(TN)I、乳酸脱氢酶(LDH)、C-反应蛋白(CRP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、B型脑钠肽(BNP)、基质分解素(ST)-2的水平。结果SAP组大鼠血浆CK-MB、TNI、LDH、CRP、BNP、ST-2水平较假手术组明显升高(P<0.01)，而清胰颗粒治疗组心肌酶、CRP、BNP、ST-2水平虽有不同程度升高，但较SAP组低(P<0.05)；与假手术组相比，SAP组大鼠血浆MDA水平增加，SOD活性显著降低(P<0.01)；而清胰颗粒干预可提高SOD活性，减少MDA的生成。结论清胰颗粒通过抑制炎症反应、抗氧化损伤作用来减轻SAP诱发的心脏损伤。

〔关键词〕清胰颗粒；重症急性胰腺炎；心脏损伤

1天津市中西医结合急腹症研究所

第一作者：赵凯(1980-)，男，副主任医师，硕士，主要从事心血管疾病及相关危险因素诊断与治疗研究。

重症急性胰腺炎(SAP)是约占急性胰腺炎的10%~15%左右。SAP病情危重、发展迅速，常并发呼吸衰竭、心力衰竭、肾衰竭、脓腔内出血等〔1〕。目前在SAP胰外器官损害中，对心脏损伤的研究较少，但SAP时心脏失代偿是导致死亡的严重并发症之一。因此进行SAP心脏损伤早期识别及干预研究对治疗SAP患者有重要意义。本实验拟在建立大鼠SAP模型基础上，来观察清胰颗粒对SAP合并心脏损伤时的保护作用。

1材料与方法

1.1主要试剂与仪器丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒为南京建成生物工程研究所产品，心肌肌钙蛋白(TN)I、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、C反应蛋白(CRP)试剂盒为武汉博士德公司产品。B型钠尿肽(BNP)、基质分解素(ST)-2蛋白浓度的检测采用ELISA法，试剂盒购自MBL公司。牛磺胆酸钠为Sigma 公司产品。

1.2实验动物分组与喂养选取45只雄性Wistar大鼠，体质量(250±50)g，由中国医学科学院实验动物研究所提供，按随机数字表法分为3组：假手术组(A组)，SAP组(B组)，清胰颗粒治疗组(C组)，每组15只。所有大鼠给予生理盐水或清胰颗粒(0.5 g/100 g)灌胃，5 h重复1次，共计3次，A组和B组给予生理盐水，C组给予清胰颗粒。清胰颗粒方剂组成：柴胡、黄芩、枳实、元胡、川楝、大黄、芒硝、甘遂等，中药按传统工艺制备成水煎剂，均含生药1 g/ml，灭菌后置于4℃冰箱备用(天津市中西医结合急腹症研究所药剂室制备)。

1.3动物模型制备及血样采集末次灌胃后6 h，每只大鼠用戊巴比妥腹腔麻醉，俯卧位固定。腹正中切口，打开腹腔后，提起十二指肠，显露肝门部，沿胆总管主干寻找至汇入十二指肠处，于胆管进入十二指肠处，向肝门方向以输液针头穿刺胆管，缓慢推入5%牛磺胆酸钠2 ml/kg。注射成功后可见大鼠胰腺组织出现肿胀，颜色由肉红色转为灰黑色。然后撤除输液针头缝合腹部切口。A组仅开腹后翻动胃十二指肠，不注射药物。以上操作在无菌条件下进行〔2〕。术后12 h 穿刺心脏取血，行CK-MB、TNI、LDH、MDA、SOD、CRP、BNP、ST-2等指标的检测。

1.4统计学方法采用SPSS13.0软件行方差分析。

2结果

2.1心肌酶及炎性指标检测与A组大鼠比较，B组大鼠的TNI、CK-MB、LDH、CRP水平明显升高(P<0.05)，表明胰腺炎发生后心肌发生损伤;而C组大鼠心肌酶学及CRP指标虽有不同程度升高，但较B组低(P<0.05)。见表1。

2.2心功能指标检测与A组大鼠比较，B组大鼠的ST-2、BNP水平明显升高(P<0.05)，表明胰腺炎可诱发心功能不全;而C组大鼠ST-2、BNP水平虽有不同程度升高，但较B组低(P<0.05)。见表2。

2.3氧化应激指标检测与A组大鼠比较，B组大鼠的MDA水平增加，SOD水平显著降低(P<0.05)，表明大鼠存在氧化应激损伤;C组与B组比较，清胰颗粒干预可提高SOD水平、减少MDA的生成(P<0.05)。见表2。

表1　各组大鼠心肌酶及炎性指标的比较±s,n=15)

与A组比较：1)P<0.01；与B组比较：2)P<0.05，下表同

表2　各组大鼠心功能及氧化应激指标的比较±s,n=15)

3讨论

SAP患者病情危重，常并发呼吸衰竭、心功能衰竭、肾衰竭、脓腔内出血等，病死率高。急性胰腺炎时伴发的心脏血管反应被称为胰心综合征，主要包括：心功能改变、心律失常、休克、中毒性心肌炎、心肌梗死等，其中出现心力衰竭和心律失常最为常见〔2〕。因此早期预防和治疗心脏损伤对于改善SAP患者的预后至关重要。

