鱼油对高脂诱导小鼠血脂增长的抑制作用

钟晓敬 王秀珍 盛宏光 (湖州市中心医院内分泌科，浙江 湖州 33000)

高血脂、肥胖伴随着一系列的健康问题，包括增加了糖尿病、胰岛素抵抗、脂肪肝、动脉粥样硬化的危险，还包括一些退行性疾病，如老年痴呆，呼吸系统疾病和肿瘤类疾病〔1〕。鱼油中的多不饱和脂肪酸是细胞膜磷脂的重要成分，多不饱和脂肪酸具有调节血脂作用，鱼油中的多不饱和脂肪酸通过抑制肝脏脂肪酶基因和糖脂解酶基因表达，进而抑制肝脏脂肪的生成〔2〕。鱼油中的多不饱和脂肪酸还能调节ATP-柠檬酸裂解酶基因的表达，影响能量代谢〔3〕。本实验采用鱼油抑制高脂诱导脂肪模型，效果较满意。

1 材料与方法

1.1 动物及饲料 以8周龄大无特定病原体(SPF)级雄性小鼠野生型(WT)，雄性，体重19～21.4 g，购自上海斯莱克实验动物公司，生产许可证号SCXK(沪)2004-0910;使用许可证号:SYXK(沪)2004-0013，并饲养在中国科学院上海生命科学院营养所动物实验中心。普通饲料出上海生科院营养所动物实验中心提供，高脂饲料购于Research Diets公司，货号是D14292。高脂(高糖)饲料成分:其中含10%蔗糖，10%猪油，5%胆固醇由基础鼠饲料加蔗糖、炼猪油和蛋黄按比搭配制作高脂高糖饲料:其比例为猪油18%，蔗糖20%，蛋黄3%，基础饲料59%。

1.2 药物和试剂 鱼油购于美国安利公司A8914，主要成分为不饱和脂肪酸、EPA和DHA，多甲醛，中性树脂等。

1.3 实验仪器 MD-100型自动生化仪、恒温水浴锅、电子分析平、滴定架、万能架等，显微镜OLYMPUS BX51，切片机，Leica RM2016展片机Leica HI1210。

1.4 实验方法

1.4.1 实验动物的准备 选取健康雄性SPF级小鼠30只，体重19～21.4 g，按体重随机分三组。基础对照组:喂基础饲料同时灌胃给予生理盐水5 ml·kg-1·d-1。高脂组:喂高脂饲料同时灌胃给予生理盐水5 ml·kg-1·d-1。鱼油组:喂高脂饲料同时灌胃给予鱼油5 ml·kg-1·d-1。每笼2只，自由饮水。

1.4.2 观察指标 ①体重的增长率:从实验开始到实验结束对小鼠每3天测量一次体重并做记录，体重增长率(%)=增加的体重/实验前的体重(开始实验第1天测得的体重)。②摄食量:分别记录每周每日平均进食量。③肝脏切片，各组小鼠的胰腺切片苏木精伊红(HE)染色，在显微镜下取拍照，脂肪含量:取新鲜肝组织0.5 g，用无水硫酸钠研磨成粉，再放入索氏提取器中，用无水乙醚萃取肝脏中的脂肪。④血胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)，清谷丙转氨酶(ALT)，谷草转氨酶(AST)和血肌酐(Scr)的测定:实验结束时，引颈法处死小鼠，心脏取血，离心后收集上清液检测TC，TG，ALT，AST和SCr的水平。

1.5 统计学处理 采用SPSS15.0统计学软件进行方差分析q检验。

2 结果

2.1 各组小鼠平均进食量比较 三组进食量均无显著性差异(P＞0.01)。见图1。

2.2 肝脏HE染色 中央静脉(CV)，门静脉(PV)，鱼油组脂肪明显少于高脂组。

2.3 各组的平均体重增长率 实验结束时鱼油组和高脂组小鼠体重平均增长率显著高于对照组(q=8.245，14.742，P均＜0.01)，而鱼油组低于高脂组(q=11.768，P＜0.01)。见表 1。

2.4 各组肝肾脂肪含量及肝肾功能指标的比较 鱼油组肝脏脂肪含量较高脂组明显降低(P＜0.05);鱼油组TC、TG含量显著低于高脂组(P均＜0.01)。见表1，表2。

