顶空进样毛细管气相色谱法测定盐酸普拉克索中的残留溶剂

曹 玉

南京市食品药品监督检验院，南京210038

顶空进样毛细管气相色谱法测定盐酸普拉克索中的残留溶剂

曹 玉

南京市食品药品监督检验院，南京210038

目的建立盐酸普拉克索中残留溶剂的测定方法。方法盐酸普拉克索中甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇和四氢呋喃的残留量采用顶空进样毛细管气相色谱法，DB-624毛细管柱，FID检测器，柱温采用程序升温。结果各有机溶剂均能得到有效分离，甲醇的浓度在59.87～374.20 μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9991），平均回收率为97.40％，RSD为1.26％；乙醇的浓度在100.60～628.75 μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9991），平均回收率为96.79％，RSD为1.58％；丙酮的浓度在100.22～626.38 μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9992），平均回收率为96.55％，RSD为1.80％；异丙醇的浓度在99.78～623.65 μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9992），平均回收率为96.43％，RSD为1.55％；四氢呋喃的浓度在14.98～93.63 μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9995），平均回收率为96.97％，RSD为2.22％。结论本方法可以准确测定盐酸普拉克索中的残留溶剂，可用于盐酸普拉克索原料药中有机溶剂的检测。

顶空进样毛细管气相色谱法；盐酸普拉克索；残留溶剂

盐酸普拉克索为非麦角类多巴胺受体激动剂，能够有效地激动多巴胺D2亚群受体，并对D3受体有高度亲和力，临床用于帕金森病的治疗，是目前帕金森病的一线治疗药物［1-5］。该药口服吸收迅速完全，用药后1～3 h达到最大血药浓度，其生物利用度＞90％，半衰期为8～12 h［6］。原研发厂家为德国勃林格殷格翰公司，本品为口服缓释片剂，1次/d，用于治疗帕金森病［7］。为了有效控制盐酸普拉克索的质量和保证用药安全，本文参考《中国药典》二部2010版［8］有关规定，建立了顶空气相色谱法［9－20］测定盐酸普拉克索中残留溶剂的方法，并进行了方法学验证，结果表明，该方法简单、准确、可靠，可用于实际产品的质量控制。

1 仪器与试剂

Agilent 6890气相色谱仪、DANNI Hss8650顶空自动进样装置、安捷伦色谱工作站；赛多利斯BP211D电子分析天平。四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮均为色谱纯。盐酸普拉克索原料样品由南京长澳医药科技有限公司提供。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

DB-624毛细管柱（30 m×0.32 mm×1.8 mm），程序升温：柱温40℃（维持7 min），以20℃/min升至220℃（维持5 min）。进样口温度200℃，检测器温度250℃，氢火焰离子化检测器，载气为高纯氮气。顶空瓶平衡温度为75℃，平衡时间为30 min。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品储备液的制备精密称取四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮各适量，置同一量瓶中，加水制成每毫升中含四氢呋喃7.2 mg、甲醇30 mg、乙醇50 mg、异丙醇50 mg、丙酮50 mg的溶液，摇匀，即得。

2.2.2 对照品溶液的制备精密量取对照品储备液1.0 ml置100 ml量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.3供试品溶液的制备取供试品1.0 g，精密称定，置10 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3溶剂定位及系统适用性试验

取四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮各50 μl，分别加水5 ml稀释后，作为定位溶液；再取四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮各50 μl于同一量瓶中，加水5 ml稀释后，作为混合溶液，精密量取上述溶液及溶剂分别顶空进样，记录色谱图。各溶剂的保留时间、分离度和理论板数见表1。相邻溶剂色谱峰的分离度均符合规定，理论板数较好（图1）。

表1 系统适用性试验结果表

图1 盐酸普拉克索系统适用性试验GC色谱图1.甲醇；2.乙醇；3.丙酮；4.异丙醇；5.四氢呋喃

2.4 线性关系考察

精密量取对照储备液5.0 ml置50 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为标准曲线母液，分别精密量取标准曲线母液0.2、0.5、0.8、1.0、1.2 ml置10 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。照上述色谱条件顶空进样。以各成分的浓度为横座标，峰面积为纵座标进行线性回归，结果见表2。

表2 5种残留溶剂线性关系及相关系数

2.5 精密度试验

取标准曲线中间的浓度的溶液1.0 μl，照上述色谱条件，重复进样5次，四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮峰面积的RSD值分别为1.0％、1.9％、1.7％、1.0％、1.4％，均＜2.0％，进样精密度符合要求。

