痛风消颗粒的主要药效学研究＊

刘建忠 ，周 兴 ，漆 伟 ，郭 亮 ，廖兴隆 ，刘红露 ，唐荣珠 ，张 莉 ，罗先钦 ，郭剑华

(1.重庆市中医骨科医院，重庆 400010;2.重庆市中药研究院，重庆 400065)

痛风消颗粒的功能主治为清利湿热、活血止痛，临床用于治疗急性痛风性关节炎。本研究中拟通过药效学试验，为临床用药提供参考依据，现报道如下。

1 仪器、试药与动物

AU480型全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特有限公司);TR－180型生物组织全自动染色机(湖北泰维医疗科技有限公司)。痛风消颗粒(重庆市中医骨科医院提供，批号为20140801，规格为每1 mL相当于5 g原生药);秋水仙碱片(滇虹药业集团玉溪生物制药有限公司，批号为20130802);别嘌醇片(重庆青阳药业有限公司，批号为130104);醋酸地塞米松片(浙江仙琚制药股份有限公司，批号为1306111);阿司匹林(拜耳医药保健有限公司，批号为BJ16773);复方丹参片(广州白云山和记黄埔中药有限公司，批号为H3A003)。SD大鼠(雌雄各半，动物合格证号0003202;全雄，动物合格证号0003211)、KM小鼠(雌雄各半，动物合格证号0003202，0003929)，由重庆市中药研究院实验动物研究所提供;KM小鼠，全雄，动物合格证号0020093，由中国人民解放军第三军医大学实验动物中心提供。

2 方法与结果

2.1 对大鼠痛风性关节炎模型的影响[1－3]

将雄性SD大鼠60只随机分为6组，即空白对照组(A组)，模型组(B组)，秋水仙碱片组(0.2 mg/kg，C组)，痛风消颗粒高、中、低剂量组(相当于每 1 kg 体重 20，10，5 g，D1，D2，D3组)，每组10只。按组别给予相应药物，给药剂量为每100 g体重1 mL，每日1次，连续给药14 d。给药第11天造模前测定动物右侧踝关节周径，造模后2 h，给药第12，13天再次测定右容积，计算足肿胀度及肿胀率。造模后2 h及给药第12，13天后2 h分别按Coderre步态分级标准进行评分。取踝关节，10%甲醛溶液固定，HE染色，光镜下进行关节滑膜组织形态学观察。结果见表1。B组大鼠关节滑膜组织出现充血、炎症细胞浸润、肿胀和部分动物一定程度坏死;C组关节滑膜组织炎症细胞浸润、肿胀有明显改善;D1组关节滑膜组织充血、肿胀有明显改善，D2及D3组关节滑膜组织充血、炎症细胞浸润、肿胀均有明显改善和修复。

2.2 对小鼠高尿酸血症模型的影响[4－5]

将雄性KM小鼠60只随机分为6组，即空白对照组(A组)，模型组(B组)，阳性对照组(别嘌醇片60 mg/kg，C组)，痛风消颗粒高、中、低剂量组(相当于每 1 kg 体重 40，20，10 g 生药，D1，D2，D3组)，每组10只。按组别给予相应药物，给药剂量为每10 g体重0.2 mL，每日1次，连续给药6 d。末次给药后1 h，除A组外，各组均腹腔注射黄嘌呤混悬液1 200 mg/kg，1 h后摘眼球取血，以3 000 r/min的转速离心，用全自动生化分析仪测血清尿酸含量。结果见表2。

表1 痛风消颗粒对大鼠痛风性关节炎模型的影响(X ± s，n=10)

表2 痛风消颗粒对小鼠高尿酸血症模型、二甲苯致耳肿胀及醋酸致扭体反应的影响(X ± s，n=10)

2.3 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响[6－8]

将KM小鼠50只(雌雄各半)随机分为5组，即空白对照组(A组)，阳性对照组(醋酸地塞米松片5 mg/kg，C组)，痛风消颗粒高、中、低剂量组(相当于每 1 kg 体重 40，20，10 g 生药，D1，D2，D3组)，每组10只。按组别给予相应药物，给药剂量为每10 g体重0.2 mL，每日1次，连续给药5 d。末次给药后1 h，于小鼠右耳涂抹二甲苯0.02 mL/只，20 min后脱颈处死动物，打孔器打下动物左右耳，精密称取耳片质量，计算耳肿胀度(右耳质量－左耳质量)，耳肿胀抑制率=(对照组平均肿胀度－给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度×100%。结果见表2。

2.4 对醋酸致小鼠扭体反应的影响[9－10]

将KM小鼠50只(雌雄各半)随机分为5组，即空白对照组(A组)，阳性对照组(阿司匹林片 0.2 g/kg，C组)，痛风消颗粒高、中、低剂量组(相当于每 1 kg 体重 40，20，10 g 生药，D1，D2，D3组)，每组10只。按组别给予相应药物，给药剂量为每10 g体重0.2 mL，每日1次，连续给药5 d。末次给药后1 h，各组每只小鼠均腹腔注射0.8%醋酸0.2 mL，记录注射醋酸后20 min内小鼠出现扭体反应(腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高)的次数及潜伏期，扭体抑制率(%)=(对照组平均扭体次数－给药组平均扭体次数)/对照组平均扭体次数×100%。结果见表2。

2.5 对肾上腺素加冰水所致大鼠急性血瘀模型的影响[11－12]

