周围型肺癌CT征象与Ki67、p53表达的相关性研究

史利红，李会菊，邢国凤

(唐山市人民医院CT室，河北 唐山 063000)

周围型肺癌CT征象与Ki67、p53表达的相关性研究

史利红，李会菊，邢国凤

(唐山市人民医院CT室，河北 唐山 063000)

目的探讨周围型肺癌CT征象与Ki67、p53表达的相关性。方法选取我院2013年1月至2014年3月在门诊检查并经术后病理证实的周围型肺癌患者68例，全部患者应用64层螺旋CT平扫或增强扫描进行肺癌的CT征象判断，测定每个患者蜡块组织中Ki67、p53的表达量，探寻不同CT征象与Ki67、p53表达量的相关性。结果有棘状突起征象的p53阳性表达比例高(χ2=4.60，P=0.032)，有毛刺征的p53、Ki67阳性结果比例均高，有相关性(χ2=5.49，P=0.001 9；χ2=4.27，P=0.039)，有磨玻璃征的p53阴性比例高，有相关性(χ2=8.22，P= 0.004)，有淋巴结转移征象的p53阳性结果比例高，有相关性(χ2=11.2，P=0.001)，有分叶征与Ki67阴性结果比例高，有相关性(χ2=5.56，P=0.018)，其他CT征象与p53、Ki67表达量无相关性。结论棘状突起、毛刺征、磨玻璃征和淋巴结转移征象与Ki67、p53表达有相关性，为肺癌不同征象诊断提供依据。

周围型肺癌；CT征象；Ki67；p53

周围型肺癌又名肺野型，是指发生在肺段以下支气管直至细小支气管的肺癌，是城市死亡率位居首位的恶性肿瘤，在农村中，肺癌死亡率逐渐上升。周围型肺癌的CT表征主要有血管集束征及空洞、支气管充气征、空泡征、钙化、毛刺征、胸凹陷征、分叶征等[1]，CT扫描可以显现肺癌的影像学特征，但其诊断率较低[1]。肿瘤生物标记物可以反映肿瘤的生物学特征，p53抑癌基因发生突变后会导致细胞无限制地增长，变成癌基因，使肿瘤细胞增生变得非常活跃，因此正常p53基因在肿瘤细胞的产生、发展中起到重要决定性作用。Ki67蛋白是一种重要指标，用以表示细胞增殖活性，在已发生癌变的组织中恶性程度越高，Ki67蛋白表达越强。肿瘤标志物的检测简便且费用低廉，其表达异常往往早于影像学的异常，因此推测肿瘤标志物的异常对周围型肺癌的生物学行为具有重要意义。本研究旨在探讨周围型肺癌的CT征象与Ki67、p53表达的相关性，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 研究对象 按照患者知情同意的原则，选取2013年1月至2014年3月在我院门诊检查并经术后病理证实的周围型肺癌患者68例，全部患者用64层螺旋CT平扫或增强扫描。男性37例，年龄43～75岁，平均65岁；女性31例，年龄36～78岁，平均59岁，其中舌叶和中叶各7例，上叶和下叶分别为38例和16例；病程均不等，均为首次肺癌手术。

1.2 研究方法 所有患者进行64位螺旋CT扫描(德国Siemens公司)，扫描整个肺部，记录本次研究的分叶、棘突、含气管征、毛刺征、磨玻璃征、空洞或钙化以及纵膈或肺门淋巴结转移等。淋巴结转移判断标准为：肺门淋巴结短径＜10 mm为非转移；>10 mm和多个淋巴结肿大并融合为转移。

1.3 p53和Ki67测量方法 选用即用型免疫组化EliVision plus试剂盒；鼠抗人p53蛋白免疫组化单克隆抗体及鼠抗人Ki-67抗原免疫组化单克隆抗体。抗原抗体反应实验参照试剂盒说明书进行操作：在测定前需要用浓度为10 mmol/L，pH值6.0的柠檬酸盐缓冲液处理甲醛溶液固定的石蜡切片。p53抗体试验中选取肺癌组织的结果为阳性对照组，测Ki67抗体实验中采用扁桃体阳性染色的切片为阳性对照组，而阴性对照组选用正常血清代替一抗。