2.6 检出限和定量限

取对照溶液用水稀释成一系列低浓度的溶液，照上述色谱条件顶空进样，测得各溶剂的检出限（S/N≥3）。再取各溶剂适用，精密称定，用水稀释成一系列低浓度的溶液，照上述色谱条件顶空进样，测得各溶剂的定量限（S/N≥10）（表3）。

表3 检出限结果（GC）

2.7 回收率试验

取盐酸普拉克索（批号：131101）约0.5 g共9份，分别置顶空瓶中，分别精密加入对照品储备液经稀释20倍后溶液的0.8、1.0、1.2 ml，加水5 ml溶解，混匀，作为供试品溶液，按测定法项下的方法进行测定，甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇和四氢呋喃的平均回收率（n=9）分别为97.40％、96.79％、96.55％、96.97％、93.3％，RSD分别为1.26％、1.58％、1.80％、1.55％、2.22％（表4～表8）。

2.8 样品有机溶剂残留的测定

按照残留溶剂测定法（《中国药典》二部2010版附录ⅧP第三法）进样，记录色谱图。6批样品及对照品有机溶剂残留结果3批样品检出异丙醇为0.04％、0.05％和0.05％，其余均未检出。

表4 残留溶剂甲醇测定回收率试验结果

表5 残留溶剂乙醇测定回收率试验结果

表6 残留溶剂丙酮测定回收率试验结果

表7 残留溶剂异丙醇测定回收率试验结果

表8 残留溶剂四氢呋喃测定回收率试验结果

3 讨论

3.1 顶空温度和平衡时间的选择

对顶空温度70、75、80℃进行比较，经实验发现当顶空温度为80℃平衡时，峰面积更大；精密度试验表明精密度良好，故选择了80℃作为平衡温度。平衡时间选用了30 min与45 min进行比较，经试验发现两者无明显差别，表明30 min已经达到了气液平衡，故选择平衡时间为30 min。

3.2 色谱柱的选择

选择DB-624（30 m×0.32 mm×1.8 μm）和DB-624（30 m×0.25 mm×1.4 μm）色谱柱进行试验，结果使用DB-624（30 m×0.32 mm×1.8 μm）检测时，各溶剂之间分离度均＞2.0。最终选择DB-624（30 m×0.32 mm× 1.8 μm）。

综上所述，本文所用方法的分离度、精密度和准确度均达到相关规定，5种溶剂的检测下限均远远小于人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）规定的用量限制，因此，本实验建立的方法可以用来控制盐酸普拉克索中有机溶剂的残留量。

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Determination the residual solvent in pramipexole dihydrochloride by using headspace sampling capillary gas chromatography

CAO Yu
Nanjing Municipal Food and Drug Supervision and Inspection Institute，Nanjing 210038，China

Objective To establish determination method of residual solvent in pramipexole dihydrochloride.Methods Residual amount of methanol，ethanol，acetone，isopropyl alcohol and tetrahydrofuran in pramipexole dihydrochloride was used headspace sampling capillary gas chromatography，DB-624 capillary column，FID detector and temperature programme was used for column temperature.Results The organic solvent can be effectively separated.The linear relationship was well when concentration of methanol in 59.87-374.20 μg/ml scope（r=0.9991）.Average recovery rate was 97.40％，RSD was 1.26％.The linear relationship was well when concentration of ethanol in 100.60-628.75 μg/ml scope（r=0.9991）.Average recovery rate was 96.79％，RSD was 1.58％.The linear relationship was well when concentration of acetone in 100.60-628.75 μg/ml scope（r=0.9992）.Average recovery rate was 96.55％，RSD was 1.80％.The linear relationship was well when concentration of isopropyl alcohol in 99.78-623.65 μg/ml scope（r=0.9992）.Average recovery rate was 96.43％，RSD was 1.55％.The linear relationship was well when concentration of tetrahydrofuran in 14.98-93.63 μg/ml scope（r=0.9995）.Average recovery rate was 96.97％，RSD was 2.22％.Conclusion This method can accurately determine residual solvent in hydrochloric acid pramipexole，and can be used for analysis of organic solvent determination of raw material medicine in hydrochloric acid pramipexole.

Headspace sampling capillary gas chromatography；Pramipexole dihydrochloride；Residual solvent

R914.1

A

1674-4721（2015）12（b）-0007-04

2015-07-16 本文编辑：许俊琴）