毛细管柱气相色谱法测定醇类消毒凝胶中乙醇含量

徐 纬

(贵州医科大学 公共卫生学院，贵州 贵阳 550004)

醇类消毒剂历史悠久，应用广泛，可较快杀灭细菌繁殖体、分支杆菌、真菌孢子及亲脂病毒等［1］。醇类消毒凝胶是近年来出现的新型消毒剂，它以凝胶为载体，均匀附载一种或多种消毒成分，与醇类传统消毒剂比较优势明显。乙醇含量检测方法很多，主要有比重法和气相色谱法，前者不适用于凝胶类样品，而后者方法操作繁琐［2－7］。目前以气相色谱法中的直接进样内标法为主，该法操作更简便、准确度更高。本文以叔丁醇为内标，采用直接进样毛细管柱气相色谱法检测醇类消毒凝胶中乙醇含量，报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器、药物与试剂

GC-2010 型气相色谱仪(氢火焰离子化检测器，日本岛津公司)，Mettler Toledo AB265-S 型电子天平(Mettler Toledo 公司)，VDRTEX-5 型漩涡混匀器(其林贝尔仪器制造有限公司，江苏海门)，超纯水机(美国，Millipore)。无水乙醇和叔丁醇均为分析纯，实验用水为Milli-Q 超纯水(＞18 MΩ·cm)。乙醇标准溶液(40 g/L)制备:量取乙醇12.67 mL(比重0.789 3 g/cm3)于250 mL 容量瓶中，加超纯水定容至250 mL，4 ℃保存。叔丁醇标准溶液(20 g/L)制备:量取叔丁醇12.68 mL(比重0.788 7 g/cm3)于500 mL 容量瓶中，加超纯水定容至500 mL，4 ℃保存。

1.2 方法

1.2.1 色谱条件 色谱柱为OV-1701 毛细管柱(50 m×0.25 mm×0.33 μm)，进样口温度210 ℃，程序升温(柱起始温度50 ℃，保持1 min，以7 ℃/min 的速度升至170 ℃)，检测器温度230 ℃，载气为氮气(纯度≥99.99%)，柱前压100.6 kPa，柱流量0.84 mL/min，隔垫吹扫流量3 mL/min，氢气流速30 mL/min，空气流速300 mL/min，尾吹气流速30 mL/min，分流比100∶1。

1.2.2 样品溶液的制备 称取10.0 g 样品，用超纯水定容至1 000 mL。

1.2.3 空白对照品溶液的制备 称取10.0 g 按样品配方不添加乙醇制成的空白对照品，用超纯水定容至1 000 mL。

1.2.4 专属性试验 量取“1.2.2”和“1.2.3”项下溶液1.0 mL，分别制成空白对照、空白+乙醇、空白+乙醇+叔丁醇、空白+甲醇+乙醇+正丙醇+异丙醇+叔丁醇+正戊醇+异戊醇、样品及样品+叔丁醇的供试液，各取1 μL 进样分析。

1.2.5 线性关系与方法检测限试验 配制10、20、40、60、80 及100 g/L 乙醇标准系列，各取1.2.3 项下的空白对照品溶液0.9 mL 分别加入上述乙醇标准溶液100 μL 和叔丁醇标准溶液50 μL，混匀，各取1 μL 进样，以乙醇浓度值为横坐标，乙醇与叔丁醇峰面积比值为纵坐标，进行线性回归;另逐级稀释乙醇标准溶液，按上述步骤操作，以信噪比约为3∶1时计算方法检测限。

1.2.6 方法回收率与精密度试验［8］取18 份同批样品稀释液各0.9 mL，均分为3 组，分别加入10、20、40 g/L 乙醇标准溶液100 μL 和叔丁醇标准溶液50 μL，混匀，各取1 μL 进样。

1.2.7 样品测定 分别取空白样品稀释液0.9 mL和样品稀释液1.0 mL 各3 份，空白样品中加入40 g/L乙醇标准溶液50 μL 和叔丁醇标准溶液100 μL，样品中加入叔丁醇标准溶液50 μL，混匀后各取1 μL 进样。

