麦冬多糖对亚急性衰老小鼠皮肤组织衰老程度的影响

麦冬多糖对亚急性衰老小鼠皮肤组织衰老程度的影响

陆洪军宋丽娜付天佐李晓涛宋琳琳1

(佳木斯大学第一附属医院， 黑龙江佳木斯154002)

摘要〔〕目的观察麦冬多糖对衰老小鼠皮肤组织衰老程度的影响。方法选用昆明种小鼠40只，雌雄各半，随机分为正常对照组、模型组、高、低剂量(分别为10、5 g/kg)给药组，每组10只。除正常对照组注射等量生理盐水外，其他组均采用颈背部皮下注射 D-半乳糖(剂量为5 g/kg) 建立衰老模型，连续40 d。造模的同时皮肤给药，40 d后取各组小鼠背部皮肤检测羟脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量。结果麦冬多糖可明显提高亚急性衰老小鼠皮肤中超氧化物歧化酶活力及羟脯氨酸含量，并使丙二醛含量降低。结论麦冬多糖具有抗皮肤衰老的作用。

关键词〔〕麦冬多糖；皮肤衰老；D-半乳糖

中图分类号〔〕R285.5〔文献标识码〕A〔

基金项目：黑龙江省卫生厅科研课题(No.2013255)；黑龙江省自然科学

通讯作者：宋琳琳(1982-)，女，讲师，硕士，主要从事天然药物开发研究。

1佳木斯大学药学院

第一作者：陆洪军(1970-)，男，硕士，副主任医师，主要从事临床医学研究。

麦冬为百合科植物沿阶草的块根，味微苦，寒，入肺、胃、心经〔1〕。对于麦冬多糖化学成分的研究，一般主要集中在抗炎、抗氧化以及免疫活性上。本研究探讨麦冬多糖对亚急性衰老小鼠皮肤衰老程度的影响。

1材料与方法

1.1试剂与仪器麦冬药材购自佳木斯金天药店，经佳木斯大学药学院鉴定；95%乙醇(天津市北方天医化学试剂厂)；D-半乳糖(上海恒信化学试剂有限公司生产)；羟脯氨酸、丙二醛、超氧化物歧化酶测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。KQ-520 DE医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；SHZ-Ⅲ循环水真空泵(郑州长城科教仪器有限公司)；756MC紫外可见光分光光度计(上海第三分析仪器厂)；TJ82-3型电动离心沉淀机(辽阳制药机械厂)；FSH-2组织匀浆机(江苏省金坛市恒丰仪器厂)。

1.2麦冬多糖的提取将麦冬药材在60℃烘箱中干燥24 h，粉碎后过30目筛密封保存待用。称取经预处理的麦冬粉末50 g，对料液比、提取温度和提取时间进行单因素提取试验，优选出麦冬多糖提取的最佳提取工艺为提取温度25℃，超声波提取两次，每次20 min，第一次按1∶20的比例加水1 000 ml，第二次按1∶15的比例加水750 ml，合并滤液，旋转蒸发仪减压浓缩至200 ml，加入95%的乙醇沉淀12 h，减压浓缩至200 ml，浓缩液制得麦冬粗多糖86.38 g。

1.3动物与造模取小鼠40只(佳木斯大学动物实验中心提供)，随机分成4组，每组10只，雌雄各半，分别为空白对照组，模型组，麦冬多糖高剂量和低剂量组。颈背部皮下注射5%D-半乳糖(5 g·kg-1·d-1)制造亚急性衰老模型，空白对照组颈背部皮下注射生理盐水，连续40 d。

1.4给药方法①空白对照组皮下注射生理盐水5 g/kg，再灌胃蒸馏水5 g·kg-1·d-1；②模型组皮下注射D-半乳糖溶液5 g/kg，灌胃蒸馏水5 g·kg-1·d-1；③麦冬多糖高、低剂量组皮下注射5%D-半乳糖5 g·kg-1·d-1，再分别灌胃麦冬多糖10、5 g·kg-1·d-1，连续40 d。

1.5皮肤匀浆制备及检测指标末次给药后将小鼠处死并将其背部脱毛，取10% 的皮肤组织100 mg，离心取上清液后备用。然后将上清液稀释至1%，测定超氧化物歧化酶活性(SOD)(黄嘌呤氧化酶法)、丙二醛(MDA)含量(硫代巴比妥酸比色法)；再将上清液稀释至2%测定羟脯氨酸(HYP)含量(氯胺酮法)，均按试剂盒说明书方法测定。

1.6统计学方法应用t检验。

2结果

与模型组相比，高、低剂量组皮肤组织SOD、HYP水平显著升高、MDA含量显著降低(P<0.05)。与空白对照组相比，模型组SOD、MDA、HYP含量均差异明显(P<0.05)，见表1。

表1　各组皮肤SOD活力、MDA含量、

与模型组比较：1)P<0.05，2)P<0.01；与空白对照组比较：3)P<0.05

3讨论

衰老的机制主要包括线粒体衰老学说、氧自由学说、端粒酶学说、遗传学说等。研究表明当皮肤出现皱纹、弹性下降等方面的表现与胶原蛋白的含量下降有关，因此，胶原蛋白含量的变化可以提示皮肤老化的程度〔2，3〕。而HYP是胶原蛋白中的一种重要氨基酸，因此测定皮肤中HYP含量变化可作为判定皮肤衰老程度的一个指标〔4〕。本文结果提示，麦冬多糖能显著增加衰老小鼠皮肤组织SOD活力和降低MDA含量，表明它具有延缓皮肤衰老的作用，同理，皮肤组织中HYP含量升高也具有类似的抗衰老作用。

4参考文献

1林晓,徐德生,冯怡,等.麦冬多糖的单糖组成研究〔J〕.中草药,2005;36(10):1488.

2吴景东,李德新.绞股蓝延缓大鼠皮肤衰老作用的实验研究〔J〕.中医药学刊,2006；24(7):1226-7.

3张如意,王蓉,叶翠飞,等.乌胶囊对老年大鼠皮肤弹性及抗氧化能力的影响〔J〕.中国老年学杂志,2007；27(10):1964-6.

4王红丽,吴铁,吴志华,等.丹参酮和维生素E抗皮肤衰老作用的比较研究〔J〕.中国老年学杂志,2003;23(12):861-2.

〔2013-12-07修回〕

(编辑苑云杰)