原子吸收分光光度法测定多烯磷脂酰胆碱中砷盐含量

丘文嘉，张玉英

(广东省广州市药品检验所，广东 广州 510160)

磷脂酰胆碱(PC)是生命的基础物质，多烯磷脂酰胆碱可作为药物制剂的辅料，又能治疗肝炎、脂肪肝、高血压等疾病，广泛应用于生物医药行业。我国生产的多烯磷脂酰胆碱注射剂的原料长期依赖进口，除企业标准外，目前暂无相应的国家标准检验方法。砷作为一种有毒元素[1]，在药品、食品、化妆品标准中均有限量规定。由于多烯磷脂酰胆碱在生产工艺中可能引入砷盐[2]，笔者参考2010年版《中国药典(二部)》附录中的砷盐检查法，对该品种的企业标准进行复核，发现相关方法干扰性强[3－7]，不适用于本品的砷盐测定，故创新性地增加了原子吸收分光光度法进行试验[8]，旨在为该品种国家标准的制订和完善提供依据，现报道如下。

1 仪器与试药

Thermo－3500型原子吸收分光光度计(热电公司);WHG－102A2型流动注射氢化物发生器(北京瀚时制作所);砷空心阴极灯(北京曙光明电子光源仪器有限公司);电子天平(梅特勒公司)。As国家标准溶液(1 000 μg/mL，国家钢铁材料测试中心钢铁研究总院，GSBG62028－90，批号为13070982);样品3批(某公司委托检验样品，批号分别为2120001，2120002，2120003);水为去离子水，其余试剂均为分析纯。16%碘化钾(KI)－10%抗坏血酸溶液(称取碘化钾16 g，抗坏血酸10 g，溶于100 mL水)，1%硼氢化钠－0.3%氢氧化钠溶液(将1 g氢氧化钠用0.3%氢氧化钠溶液溶解，混匀即得)，临用前配制。

2 方法与结果

2.1 仪器最佳工作条件

载气:氩气;载气压力:0.25 MPa;载气流速:200 mL/min;测量时间:20 s;加热电压:140 V;载液:1%盐酸溶液。在此条件下，原子分光光度吸收图谱见图1。

图1 原子分光光度吸收图谱

2.2 溶液制备

对照品溶液:精密量取砷单元素标准溶液(As 1 000 μg/mL)1 mL，置100 mL容量瓶中，加1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取1 mL，置100 mL容量瓶中，加1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得砷标准贮备液(100 ng/mL)。精密量取砷标准贮备液 0，1.0，2.0，5.0，7.0，10.0 mL，分别置 50 mL 容量瓶中，加入16%KI－10%抗坏血酸溶液5 mL，用1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度(标准曲线溶液质量浓度为 0，2.0，4.0，10.0，14.0，20.0 ng/mL)，摇匀，放置 2 h，测定。供试品溶液:取本品约 0.5 g，精密称定，置100 mL碘瓶中，加硝酸10 mL、硫酸2 mL，静置过夜;加入2～3粒碎磁片(已经硝酸浸泡并清洗干净)，于瓶口加小漏斗，置电炉上加热至出现黑色时，滴加高氯酸至溶液变清(约加6～8 mL)，放冷至室温;用1 mol/L盐酸溶液转移至25 mL容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，加16%KI－10%抗坏血酸溶液2.0 mL，用1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，混匀，放置2 h，测定。同法制备空白溶液，进样测定。

2.3 方法学考察

线性关系考察:以1%硼氢化钠－0.3%氢氧化钠为还原剂，1%盐酸溶液为载液，吸取对照品溶液进入氢化物发生器，在193.7 nm波长处进样测定，记录吸光度值。以峰高(Y)为纵坐标、质量浓度(X)为横坐标进行线性回归，得回归方程 Y=0.031 67 X+0.038 0，r=0.999 4。结果表明，As的质量浓度在2.0～20.0 ng/mL范围内与吸光度线性关系良好。

检出限测定:按2.2项下方法，取标准空白溶液重复进样11次，测定，由公式 DL=3 Sb/K计算检出限，其中 K为标准曲线斜率，Sb为11次空白标准溶液测定偏差。该方法的检出限为0.226 ng/mL。

精密度试验:取标准曲线范围内的砷(20 ng/mL)对照品溶液，重复进样7次，测定吸光度。结果平均吸光度值为0.641 2，RSD为0.56%(n=7)，表明仪器精密度良好。

重复性试验:取同一批样品(批号为2120001)，按2.2项下方法制备供试品溶液，依法重复进样6次。结果As平均含量为0.12 mg/kg，RSD 为 1.54%(n=6)，表明方法重复性良好。

稳定性试验:取质量浓度为20 ng/mL的对照品溶液，分别于0，2，4，12 h 时进样测定吸光度。结果的 RSD 为 0.71%(n=4)，均未超过5.00%，可见对照品溶液在12 h内稳定。

加样回收试验:本研究中进行了高、中、低3种质量浓度的加样回收试验，结果见表1。

表1 砷的加样回收试验结果(n=9)

2.4 样品含量测定

称取一定量样品，按2.2项下方法消解后进样测定。结果批号为2120001，2120002，2120003的样品中砷的含量分别为0.12，0.11，0.10 mg/kg。

3 讨论

本研究中采用硝酸镁法、过氧化氢法、直接炭化法按2010年版《中国药典(二部)》附录ⅧJ第二法对样品进行砷盐检查，结果经硝酸镁法处理后的供试品溶液加标准品溶液的监控管颜色浅于标准管颜色;经氧化氢法处理后标准品溶液管颜色浅于供试品溶液管颜色;直接炭化法中，供试品溶液管颜色浅于标准品溶液管颜色，且标准品溶液管颜色浅于供试品溶液加标准品溶液管，但供试品溶液消化不完全。因此，本品不宜采用2010年版《中国药典(二部)》附录中砷盐检查法检查。

本试验结果表明，原子吸收分光光度法测定多烯磷脂酰胆碱中砷盐的含量，其检出限、精密度、加标回收率、稳定性等指标均较好，且试验过程简便，测试专属性强，适用于多烯磷脂酰胆碱中砷的控制。

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