炮制时间对黄精多糖含量的影响

周小慧

（江苏省中医院药剂科，南京210000）

炮制时间对黄精多糖含量的影响

周小慧

（江苏省中医院药剂科，南京210000）

黄精来源于百合科黄精属polygonatum m ill黄精［1］p.sibircum Red、滇黄精P.jingianum coll.et hemsl、多花黄精pcyrtonerna hua的干燥根茎，黄精属药用植物资源丰富，我国分布多达30余种。黄精为常用中药，始载于《名医别录》：“味甘，平，无毒。主补中益气，除风湿，安五脏。久服轻身延年不饥”。现代研究亦发现具有降低血脂、血糖以及延长动物寿命等作用［2］。黄精历代生制兼用，但传统认为生用“刺人咽喉”，故多炮制后使用。通过炮制以达到减毒增效的作用。本文从黄精炮制历史沿革以及对不同产地不同炮制时间对黄精含水量、外观色泽、麻舌感（刺人咽喉）、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、多糖含量等指标的测定，阐明黄精炮制机理，确定最佳蒸制工艺，进一步研究其药效物质基础提供参考依据。

黄精；蒸制工艺；多糖

黄精为临床常用补益药，其性味甘平，有补气养阴、健脾润肺及益肾等功效，主治肺燥干咳、体虚乏力、心悸气短、久病津亏口干、糖尿病、高血压等症。传统认为黄精生品能够刺激咽喉，临床多用炮制品。现代黄精的炮制方法主要用蒸法，本文通过对不同产地、不同炮制时间对黄精含水量、外观色泽、麻舌感（刺人咽喉）、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、多糖含量等指标的测定，阐明黄精炮制机理，确定最佳炮制工艺，为进一步研究其药效物质基础提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料原料：黄精（产地，批号：嵩山，2012-03-21；老山，2012-03-21；茅山，2012-04-05；浙江，2012-04-08）经常州市中医院药剂科鉴定为百合科黄精［3］。

实验仪器：LDZX-40BI型立式自动电热压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂），微型植物试样粉碎机（河北省黄骅市新兴电器厂），DHG-9146A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司），732紫外可见分光光度计（上海分析仪器厂），METLERAE240电子分析天平（瑞士）。

葡萄糖对照品（批号：111124，天津市科密欧化学试剂开发中心），蒸馏水（实验室自制）、乙醇（南京化学试剂厂，95%）、无水乙醇（国药集团化学试剂有限公司）、丙酮（南京化学试剂厂）、蒽酮（上海化学试剂有限公司）、浓硫酸（上海化学试剂有限公司），试剂均为分析纯［4］。

1.2 研究方法

1.2.1 不同产地黄精鲜品理化指标的研究

1.2.1.1 不同产地黄精鲜品含水量测定［5］取不同产地鲜品2～5 g平铺于干燥至恒重的扁形称瓶中，厚度不超过5mm疏松供试品不超过10 mm，精密称定，打开瓶盖在100～105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移至干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量，再在上述温度干燥1小时，冷却，称量，至连续2次称量的差异不超过5 mg为止。根据减失的重量，计算供试品的含水量（%）。

表1 不同产地黄精鲜品的含水量（n=3）

由表1结果可知，不同产地黄精鲜品其含水量略有差异，其中产自浙江天目山的含水量最大。

1.2.1.2 不同产地黄精鲜品外观色泽和麻舌感（刺人咽喉）采用目视法和口尝记录炮制过程中样品的外观颜色变化和麻舌感的变化［6］。

表2 不同产地不同炮制黄精的外观色泽和麻舌感［7］

由表2知，不同产地黄精鲜品的外观色泽与口感有所差异。

1.2.1.3 不同产地黄精醇溶性浸出物［8］取不同产地黄精干燥品约2～4 g，精密称定，置100～250 m l的锥形瓶中，精密加入稀乙醇50～100m l塞紧，称定重量，静置1 h，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 h，放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密量取滤液25 ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，移至干燥器中，冷却0.5 h，迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算不同产地黄精样品中醇溶性浸出物的含量（%）。结果见表3。

表3 不同产地黄精鲜品醇溶性浸出物含量（n=1）

由表3可知，不同产地的黄精醇溶性浸出物含量各有差异，其中老山的浸出物含量最高［9］。

1.2.1.4 不同产地黄精鲜品多糖含量测定1）对照品溶液的制备：取105℃烘干至恒重的葡萄糖对照品约100 mg，精密称定，置100m l容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀即得。2）蒽酮-硫酸试液的配制：称取0.33 g蒽酮，加100 mL硫酸，置于棕色瓶中，混合摇匀置于冰箱中（现配现用）。3）样品溶液的制备：分别称取低温干燥（60℃）的不同产地黄精5 g，每次加50m l蒸馏水煮沸提取，共3次，合并提取液，浓缩至约20 ml，加4倍量无水乙醇沉淀，离心（3000 rpm10 min），沉淀用乙醇洗2次，转移沉淀并定容于50 m l容量瓶中，取0.5m l稀释至100 ml，得样品溶液。4）最大波长的选择：分别取对照品和样品溶液各1 m l于具塞试管中，置冷水浴中，迅速加入新配制的0.2%蒽酮-硫酸溶液4.0 m l，摇匀，沸水浴10 min，取出，迅速冷却至室温，另取1m l蒸馏水同法操作做参比，采用TU-1800紫外分光光度计，在波长400～800 nm扫描，标准品和样品均在620 nm处有最大吸收。5）线性关系考察：精密吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0m l贮备液，分别置10 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得系列对照品溶液。分别精密吸取1.0 m l系列对照品溶液置10 ml具塞试管中，加入0.2%蒽酮-硫酸试剂4.0 ml，摇匀后迅速浸入冰水浴中冷却，各管加毕后，一起浸入沸水浴中，管口加塞，待水浴重新沸腾后反应10min，取出试管浸入冰水中冷却，室温放置10 min，按分光光度法，在620 nm处测定吸光度，以含量C（μg/m l）对应吸光度A回归，其回归方程为A=6.4709C+ 0.0427，r2=0.999。6）精密度试验：取样品溶液（河南嵩山）1 ml于具塞试管中，一式6份，按1.2.1.4的（4）项下方法操作，在620 nm处测定吸收度，计算，得嵩山产黄精中多糖平均含量为11.38%RSD=0.6%。7）回收率试验：分别取对照品溶取0.1，0.2，0.4 m l，各加入样品溶液（河南嵩山产）0.2，0.3，0.5 m l，每个浓度平行做3份，按1.2.1.4的（4）项下方法操作，在620 nm处测定吸收度，计算，得低、中、高浓度（5.62，9.46，17.14μg·ml-1）平均回收率分别为98.6%（RSD=1.1%）、101.0%（RSD=0.7%）、100.4%（RSD= 1.0%）。8）样品的测定：分别取样品溶液（不同产地）各1 ml，每个样品3份，在620 nm处测定吸收度，计算。结果见表4。