图1 各组小鼠1～14 w平均进食量

图2 各组小鼠的肝脏切片HE染色

表1 实验结束时各组检测指标(s，n=10，%)

表1 实验结束时各组检测指标(s，n=10，%)

与对照组比较:1)P＜0.01;与由于组比较:2)P＜0.01

组别 体重增长率 肝脏脂肪含量对照组 8.54±2.13 9.88±2.55高脂组 47.22±5.87 36.12±7.121)2)鱼油组 32.68±3.78 22.4±5.371)

表2 各组肝肾实验指标比较(s，n=10)

表2 各组肝肾实验指标比较(s，n=10)

与对照组比较:1)P＜0.01;与鱼油组比较:2)P＜0.01

对照组 23.38±2.99 101.67±12.45 63.58±5.97 2.52±0.34 0.89±0.27高脂组 24.04±2.89 106.88±12.95 65.49±5.12 7.33±0.551)2)3.89±0.141)2)鱼油组 24.23±2.01 104.26±12.05 64.33±5.29 3.56±0.63 1.56±0.45

3 讨论

肥胖不仅影响人们的工作和日常生活，而且同多种疾病的发病有关〔4〕。但迄今为止尚无理想的减肥方法，所以肥胖的发生机制成为研究的热点〔5〕。从进化的理论来看，动物在脂肪组织储存多余高能TG的能力可以使动物度过经常遇到的食物缺乏期，使生命得以延续。可见，肥胖是生物进化的结果〔6〕。但是，在食物充足的当今时代，过多的能量储备易导致多种疾病的发生。机体有一个复杂的生理系统来调节能量代谢，使之处在一个适当的水平保持能量平衡〔7〕。肥胖，高血脂和脂肪肝之间也有重要的联系，高脂血症是代谢紊乱的标志〔8〕，也是脂肪肝的主要诱因。鱼油是深海鱼类体内不饱和脂肪的简称 ，富含不饱和脂酸EPA和DHA，EPA能显著地降低总TG和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)水平。DHA能引起HDL2-C/HDL3-C比值的显著升高。鱼油中的多不饱和脂肪酸通过抑制肝脏脂肪酶基因和糖脂解酶基因表达，进而抑制肝脏脂肪的生成。鱼油中的多不饱和脂肪酸能直接参加细胞核的活动、调控某些基因如肝脂肪酸合成酶(FAS)基因的转录〔2〕。

本实验结果表明，鱼油能抑制高脂组小鼠体重的增长，这可能与鱼油组的减少脂肪含量有关。鱼油能够调节体内紊乱的脂质平衡，可能还具有防治对脉粥样硬化，胰岛素抵抗，脂肪肝等疾病的潜在作用。本实验结果说明鱼油对肝肾功能没有明显的影响，无明显的不良反应。

1 Semenkovich CF.Insulin resistance and atherosclerosis〔J〕.J Clin Invest，2006;116(7):1813-22.

2 Blanke WL，Clarke SD.Suppression of rat hepatic fatty acid synthase and S14 gene transcription by dietary polyunsaturated fat〔J〕.J Nutr，1990;120(12):1727-9.

3 Fukuda H，Iritani N，Katsurada A，et al.Insulin and polyunsaturated fatty acid-responsive region(s)of rat ATP citrates lyase gene promoter〔J〕.FEBS Lett，1996;12:380(1-2):204-7.

4 James PT，Leach R，Kalamara E，et al.The worldwide obesity epidemic〔J〕.Nature，2001;9(4):228-33.

5 Eguchi Yuichiro.Obesity and fatty liver〔J〕.J Japan Med Soc Spin Cord Lesion，1999;12(1):62-3.

6 Popkin BM.The nutrition transition in low-income countries〔J〕.Nutr Rev，1994;52(9):285-98.

7 Must A，Spadano J，Coakley EH，et al.The disease burden associated with overweight and obesity〔J〕.JAMA，1999;282(16):1523-9.

8 Whitaker RC，Dietz WH.Role of the prenatal environment in the development of obesity〔J〕.J Pediatr，1998;132(5):768-76.