病理性瘢痕组织中VEGF、CD105表达变化及意义

李云飞，龙晓东，李永忠(德阳市人民医院，四川德阳618000)

病理性瘢痕组织中VEGF、CD105表达变化及意义

李云飞，龙晓东，李永忠
(德阳市人民医院，四川德阳618000)

摘要:目的观察病理性瘢痕组织中VEGF、CD(105)的表达变化，探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测47例增生性瘢痕患者(增生性瘢痕组)、22例瘢痕疙瘩患者(瘢痕疙瘩组)瘢痕组织及16例接受整形美容手术者(对照组)正常皮肤组织中的VEGF、CD(105)表达情况及微血管密度(MVD)，并比较三组间的差异。结果瘢痕疙瘩组、增生性瘢痕组标本中VEGF、CD(105)、MVD均高于对照组(P均＜0.05)，瘢痕疙瘩组标本中VEGF、CD(105)、MVD与增生性瘢痕组相比差异无统计学意义。结论病理性瘢痕组织中VEGF、CD(105)呈现高表达，提示异常血管新生参与了病理性瘢痕的发生发展过程; VEGF可能是抗血管新生治疗病理性瘢痕增生的有效靶点。

关键词:病理性瘢痕; CD(105);血管内皮生长因子

病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩，是皮肤损伤后组织纤维异常增生，肉芽组织过度修复的结果。损伤修复所有阶段均伴随着血管及其生物活性物质的参与，因此血管的生成与重建是创面愈合的关键［1］。CD105作为一种良好的血管标记物，在新生血管中有很强的表达而在成熟血管中低表达或不表达，通过CD105计算出的微血管密度(MVD)能较为准确的反映组织中的血管新生状况［2］。VEGF是目前所知最强的促血管生成细胞生长因子，在血管形成、促进创伤愈合、组织修复及再生等方面起着十分重要的作用［3］。2014年1～3月，我们检测并比较了增生性瘢痕、瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中CD105、VEGF的表达情况及MVD，探讨血管新生在病理性瘢痕发生、发展中的作用。现报告如下。

1　资料与方法

1.1临床资料选择2008～2013年门诊收治的增生性瘢痕患者47例、瘢痕疙瘩22例，分别为增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组。均为单发。增生性瘢痕组男26例、女21例，年龄8～64(34±12.5)岁。瘢痕疙瘩组男14例、女8例，年龄12～58(24.5±14.5)岁。另取16例接受整形美容手术者为对照组，其中男4例、女12例，年龄18～43(25±10.5)岁。均取其手术切除瘢痕组织(对照组为正常皮肤组织)进行检测。各组标本经甲醛固定、脱水、透明、包埋后4 μm连续切片5张备用。

1.2VEGF、CD105表达检测采用免疫组化SP法。按CD105、VEGF检测试剂盒说明书步骤操作。用PBS代替一抗作为空白对照。VEGF阳性染色呈棕黄色，表达于细胞质和细胞核。CD105主要表达于微血管内皮细胞胞质中，被染成棕黄色或棕褐色颗粒。将染色后的切片用Image Pro Plus 6.0行定量分析，分别挑选高倍镜视野下的表皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞黄染区域作为测量区域(AOI)，测得切片上DAB显色为棕黄色阳性区域的光密度值，每张切片分别随机选取10个视野，取其均值即平均光密度值(MOD)表示VEGF、CD105表达强度［4］。

1.3MVD测算在组织切片中，呈现淡黄棕黄或黄褐色单个内皮细胞或内皮细胞簇均作为1个血管计数。CD105标记的MVD计数方法参照Weidner方法［5］，先在低倍镜下(×100)寻找富含血管的“热点”区域然后在高倍镜下(×400)进行血管计数，每张切片选取5个不同的高倍视野计数，取其均值作为单位面积中血管数目的相对值。

1.4统计学方法采用SPSS13.0统计软件。计量数据用珋x±s表示，组间比较采用方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

瘢痕疙瘩组、增生性瘢痕组、对照组标本中VEGF、CD105、MVD表达见表1。由表1可见，瘢痕疙瘩组、增生性瘢痕组标本中VEGF、CD105、MVD均高于对照组(P均＜0.05)，瘢痕疙瘩组标本中VEGF、CD105、MVD与增生性瘢痕组相比差异无统计学意义。

表1　瘢痕疙瘩组、增生性瘢痕组、对照组VEGF、CD105、MVD比较(±s)

注:与对照组相比，*P＜0.05。

组别　n　VEGF　CD105　MVD(条/HP)瘢痕疙瘩组　47　0.50±0.06*　0.48±0.08*　110.75±5.08*增生性瘢痕组　22　0.48±0.08*　0.46±0.08*　91.67±4.83*对照组16　0.19±0.09　0.17±0.09　16.78±4.64

3　讨论

创伤后组织纤维异常增生，肉芽组织过度修复导致病理性瘢痕。这一直是现代医学研究的热点。虽然目前对于病理性瘢痕形成的分子生物学机制尚不完全清楚，但在导致其发生的诸多因素中，血管因素越来越受到人们的关注。大量研究显示，局部微血管的异常增生是造成瘢痕组织增生形成的重要因素［6，7］。

鉴于CD105在新生血管中有很强的表达而在成熟血管中低表达或不表达，通过CD105标记计算出的MVD能较为准确地反映组织中的新生血管的情况。本研究结果显示，增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中MVD明显高于正常皮肤组织，血管新生现象明显。相关研究也证实瘢痕增生的程度同微血管流量相关［8］，血液循环丰富的的部位发生病理性瘢痕的概率较循环相对较差的部位增高。瘢痕手术时，处于增生期的创面出血明显多于成熟期瘢痕。这些均提示局部丰富的微血管同瘢痕组织增生存在着密切的关系［9］。针对新生血管进行抑制可能成为治疗瘢痕组织异常增生的一种新途径。

VEGF是目前已知最强的促血管生成细胞生长因子，在血管形成、促进创伤愈合、组织修复及再生等方面起着十分重要的作用。其生物学功能包括促进细胞增殖、增加血管通透性、促进血管支撑物的形成等［10～12］。本研究结果显示，病理性瘢痕组织中VEGF表达明显高于正常组织，结合相关文献笔者认为其促进瘢痕生成的机制包括以下几个方面:①VEGF可以促进炎性细胞的聚集，刺激炎性介质的释放，提高血管通透性，加重炎性反应而导致成纤维细胞增殖及分泌大量胶原，促进病理性瘢痕形成［13］。②成纤维细胞增殖及分泌大量胶原需要消耗大量的氧气及营养支持，新生血管可以运输氧气和营养物质［14］。③VEGF不仅可影响血管内皮细胞增生同时具备促进成纤维细胞增殖的作用［15］。

总之，瘢痕形成是极其复杂的生物学过程，影响的因素众多。局部微血管的异常增生在其中占有重要作用，VEGF作为创面愈合中微血管生成的关键调节因子，不仅能促进新生血管形成，同时作为血管内皮细胞和成纤维细胞的生存因子，对于病理性瘢痕的产生有很强的促进作用，因此以VEGF及其受体作为靶点进一步深入研究将为病理性瘢痕的诊断及治疗提供更为理想的手段。

参考文献:

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(收稿日期:2015-03-29)

文章编号:1002-266X(2015) 22-0067-02

文献标志码:B

中图分类号:R619.6

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.22.027