表4 样品含量测定（n=3）

1.2.2 蒸制时间对不同产地黄精理化指标影响［10］

1.2.2.1 蒸制时间对不同产地黄精外观色泽和麻舌感的影响（刺人咽喉）采用目视法和口尝记录炮制过程中样品的外观颜色变化和麻舌感的变化。结果见表5。

表5 不同产地不同炮制黄精的外观色泽和麻舌感

由5表知，不同产地黄精鲜品的外观色泽与口感有所差异，随着蒸制时间的变化，颜色略有变深，口感变甜，原先的刺咽喉感有所减轻。

1.2.2.2 蒸制时间对不同产地黄精醇溶性浸出物的影响［11］按“1.2.1.3”法测定不同蒸制时间下黄精醇溶性浸出物含量，蒸制后的黄精在干燥后再实验。

表6 不同蒸制时间对黄精醇溶性浸出物含量的影响（n=1）

续表6不同蒸制时间对黄精醇溶性浸出物含量的影响（n=1）

图1 不同蒸制时间对黄精醇溶性浸出物含量的影响（n=3）

1.2.2.3 蒸制时间对黄精多糖含量的影响［12］参照“1.2.1.4”项下建立的黄精多糖含量测定方法，测定不同蒸制时间对黄精多糖含量的影响，结果如表7。

表7 蒸制时间对黄精多糖含量的影响（n=3）

续表7蒸制时间对黄精多糖含量的影响（n=3）

图2 不同产地不同炮制时间黄精多糖含量的测定（n=3）

3 讨论

多糖作为黄精中主要活性成分之一，有必要对其含量进行研究。用沸水提取黄精多糖，然后用硫酸蒽酮比色法测定其含量，方法简便可行，结果准确，精密度好。不足之处是硫酸蒽酮比色法仅能测定多糖的总含量，不能对多糖各组分构成情况进行具体分析，进一步研究需借助HPLC分析来完成。

蒸制黄精样品，从多糖含量测定结果可以看出，随着蒸制时间的延长，多糖含量有增加趋势，实验结果表明黄精中多糖含量与蒸制时间成正比。黄精的炮制破坏了其黏液质，从而可以解释炮制后的黄精刺激咽喉感有所减轻的原因。

近年来虽对黄精进行了大量研究［13］，制定了一些客观性指标，然而根据有效成分以及刺激性成分，采用科学内涵和质量控制指标尚有待进一步发现和制定。对黄精炮制增效减毒的机制仍然有待于进一步研究。

［1］曹明菊，郑晓燕，陈丽华.黄精多糖的研究进展［J］.中国食品添加剂，2008，（4）:52-55.

［2］车勇，王宪冉，夏作理.黄精的现代研究进展［J］.社区医学杂志，2004，2（6）: 34-35.

［3］高红莉.泰山黄精多糖的超声提取及含量测定［J］.泰山医学院学报，2006，27（2）：657-658.

［4］韩学俭.黄精采集加工技术［J］.四川农业科技，2004（2）:26.

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［13］甄汉深.黄精炮制历史沿革的研究［J］.中成药，1989，11（7）:19-20.

Effect o f Processing Tim e on the Conten t o f Po lysaccharide o f Polygonatum

ZHOU Xiaohui
（Department of Pharmacy，Jiangsu ProvincialHospital of TraditionalChineseMedicine，Nanjing210000，China）

Polygenetic mill，P.sibircum Red，P.jingianum coll.et hemsl and Polygenetic pcyrtonerna hua dry root are all from Liliaceous Polygenetic.There are asmany as 30 kinds of Polygenetic resources of medicinal plants distributing in our country.Polygonatum is a commonly traditional Chinesemedicine，only contained in the MingyiBielu:"sweet，flat，non-toxic，benefit，it could not only get rid of rheumatism butalso comfort five organs".Polygonatum can be used both in row and steaming，but the traditional view thought the raw was"prickly throat"，so of ten steamed them before use.Attached by concocting can achieve synergy effect.This article summarized Polygenetic fabricated history and the differenthabitats of different processing time on the precisemoisture content，appearance and color，test（stinging throat），water-soluble extract，alcohol-soluble extract，polysaccharide contentand other indicators of the determination，to clarify processingmechanism and determine the optimal steaming process，and further studywould provide referencematerialbase for efficacy.

Polygonatum；steaming technology；polysaccharide

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.11.075

1672-2779（2015）-11-0147-04

：张文娟本文校对：陈丽

2015-04-29）