SAP时胰腺局部微血管痉挛，血压下降导致灌注不足，胰腺局部微血管痉挛导致微循环障碍，出现胰腺缺血和再灌注损伤，白细胞过度激活，大量炎症介质被释放入血，形成促炎因子激活的级联反应，进一步加重微循环障碍，加重胰腺损伤，并引发多脏器衰竭〔3〕。祖国医学认为SAP 属“痹心痛”、“结胸”的范畴，SAP 的中医辨证属于郁、结、热、瘀及厥互结，根据“六腑以通为用”的原则，本文选用具有通里攻下、理气开郁、活血化瘀等功用的清胰颗粒作为研究药物，方中大黄入阳明泻热通腑为君，黄芩、柴胡专入少阳疏邪透表匀臣，厚朴、积实行气导滞为佐，另配疏肝理气、行气止痛之品元胡、川楝，诸药合用，和解少阳，内泻热结，使少阳与阳明合病得以双解〔4〕。

本研究结果说明SAP时伴有心肌损伤，出现心肌酶及炎性介质水平增加，其机制可能是：①炎性介质的损伤作用：SAP并发的全身炎症反应综合征时各种急性时相反应蛋白、细胞因子等的交互作用影响心肌的代谢，增加内皮黏附分子的表达，促进单核细胞活化和通过诱导单核细胞合成组织因子的促凝血作用，导致炎症因子增加〔5〕。②微循环障碍：SAP诱发冠状动脉微循环障碍，使冠状动脉过度扩张或痉挛，血流速度降低，心肌缺血缺氧加重，引起心肌损伤标志物升高〔6〕。而清胰颗粒干预能疏通微循环，促进腹腔内肠腔内血管活性及毒性物质的排除，促进炎性渗出物的吸收，使心肌酶及炎性介质水平明显减少，具有减轻心脏损伤的作用〔7〕。

BNP分泌增加是心功能不全时机体的代偿机制之一，可用于心脏损伤和心力衰竭的早期识别。ST-2是白细胞介素-1受体家族的一个成员，它是心室在机械应力作用下分泌的一种蛋白质。最近研究表明严重心衰患者的ST-2水平升高，ST-2已成为心衰患者死亡的独立预测因子〔8〕。本研究结果显示SAP大鼠的BNP、ST-2水平明显升高，这说明SAP时伴有心脏衰竭，其机制可能是：①SAP引起心肌细胞凋亡：SAP早期低血容量、缺氧、疼痛和应激等可使心肌肾上腺素能神经兴奋性增加，SAP大量渗液进入腹腔后，刺激腹腔神经丛反射性引起包括冠状动脉在内的广泛血管痉挛，导致心肌缺血缺氧而出现细胞凋亡〔9〕。②氧化应激作用：SAP时产生大量氧自由基，其细胞毒作用可诱导细胞凋亡〔10〕。本研究中SAP时MDA水平增加，SOD水平下降，体内清除氧自由基能力下降，发生心脏损伤。而清胰颗粒干预能改善腹腔内器官的血液灌注，防止抗氧化损伤，进而改善SAP大鼠的心脏功能。

4参考文献

1Zhang XP,Zhang J,Ma ML,etal.Pathological changes at early stage of multiple organ injury in a rat model of severe acute pancreatitis〔J〕.Hepatobiliary Pancreat Dis Int,2010；9(1):83-7.

2Zhang XP,Feng GH,Zhang J,etal.Protective effects of Salvia miltiorrhizae on the hearts of rats with severe acute pancreatits or obstructive jaundice〔J〕.Zhejiang Uni Sci B,2009；10(3):193-202.

3王林,余亮科,王原.大黄素对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的分子保护机制〔J〕.中国老年学杂志,2012；32(6):2319-20.

4崔乃强,吴咸中.中西医结合治疗胰腺炎临床与基础研究〔M〕.武汉:华中科技大学出版社,2009:120-4.

6Zhang X,Tian H,Wu C,etal.Effect of baicalin on inflammatory mediator levels and microcirculation disturbance in rats with severe acute pancreatitis〔J〕.Pancreas,2009；38(7):732-8.

7杨元生，陈垦，叶昇，等.清胰颗粒干预重症急性胰腺炎后胰腺蛋白组学表达差异性研究〔J〕.中国中西医结合杂志，2013；33(1)：60-4.

8Januzzi JL Jr.ST2 as a cardiovascular risk biomarker:from the bench to the bedside〔J〕.J Cardiovasc Transl Res,2013；6(4):493-500.

9Du X,Cao Y,Xue P,etal.Protective effect of intermedin on myocardial cell in a rat model of severe acute pancreatitis〔J〕.Cell Mol Biol Lett,2011；16(3):462-76.

10Armstrong JA,Cash N,Soares PM,etal.Oxidative stress in acute pancreatitis:lost in translation〔J〕 ? Free Radic Res,2013；47(11):917-33.

〔2014-12-03修回〕

(编辑赵慧玲/曹梦园)

基金项目：天津市卫生局科技基金项目(2010KZ42)

〔中图分类号〕R541

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2016)03-0551-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.03.015