复方太子参片质量标准研究

胡卫东汪涛高永喜赵雁平曾凡波

(1.解放军武汉疗养院，430074；2.华中科技大学同济医学院药学院，430030)

复方太子参片质量标准研究

胡卫东1汪涛1高永喜1赵雁平1曾凡波2

(1.解放军武汉疗养院，430074；2.华中科技大学同济医学院药学院，430030)

目的 建立复方太子参片的质量控制方法。方法 用TLC法对太子参、桔梗进行定性鉴别；HPLC法测定复方太子参片中所含淫羊藿苷的量，选用Kromasil C18色谱柱，流动相为乙腈-1%醋酸(21∶79)，检测波长270 nm。结果 TLC检出了太子参、桔梗特征斑点，淫羊藿苷进样量在0.211～1.055μg范围内呈良好的线性关系(r＝0.999 9)，加样回收率为99.41%，RSD为1.24%。结论 质量控制方法简便、稳定、可靠，可作为本品的质量控制方法。

复方太子参片；质量标准；高效液相色谱法；薄层色谱法

复方太子参片为解放军武汉疗养院研制开发的纯中药制剂，于2011年取得军队医疗机构制剂临床研究批准文号：广L2011003，具有扶正固本、镇咳平喘、清热解毒的作用。用于治疗慢性支气管炎、过敏性支气管炎、老年性慢性支气管炎引起的咳嗽、咳痰及哮喘等症。为更好地控制产品质量，对太子参、桔梗两味药材进行了薄层色谱鉴别，并采用高效液相色谱法(HPLC)对方中淫羊藿苷进行了含量测定，为该制剂建立完善的质量标准提供了依据。现总结如下。

1 仪器与试药

日本岛津LC-20A高效液相色谱仪(SPD-M20A紫外-可见光检测器，SIL-20AC自动进样器，CTO-20AC柱温箱)；电子天平(CP225D，1/10万)；KQ-500B型超声波清洗器(江苏省昆山市超声仪器有限公司)。

淫羊藿苷对照品(批号：110737-200312)由中国药品生物制品检定所提供。复方太子参片(批号为：130123、130214、130321)由解放军武汉疗养院提供。硅胶H薄层板、硅胶G薄层板均由青岛海洋化工厂分厂提供。乙腈(色谱纯，美国Fisher公司)；水为纯水机净化水(纯水机型号Millipore Milli-Qbiocel型纯水器)。其余试剂均为分析纯。

2 薄层色谱鉴别

2.1 太子参 取本品5片，研细，加甲醇20 mL，温浸，振摇30 min，滤过，滤液浓缩至1 mL，作为供试品(样品)溶液。另取太子参对照药材1 g，同法制成对照品溶液。再取缺太子参的模拟片20片，按供试品(样品)溶液制备法制备阴性液。照薄层色谱法[1]附录(Ⅵ B)34试验，吸取上述3种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶1)为展开剂，置用于展开剂预饱和15 min的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以0.2%茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.2 桔梗 取本品5片，研细，加7%硫酸乙醇-水(1∶3)混合液20 mL，加热回流3 h，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，20 mL/次，合并三氯甲烷液，加水洗涤2次，30 mL/次，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为共试品(样品)溶液。另取桔梗对照药材1 g，同法制成对照品溶液。再取缺桔梗的模拟片20片，按供试品(样品)溶液制备法制备阴性液。照薄层色谱法[1]附录(Ⅵ B)34试验，吸取上述3种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

3 淫羊藿苷的含量测定

3.1 色谱条件 色谱柱：Kromasil C18柱；流动相：乙腈-1%醋酸(21∶79)；流速：1 mL/min；检测波长：270 nm；柱温：室温；进样量：10μL。

3.2 溶液的制备

3.2.1 供试品溶液 取复方太子参片10片，研磨成细粉，精密称取粉末0.5 g，置25 mL量瓶中，加入甲醇适量，超声10 min，放冷后补加甲醇至刻度，摇匀滤过，取续滤液经0.45μm微孔滤膜滤过即得。

3.2.2 对照品溶液 精密称取淫羊藿苷对照品适量，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解，摇匀，即得浓度为0.103 7 mg/mL的对照品溶液。

3.2.3 阴性对照溶液 按处方组成，制备不含淫羊藿的阴性模拟制剂，按上述供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

3.3 系统适用性试验 取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μL，按上述色谱条件分别进样测定，结果(图1)。由图可见，淫羊藿苷峰保留时间约17.2 min，阴性对照溶液在淫羊藿苷峰位置无干扰峰，淫羊藿苷峰与其他组分可完全分离。理论塔板数按淫羊藿苷计算不低于1 500。

3.4 线性关系考察 分别精密量取0.103 7 mg/mL的淫羊藿苷对照品溶液2、3、6、8、10 mL至10 mL量瓶中，以甲醇定容得0.211 0、0.312 8、0.625 7、0.084 1、0.105 5μg/μL淫羊藿苷溶液，各取10μL进样测定，以峰面积为纵坐标Y，淫羊藿苷的量(μg)为横坐标X，绘制标准曲线[2]。得回归方程：Y＝3 578.6X＋2.276 5，r＝0.999 9。结果表明淫羊藿苷在0.211～1.055μg范围内线性关系良好。

图1 HPLC色谱图

3.5 精密度试验 精密吸取淫羊藿苷对照品溶液10 mL，重复进样6次，得峰面积的RSD为0.65%，说明仪器的精密度良好[3]。

3.6 重复性试验 按供试品测定方法测定，对同一批样品(批号：130214)重复测定6份。结果复方太子参片的平均含量为11.2 mg/g，RSD为0.60%，表明方法的重复性良好[4]。

3.7 稳定性试验 取供试品溶液(批号：130214)，分别于配制后0、2、4、8、16、24 h依样品测定法测定，记录色谱图。结果淫阳藿苷峰面积的RSD为1.87%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

3.8 加样回收率试验 精密称取6份已知含量的同一批号(复方太子参片，批号：130214)样品0.1 g，精密加入淫羊藿苷对照品(0.103 7 mg/mL)5、6、7 mL，按3.2.1项下的方法制备供试品溶液，进样测定，计算回收率。结果(表1)表明方法可行[5]。

表1 加样回收率试验结果

3.9 样品测定 精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 mL，注入液相色谱仪中，按外标一点法以峰面积测得3批样品中淫羊藿苷的平均含量为11.2 mg/片，结果(表2)。暂定复方太子参片中淫羊藿苷的含量不低于10.9 mg/片。

表2 样品测定结果

4 讨论

采用薄层色谱法对复方太子参片中太子参、桔梗两味药材进行鉴别，并采用高效液相色谱法对方中淫羊藿所含淫羊藿苷进行含量测定，淫羊藿为复方太子参片中的主药之一，主要有效成分为淫羊藿苷，故选择它作为本制剂的含量测定指标成分。对淫羊藿苷对照品溶液在紫外分光光度仪上进行全波长扫描，结果在270 nm处有最大吸收。本方法简便，专属性、重复性好，且结果稳定，可用于复方太子参片的质量控制。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[Z].北京：中国医药科技出版社，2010.

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[3]王元有，王正俊.仙灵骨葆颗粒的质量标准研究[J].工业经纬，2008，5(2)：44-47.

[4]黄丹莹，李惠敏.抗骨增生片质量标准的研究[J].中成药，2010，32(6)：1073-1076.

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1005-619X(2014)01-0023-02

2013-08-21)