2 结果

2.1 专属性试验

结果表明，在“1.2.1”的色谱条件下，空白对照品溶液前6 min 无干扰峰出现，乙醇和叔丁醇峰完全分离，保留时间分别为5.02 min、5.47 min，且样品溶液中乙醇峰附近无杂峰，适宜选择叔丁醇作为内标，另常用作消毒剂的其他醇类峰分离较好，不干扰乙醇测定，该法对醇类消毒凝胶中乙醇含量检测具有专属性。见图1。

图1 专属性试验色谱Fig.1 Chromatogram of the specificity test

2.2 线性关系与方法检测限

结果表明，样品中乙醇浓度在1 ～10 g/L 范围时，检测结果呈良好线性关系，Y=0.607 9X－0.030 3，r=0.999 5;方法检测限为1.67 mg/L。

2.3 回收率与精密度

结果显示加标回收率为98.6%～99.9%，精密度较好，RSD ＜2.0%(n=6)，表明，本文方法准确度较高，见表1。

2.4 样品测定

测定结果显示该批样品中乙醇含量为52.2%，RSD 为0.6%(n=3)，属于该类产品中乙醇含量规定范围，结果见表2。

表1 消毒凝胶中乙醇的回收率和精密度(n=6)Tab.1 The recovery rate and the precision of ethanol in disinfectant gel

表2 消毒凝胶中乙醇含量测定(n=3)Tab.2 Determination of ethanol in disinfectant gel

3 讨论

《消毒技术规范》(2002 年版)中规定了消毒剂中乙醇含量的测定方法，其中的气相色谱法采用玻璃填充柱和外标法进行测定，操作较为繁琐。目前气相色谱技术多采用毛细管柱，比重法仅适用于测定含乙醇和水的溶液［2］。关于固体、半固体消毒剂中乙醇含量测定另有方法，但其蒸馏过程增加了操作复杂程度［8］。

本文样品基质为水溶性凝胶，可通过直接稀释方法测定乙醇含量。结果发现选择叔丁醇作为内标时对其他醇类峰分离较好，且不干扰乙醇测定;样品中乙醇浓度在1 ～10 g/L 范围时，检测结果呈良好线性关系，且方法回收率为98.6%～99.9%，RSD ＜2.0%(n=6)，

测定结果为该批样品中乙醇含量为52.2%，RSD 为0.6%(n=3);在对样品测定时结果也显示乙醇含量在该类产品中乙醇含量规定范围内，以上说明毛细管柱气相色谱法对醇类消毒凝胶中乙醇含量检测具有专属性，且精密度较好，灵敏度和准确度较高，重现性较好，还能完全分离甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、叔丁醇、正戊醇和异戊醇，检测中还发现毛细管柱气相色谱法出峰时间快，且操作简便，说明毛细管柱气相色谱法可用于醇类消毒凝胶中乙醇含量的快速测定。

［1］甘平胜，黄聪，杨阳，等.顶空气相色谱法测定手消毒剂中总醇含量［J］.中国卫生检验杂志，2005(3):320－321.

［2］卫生部卫生法制与监督司.消毒技术规范［S］.北京:中华人民共和国卫生部，2002:126.

［3］虞精明，谢勤美，杨凤华.酒中乙醇含量检测方法［J］.中国卫生检验杂志，2008(9):1930－1932.

［4］赵东玲，王粉安，郑海波，等.顶空气相色谱法快速测定全血中乙醇与甲醇的含量［J］.中国药业，2013(20):53－54.

［5］樊娟，刘芳春.红元帅苹果贮藏过程中乙醇含量的测定［J］.中国卫生检验杂志，2012(09):2061－2065.

［6］王强，安代志，王莉莉，等.手消毒剂中复合醇鉴定与含量测定［J］.中国消毒学杂志，2010(6):665－667.

［7］吴胜.血液中乙醇检测方法的探讨［J］.中国卫生检验杂志，2013(16):3316－3318.

［8］银燕，张聿为.醇类消毒剂及其制剂的发展［J］.中国消毒学杂志，2013(11):1062－1065.