1.4 p53和Ki67评定标准 显微镜下观察细胞核内有棕黄色颗粒即为阳性结果，计数1 000个视野下细胞中阳性细胞所占的比例。40倍显微镜下p53 1 000个细胞中阳性结果所占比例≥10%为阳性，反之为阴性；50倍显微镜下Ki67 1 000个细胞中阳性结果记录大于等于50%为阳性，反之为阴性。

1.5 统计学方法 应用SPSS16.0统计学软件，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 CT征象与p53表达量的相关性 有棘状突起征象与p53阳性结果比例高有相关性(P＜0.05)，有毛刺征与p53阳性结果比例高有相关性(P＜0.05)，有磨玻璃征与p53阴性比例高有相关性(P＜0.05)，有淋巴结转移征象与p53阳性结果比例高有相关性(P＜0.05)；其他CT征象与p53表达量无相关性(P>0.05)，见表1。

2.2 CT征象与Ki67表达量的相关性 有分叶征与Ki67阴性结果比例高有相关性(P＜0.05)，有毛刺征与Ki67阳性结果比例高有相关性(P＜0.05)，其他CT征象与Ki67表达量无相关性(P>0.05)，见表2。

表1 CT征象与P53表达量的相关性(例)

表2 CT征象与Ki67表达量的相关性(例)

3 讨论

周围型肺癌好发于小支气管部位，由于小支气管的功能结构，组织较薄，免疫细胞分布的少，是肺癌组织快速生长的好地方。周围型肺癌大多发病在40岁以上，60～79岁之间为发病高峰，男女发病比例为2.13：1。肺癌主要的症状是咳嗽、咳痰和咯血，但是否出现临床症状和体征取决于肺癌发生的部位和病变发展的程度等多种因素，由于周围型肺癌生长方式的不同，导致其CT征象不同。周围型肺癌采用CT平扫时首先看到的局部结构不规则而无序，能见到明显的“瘤-肺”组织界面，包括有毛刺和棘状突、分叶、磨玻璃影等征象特点；其次，癌组织的内部表征即钙化、空洞、含气支气管像等征象；最后是癌组织和肺组织周围结构的关系，主要为阻塞性肺气肿、胸膜增厚、炎性斑和卫星灶等。本次研究主要探讨周围型肺癌在临床诊断上最为常见的征象，包括分叶、毛刺、棘状突起、含气支气管像、钙化和空洞、磨玻璃征等[2-4]。

临床CT诊断中征象较多，一般以分叶征较多见，分叶征的形成是由多个肿块相互融合所致，肿块的形状多样，以凹凸不平常见。肿块形成的病理基础是相互融合的肿块在不同的生长方向上速度不同，或者在生长中受到气管或血管的障碍阻挡所致。在周围型肺癌中分叶征象最为常见，分叶征的存在表示肿瘤的形成的概率很高，癌细胞在病理上已经具有较强的增殖能力和较高的恶化程度。毛刺表象为从癌组织边缘开始向肺野内纵深，与胸膜有一定距离，毛刺大小不等，呈扫尾状的密度分布，在临床上这种征象诊断为周围型肺癌也比较常见；癌细胞生长加快，开始向周围的淋巴管和血管束亲润后的结果是其病理基础，或者是在结缔组织挤压作用下挤压癌组织引起的周围间质反应性增生。

