角蛋白17在角化棘皮瘤及皮肤鳞癌中的表达差异研究

李美芳 蒋正强

角蛋白17在角化棘皮瘤及皮肤鳞癌中的表达差异研究

李美芳 蒋正强

角化棘皮瘤（KA）是一种伴有明显角化的上皮良性增生性病变，可自愈。在临床及组织病理学上易与皮肤鳞癌（SCC）相混淆。笔者通过组织病理学检查方法研究角蛋白17（K17）在KA及SCC细胞中的表达情况，探讨两者的异同，以期为临床诊治KA及SCC提供参考，现报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选取本院皮肤科2005年1月至2015年12月经病理学检查确诊为KA或SCC患者共57例。KA患者18例（生长期12例，静止期6例），男10例，女8例，年龄47～89（64.23±5.24）岁；病程1～16（6.62± 7.31）个月；均表现为独立的结节，直径约1～3cm，皮损部位：头面部15例、手背部3例。SCC患者39例，男24例，女15例，年龄46～89（66.18±10.17）岁；病程2～84（19.35±24.68）个月；均为高分化鳞癌，表现为结节、溃疡，直径约2～4.5cm，皮损部位：头面部24例、颈部4例、手背部5例、小腿3例、足部3例；其中角化棘皮瘤样鳞癌（SCC-KA）4例。两组患者性别、年龄比较均无统计学差异（均P＞0.05）。

1.2 实验方法 鼠抗人K17及生物素标记的羊抗鼠二抗均购自美国Santa Cruz公司；DAB试剂盒购于美国赛默飞世尔科技公司。分别取各例患者皮损组织标本石蜡切片（厚4～5μm），常规脱蜡至水，3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，胰酶消化15min修复抗原，10%羊血清室温孵育10min，滴加稀释的一抗（1∶100）4℃过夜，PBS冲冼后滴加稀释的生物素标记二抗（1∶200，1%BSA-PBS稀释），室温孵育30min，PBS冲洗后滴加适当比例（1∶100）稀释的ABC kit（Vector）孵育30min，抗辣根过氧化物酶标记的DAB显色。苏木素复染、封片后显微镜下观察并扫描，图像分析、拍照。同时取10例外伤手术患者的正常皮肤作为阴性对照，取10例寻常型银屑病皮损作为阳性对照。

1.3 结果判定 参照许良中等[1]方法，综合考虑切片中肿瘤组织阳性细胞着色（细胞质内染色）强度和阳性细胞占所观察同类细胞的百分比这两项标准，半定量判定结果。（1）根据细胞着色程度判定阳性强度，分为4级：无着色为阴性，计0分；淡黄色为弱阳性，计1分；棕黄色为中度阳性，计2分；棕褐色为强阳性，计3分。（2）根据阳性细胞占所观察的同类细胞的百分比，分为4级：阳性细胞≤2%为个别，计0分；阳性细胞3%～20%为少量，计1分；阳性细胞21%～60%为中量，计2分；阳性细胞＞60%为大量，计3分。综合评价值以两类计分分值的乘积表示，0～3分为阴性，4分为弱阳性，6分为阳性，9分为强阳性。

2 结果

12例生长期KA患者K17呈阳性表达2例（16.67%），呈强阳性表达10例（83.33%）；6例静止期KA患者K17呈阴性表达4例（66.67%），呈弱阳性表达2例（33.33%）。4例SCC-KA患者K17均呈强阳性表达；其余35例SCC患者K17呈阳性表达26例（74.29%），呈强阳性表达9例（25.71%）。

3 讨论

角蛋白是构成细胞骨架的中间丝家族成员之一，是表皮及毛发角质形成细胞的主要结构蛋白，也是角质形成细胞和其他上皮细胞的标志性成份。K17属于I型角蛋白，主要分布在汗腺的基底细胞和深部外毛根鞘等处，在正常表皮无表达，在表皮角质形成细胞出现异常增殖、分化时可出现异常表达[2]。

KA一般被认为起源于毛囊，可能是毛囊角化上皮呈假上皮肿瘤样增生的表现，发展分三个阶段∶生长期、静止期、自然消退期[3]。其开始表现为红色丘疹或半球形结节状皮疹,生长期及静止期可呈火山口样溃疡，生长期增长迅速，经46周左右逐渐消退，皮损表现为动态变化的过程。SCC系起源于表皮或附属器角质形成细胞的一种恶性肿瘤，生长相对较慢，不会消退，可发生破坏和转移；SCC-KA是属于高分化SCC的一种特殊亚型，组织病理类似于KA，但具有浸润侵袭性，可发生转移。KA与高分化SCC尤其是SCC-KA在临床上极为相似，有时甚至通过组织病理也很难鉴别。本研究发现，K17在生长期KA及高分化SCC患者中全部呈阳性表达，这可能说明K17是角质形成细胞增殖分化的标志性分子，与皮肤过度增生有关。在生长期KA及SCC-KA患者中K17以强阳性表达为主，而其他高分化SCC患者中K17以阳性表达为主，这可能与生长期KA及SCC-KA的肿瘤细胞增长速度较快有关。

Misago等[4]发现，K17在生长期KA细胞中呈阳性表达，但在自然消退期或退行性皮损中不表达。笔者观察发现，KA患者静止期K17表达明显减弱，大部分患者呈阴性表达，小部分呈弱阳性表达，这说明KA在静止期细胞增殖停止，这一表达特点与高分化SCC包括SCC-KA持续表达不同。因此临床对KA与SCC鉴别困难时，可持续监测K17的表达，如K17表达强度减弱或不表达，可能更支持KA的诊断。

[1] 许良中,杨文涛.免疫组织化学反应结果的判断标准[J].中国癌症杂志, 1996,6(4):229-231.

[2] Marble D J,Gordon K B,Nickoloff B J.Targeting TNFalpha rapidly reduces density of dendritic cells and macrophages in psofiatic plaques with restoration of epidermal keratinocyte differentiation [J].J DermatolSci,2007,48(2):87-101.

[3] 赵辨.中国临床皮肤病学[M].江苏:科学技术出版社,2010:1526-1527.

[4] Misago N,Takai T,Toda S J,et al.The changes in the expression levels of follicular markers in keratoacanthoma depend on the stage:keratoacanthoma is a follicular neoplasm exhibiting infundibular/isthmic differentiation without expression of CK15[J]. JournalofCutaneous Pathology,2014,41(5):437-446.

2016-01-12）

（本文编辑：李媚）

317016 临海市第二人民医院皮肤科

蒋正强，E-mail：lryjzq@163.com