HPLC法测定维吾尔药驱白艾力勒思亚散中没食子酸的含量

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新疆维吾尔自治区喀什地区药品检验所，新疆 喀什 844000

HPLC法测定维吾尔药驱白艾力勒思亚散中没食子酸的含量

沙吉旦·阿不来提热孜万古丽·阿不都热依木

新疆维吾尔自治区喀什地区药品检验所，新疆 喀什 844000

目的测定驱白艾力勒思亚散中没食子酸的含量。方法采用高效液相色谱法，Pheomenex luna C18色谱柱(250(4.60mm，5μm)柱温35℃，流动相为甲醇- 0.2%磷酸(5∶95)为流动相，检测波长为273nm，流速为1.0ml/min。结果没食子酸在11.05～55.25 μg/ml间呈良好的线性关系，r=0.9994，平均回收率为105.15 %，RSD为1.6 %。结论该方法具有操作简单，灵敏，准确的优点，分离效果显著，可用于余甘子的含量测定和本产品质量控制。

驱白艾力勒思亚散；HPLC；没食子酸；含量测定

驱白艾力勒思亚散在维吾尔医临床上为常用药，由西青果、余甘子、诃子肉、黑种草子、巴旦任等5味药组成，具有熟化异常粘液质，温肤着色，养肝胆，振食欲，用于白热斯(白癜风)和头发胡须，食欲不振、胃痛、消化不良、神经衰弱等治病，临床疗效好[1]。由于基础研究薄弱，原标准仅有挥发油和没食子酸的薄层鉴别，专属性比较差，缺乏方中主要指标成分的含量测定[2]。为了更好地控制驱白艾力勒思亚散的质量，我们对驱白艾力勒思亚散的没食子酸进行了含量测定。

1 仪器及材料

1.1 仪器 日本岛津LC20AT高效液相色谱仪；SPD-M20型检测器SIL-20A自动进样器CTO-10ASVP型柱温箱Pheomenex luna C18色谱柱(250×4.60mm，5μm)；BP-211D 1/10万电子分析天平(德国Sartorius)；Mettler AE-240型电子天平；超声波溶解仪；超纯水机。

1.2 材料 没食子酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号：MUST-11122813 )；驱白艾力勒思亚散(喀什地区维吾尔医医院，批号分别为：201102024，201104018，201201020)。甲醇为色谱纯；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 Pheomenex luna C18色谱柱(250(4.60mm，5μm)；柱温35℃；流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(5∶95)；检测波长为273nm；流速为1.0ml/min。分别取样品溶液，阴性样品溶液和对照品溶液各10μl按上述色谱条件分别进样测定，绘制色谱图，结果理论板数按没食子酸峰计算应不低于2000。

2.2 对照品溶液的制备 取没食子酸对照品11.05mg，置100ml量瓶中，用50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，在精取1ml置10ml量瓶中用50%甲醇稀释制成每1ml中含25μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备 取样品粉末(过三号筛)精密称定2g，置具锥形瓶中，精密加入50% 甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，冷却，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.4 线性关系的考察 精密量取没食子酸对照溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置10ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀注入液相色谱仪，测定。以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归，得标准曲线方程为y=238803x-32570，R2=0.9997，没食子酸在11.05～55.25 μg/ml范围内呈良好的线性关系。

2.5 阴性试验 按样品工艺制备缺余甘子的阴性对照品，按供试品溶液的制备方法操作，进样10μl，结果在HPLC图谱中，与余甘子相应位置上没有吸收峰，表明其他成分对余甘子测定干扰不明显。

2.6 精密度试验 精密量取同一对照品溶液( 25μg /ml)，重复进样5次，每次进样10μl，求得没食子酸RSD= 0.15 % 。

2.7 重现性试验 取同一批号(批号：201102024)样品5份，按样品处理方法平行提取并同法测定没食子酸的含量，RSD= 0.18 %，表明重现性良好。

2.8 稳定性 取同一批号(批号201102024)在配制2、4、8、12、24h后进行含量测定，重复测定5次，计算没食子酸峰面积，RSD为0.14%，表明在24h内稳定性较好。

2.9 回收率试验 精密称取供试品(批号：201102024)2g，制备供试品溶液，精取供试品溶液5.0ml，共7份，置10ml容量瓶中，第1，2份作为空白回收，其余5份分别加入浓度为0.1105mg /ml的没食子酸对照品溶液5.0ml，并进样10μl测定含量。结果没食子酸平均回收率为105.15%，RSD=1.6%；

样品的取样量样品中没食子酸的含量(mg)没食子酸对照品加入量(mg)实测总量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)2 22753 5510 55254 208104 652 23773 4990 55254 240105 912 23673 5570 55254 346102 55105 151 62 23523 4270 55254 254105 702 23523 5030 55254 336106 92

2.10 样品的含量测定 分别精密量取对照品溶液与供试品溶液10μl，依拟定色谱条件进行含量测定，结果批号为201102024，201104018，201201020的样品中含量平均为3.438mg，RSD为0.5%。

3 讨论

余甘子是大戟科植物干燥成熟果实，是维吾尔医药中一味重要的药材。研究表明余甘子有免疫调节，解毒，防癌，抗诱变，抗致畸，抗炎，降血脂及抗动脉粥样硬化，抗氧化，抗衰老，保肝，抗溃疡，抗腹泻等作用。没食子酸作为一种有效成分，生长环境以及不同生长阶段对其含量有较大的影响。

用HPLC法测定驱白艾力勒思亚散中没食子酸的含量，取得了较为满意的结果，该方法灵明度、重现性较好，样品处理简单，为余甘子的质量评价提供了快捷、有效的检测方法。本品为复方制剂，药味复杂，本文供试品溶液的制备及波长的选择均参照《中国药典》2010年版一部中“余甘子”含量测定项下的方法和条件。笔者结合给样品的特点对供试品的提取条件进行了考察，药典规定要求含量测定用50%甲醇回流提取一个小时，为了省事省时间采用超声处理方法。同一提取方法测定同一样品，超声提取时间分别为30，40，60min,结果含量基本相同，所以使用30min超声提取。

[1]国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部)[M]．北京：中国医药科技出版社，2010．

[2]国家药典委员会．中华人民共和国卫生部药品标准(维吾尔药分册)[S]．乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1999，111．

ObjectiveTo determinate the contents of pyrogallic acid in Qubai Aililesiya powder.MethodAn HPLC method was used and Pheomenex luna C18 was selected (250×4.60mm×5micron), a column temperature was 35℃, methyl alcohol-0.2% Phosphoric acid (5∶95) were mobile phase, the detecting wavelength and velocity were 273 nm and 1.0ml/min respectively.ResultsThere were established a good linear relation between 11.05～55.25 μg/ml of pyrogallic acid, r= 0.9994, the average recovery was 105.15 %, RSD was 1.6 %.ConclusionThe methods had the advantages of simple and easy operation, sensitive and accurate and exhibited a good separation effect. The methods were can be used to determination of contents and quality control of the fructus phyllanthi.

Qubai Aililesiya powder; HPLC; pyrogallic acid Content determinatio

R29；R284.1

A

1007-8517(2014)08-0004-02

2014.02.10)