随着分子生物学的不断发展，除传统CT诊断外可以采用生物样本进行诊断，本文探讨组织中p53和Ki67表达量与肺癌征象的相关性。人类的恶性肿瘤中有一半以上发生了p53基因突变或基因缺失[3]，p53基因的表达和肺癌的产生和发展紧密相连。现在已经有证实p53基因发生突变是由于p53蛋白与腺病毒编码癌蛋白发生非特异性结合[4-5]，突变的p53基因就会促进细胞增长，影响细胞内蛋白降解，在不同CT征象中淋巴结转移的发生会增加细胞内蛋白的降解，这与本研究得出的结果相符。在周围型肺癌的临床患者中，肿瘤组织检测鳞癌组织中Ki67抗原阳性的百分率远远高于腺癌。在肺癌患者中，Ki67抗原阳性的检出率加之p53的表达强度增强方面，CT中诊断显示支气管气相、胸膜凹陷征、空泡征毛、玻璃征、空洞和钙化表现两者是相似的[6]。癌细胞分化程度与抗原抗体反应中Ki67抗原阳性的检出率呈负相关。从本研究得出Ki67表达量与分叶征和毛刺征均有相关性，可能是Ki67和细胞增殖密不可分，是重要的调节细胞周期的影响因子，表达的水平与肺癌的产生和发展紧密相连，可作为特殊的评价细胞增生增长的判断指标。肿瘤的形成、发展、扩大、分期、转移及治疗等与肿瘤标志物p53、Ki67在多个方面有很明显的关联性，而与p53蛋白的表达强度之间呈一定的负相关的联系。

周围型肺癌临床CT征象在一定程度上对肿瘤细胞增长性指标Ki67与p53进行推测，随着科技的发展，诊疗技术的不断提高，会不断解开CT肺癌征象与p53、Ki67的机制相关性，在未来有望指导临床建立周围型肺癌的个体化治疗。

[1]胡辅裕.周围型肺癌76例患者的CT表现与血清肿瘤标记物及p53、Ki67的蛋白表达的相关性研究[J].检验医学与临床,2014, 11(1)：30-32.

[2]李兴荣.周围型小肺癌X线与CT诊断方法临床分析[J].海南医学,2011,22(19)：75-76.

[3]李军华.12例肺大细胞癌的诊断与治疗体会[J].海南医学,2010, 21(21)：75-76.

[4]孙 超.p53及耐药相关基因的表达与非小细胞肺癌化疗耐药性的研究[J].海南医学,2010,21(14)：45-48.

[5]朱刚明,李兆勇.局灶性机化性肺炎的多层螺旋CT诊断及与周围型肺癌鉴别[J].临床放射学杂志,2014,33(11)：1675-1679.

[6]诸志刚.低剂量多层螺旋CT肺癌检出的影像学特点[J].临床放射学杂志,2014,33(12)：1850-1854.

Correlations between CT signs and expression of Ki67,p53 in peripheral lung cancer.

SHI Li-hong,LI Hui-ju, XING Guo-feng.CT Room,Tangshan People's Hospital,Tangshan 063000,Hebei,CHINA

ObjectiveTo explore the relationgships between CT signs and the expression of Ki67,p53 in peripheral lung cancer.MethodsSixty-eight patients of peripheral lung cancer who were confirmed by postoperative pathology from January 2013 and March 2014 in our hospital were enrolled in the study.All patients underwent 64-slice spiral CT scan or enhanced scan for the CT signs.The expressions of Ki67 and p53 in wax tissue of each patient were detected,and the relationships between CT signs and the expression of Ki67,p53 were explored.ResultsPatients with spinous protuberant sign had higher proportion of p53 positive expression,with significant correlation(χ2=4.60,P=0.032),and patients with spicular sign had higher proportion of p53 and Ki67 positive expressions(χ2=5.49,P=0.001 9;χ2=4.27,P=0.039).Patients with ground-glass opacity had higher ratio of p53 negative(χ2=8.22,P=0.004),and those with lymph node metastasis signs had higher proportion of p53 positive(χ2=11.2,P=0.001).Patients with signs of lobulation had higher negative expression of Ki67(χ2=5.56，P=0.018).However,other CT signs showed no significant correlations with the expression of p53 and Ki67.ConclusionThe spinous protuberant sign,spicular sign,ground-glass opacity and lymph node metastasis sign are correlated with the expression of p53 and Ki67,which provides reference for the diagnosis of lung cancer.

Peripheral lung cancer;CT signs;Ki67;p53

R734.2

A

1003—6350（2015）11—1616—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.11.0578

2014-12-15)

史利红。E-mail：shilihong1211@163.com