将SD大鼠60只(雌雄各半)随机分为6组，即空白对照组(A 组)，模型组(B 组)，阳性对照组(复方丹参片 0.4 g/kg，C 组)，痛风消颗粒高、中、低剂量组(相当于每1 kg体重20，10，5 g生药，D1，D2，D3组)，每组 10只。按组别给予相应药物，给药剂量为每10 g体重0.2 mL，每日1次，连续8 d。末次给药后1 h，除A组外，其余各组均按每100 g体重0.08 mL皮下注射0.1%肾上腺素，2 h后将动物于4℃冰水中浸泡5 min，于首次注射后4 h再次注射同等剂量的肾上腺素，禁食不禁水18 h。次日，戊巴比妥钠45 mg/kg麻醉后腹主动脉取血0.5 mL，注入EDTA采血管中抗凝后测定红细胞比容(HCT);3 mL注入肝素抗凝试管中，测定全血黏度，再将血离心，测定血浆黏度，并计算出聚集指数、刚性指数、变形指数等;2 mL注入枸橼酸钠抗凝试管中，离心测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)。结果见表3。

表3 痛风消颗粒对大鼠急性血瘀模型的影响(X ± s，n=10)

3 讨论

痛风是由于嘌呤代谢紊乱和(或)尿酸排泄障碍导致的一种异质性疾病，临床特点是高尿酸血症、痛风性急性关节炎反复发作、痛风石沉积、特征性慢性关节炎和关节畸形，常累及肾而引起慢性间质性肾炎和形成肾尿酸结石。随着人们生活方式的改变，痛风患病率有明显上升趋势，南方和沿海经济发达地区发病率尤高[6]。本研究结果显示，用痛风消颗粒治疗，可能具有以下作用。

降尿酸作用:高、中剂量痛风消颗粒对小鼠腹腔注射黄嘌呤致高尿酸模型有明显降低尿酸的作用，提示其可明显抑制小鼠高尿酸血症的尿酸升高。

抗炎作用:高、中剂量痛风消颗粒对大鼠痛风性关节炎造模后2，24，48 h足肿胀度和肿胀率有明显抑制作用，高剂量对关节滑膜组织充血、肿胀有明显改善作用，中、低剂量对关节滑膜组织充血、炎症细胞浸润、肿胀均有明显改善和修复作用;对二甲苯致小鼠耳肿胀有明显抑制作用。提示痛风消颗粒对大鼠痛风性关节炎和二甲苯致小鼠急性炎症有明显抗炎作用。

镇痛作用:高剂量痛风消颗粒对大鼠痛风性关节炎造模后2，48 h步态有明显改善作用;高、中、低剂量对醋酸所致小鼠扭体反应有明显抑制作用，能明显减少醋酸刺激引起的小鼠扭体次数，但各剂量对其疼痛潜伏期未见明显影响。提示痛风消颗粒对大鼠痛风性关节炎和醋酸致小鼠外周疼痛有一定镇痛作用。

活血化瘀作用:高剂量痛风消颗粒能明显降低肾上腺素加冰水所致大鼠急性血瘀模型的PT、APTT、全血黏度(高切、低切)及高切还原黏度。提示痛风消颗粒对急性血瘀模型大鼠有一定的活血化瘀作用。

综上所述，痛风消颗粒对急性炎症有较强的抗炎作用，且能降低尿酸，同时还具有一定外周镇痛和活血化瘀作用，为临床治疗急性痛风性关节炎提供了一定的药理学依据。

[1]周必洪，傅玉辉，闫 虎，等.痛风宁颗粒对急性痛风性关节炎模型大鼠关节局部炎症因子及TLRs/MyD88的影响[J].福建中医药，2013，44(6):51 － 53.

[2]陈光亮，吕红霞，王媛媛，等.萆薢牛膝总皂苷对尿酸钠诱导的大鼠急性痛风性关节炎的防治作用[J].中药药理与临床，2010，26(1):34－37.

[3]黄敬群，孙文娟，王四旺，等.槲皮素对大鼠痛风性关节炎抗炎抗氧化活性研究[J].中国实验方剂学杂志，2012，18(2):169－173.

[4]姚 丽，刘树民，于书仪.痛风性关节炎动物模型的改良[J].中国实验动物学报，2009，17(3):210 － 214.

[5]许伟伟，孟建国，王 强，等.痛风消胶囊抗痛风的实验研究[J].陕西中医学院学报，2009，32(6):72 －73.

[6]李荣华，聂 慧，刘友章，等.痛风动物模型的研究现状及评价[J].时珍国医国药，2010，21(6):1 510－1 512.

[7]王 淳，高学敏，张建军.苓丹痛风康胶囊抗痛风作用的实验研究[J].中华中医药杂志，2008，23(8):742 －744.

[8]朱晓勤，尹 莲，徐 立，等.二妙丸系列类方有效部位群药效学比较研究[J].中医药导报，2008，14(2):12－15.

[9]臧 宁，王 丁，彭小文，等.桑色素对二硝基氟苯诱导的迟发型超敏反应的影响[J].中国实验诊断学，2013，17(4):650－653.

[10]佟春玉，曹 宁，刘振华，等.山奈酚对小鼠迟发型超敏反应的免疫抑制作用[J].中国生物制品学杂志，2013，16(6):848－850.

[11]李 涓，曾 倩，万 丹，等.疏经防痛胶囊活血化瘀作用及其机制的实验研究[J].四川中医，2014，32(8):48－50.

[12]丘玉昌，曹 莹，孔焕育，等.少腹逐瘀汤活血化瘀及镇痛、抗炎作用的实验研究[J].中国中医药科技，2012，19(6):498－499.