龙藤筋骨片对小鼠肝肾功能影响的实验研究

李飞胡卫东李卫兴刘朝华汪涛曾凡波

(1.中国人民解放军武汉疗养院，430074；2.华中科技大学同济医学院药学院，430030)

龙藤筋骨片对小鼠肝肾功能影响的实验研究

李飞1胡卫东1李卫兴1刘朝华1汪涛1曾凡波2

(1.中国人民解放军武汉疗养院，430074；2.华中科技大学同济医学院药学院，430030)

目的 观察龙藤筋骨片对小鼠肝肾功能的影响。方法 通过灌胃给小鼠l d内最大质量浓度及最大体积的药量，连续用药40 d，观察动物一般行为、进食量变化、体质量变化及肝、肾脏体比和肝肾功能改变。结果 龙藤筋骨片用药后，除小鼠进食量减少、精神较差外，龙藤筋骨片对血清TP、ALB、AST、ALT、UA、BUN、Cr未见明显影响。结论 龙藤筋骨片在较大剂量连续用药后对小鼠肝肾功能未见明显影响。

龙藤筋骨片；肝肾功能；小鼠

龙藤筋骨片(原名783片)是一复方中成药制剂，由我院制剂室生产，批准文号：广制字(2011)F03001号，由牛膝、熟地、鸡血藤、骨碎补、独活、羌活、地龙、海桐皮组成，用于补肾活血、通络止痛、散寒除湿。主治肥大性关节炎、骨质增生、腰椎间盘突出、坐骨神经痛、肩周炎、风湿性关节炎等。本实验是为了解龙藤筋骨片对小鼠肝肾功能的影响，以确保其食用安全。

1 材料与方法

1.1 样品 龙藤筋骨片由本院制剂室研制(规格：0.3 g/片，批号：110602)。实验时以去离子水将受试药物配成所需浓度的药液供灌胃给药，使各剂量组给药体积相等。

1.2 动物 清洁级昆明种小鼠，体质量(20±2)g，雌雄各半，华中科技大学同济医学院实验动物中心提供[许可证号：SCXK(鄂)2008-010]。动物雌雄各半分笼群养，每笼5只，饲以华中科技大学同济医学院实验动物中心生产的鼠用颗粒饲料，自由饮水。环境温度为(22±2)℃，相对湿度为(65±5)%。

1.3 试剂和仪器 谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)试剂盒，四川迈克生物科技股份有限公司提供(批号分别为：0711061、0611041、0211011、0211011、0711051、0711071、0811061)；主要仪器：7020型全自动生化分析仪(日本日立公司)，MP120-2型电子天平，上海第二天平仪器厂。

1.4 方法 取小鼠80只，按性别随机分为4组，每组雌雄各10只；实验前禁食12 h，正常饮水。龙藤筋骨片的人用剂量为：5片/次，3次/d，总剂量为4.5 g/d。以体质量计算，人剂量为0.075 g/(kg·d)，按人体推荐用量5、10和20倍，设3个剂量组为0.375、0.75和1.5 g/(kg·d)，空白对照组用等体积蒸馏水灌胃，连续灌胃40 d，给药期间每天观察小鼠的体质量、外观、行为、四肢活动、进食、排泄物、死亡等情况，并详细记录。最后1次给药后，禁食，并于尾端约0.5 cm处断尾采血约0.3 mL，做肝肾功能检测，同时取肝肾做肉眼及组织病理学检查。

1.5 统计学处理 实验数据以SPSS 17.0计算机软件进行统计分析，计量资料以均值±标准差(±s)表示，用药前后各项指标比较采用配对t检验。

2 结果

2.1 龙藤筋骨片对小鼠体质量变化及肝、肾脏体比的影响(表1) 给药期间及停药观察期间，各组小鼠的外观、行为、呼吸、四肢活动、进食、排泄均未见明显异常；无水肿；无中毒死亡现象。各剂量组小鼠体质量增长以及肝、肾脏体比与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.2 龙藤筋骨片对小鼠肝肾功能的影响(表2) 龙藤筋骨片3个剂量组小鼠的肝功指标(TP、ALB、AST、ALT)，肾功指标(UA、BUN、Cr)与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

表1 龙藤筋骨片对小鼠体质量变化及肝、肾脏体比的影响

表2 龙藤筋骨片对小鼠肝肾功能的影响

2.3 病理组织学检查结果 龙藤筋骨片各剂量组小鼠肝、肾组织表面平整光滑、色泽鲜红、质软未发现明显的病变，各项生化指标未改变。因此仅对高剂量组和空白对照组做病理组织学检查。镜检结果：龙藤筋骨片高剂量组小鼠肝小叶结构正常，未见肝细胞变性、坏死；未见小叶中央静脉周围炎细胞浸润，汇管区未发现炎细胞浸润。肾组织结构正常，未见肾小球毛细血管充血、肾小球纤维化、肾间质及肾盂炎细胞浸润、移行上皮细胞及纤维组织增生等现象。

3 讨论

龙藤筋骨片由独活、羌活、当归、牛膝、鸡血藤、熟地、骨碎补、地龙、海桐皮组成。独活入膀胱、肾经、去风胜湿，散寒止痛。药理研究，独活可扩张血管，减少渗出，有镇痛抗炎作用[1]1705。羌活能解热镇痛、抗炎，增加脑血流量，缓解上焦疼痛和抗凝[2]。当归入肝、心、脾经，补血，治血虚痿痹。当归和其有效成分可通过抑制肝组织细胞脂质过氧化反应，保护肝细胞器和酶结构，对多种原因引起的肝损伤有明显的保护作用[3]。牛膝入肝、肾经，补肝肾，强筋骨，活血去瘀，治腰膝骨痛，四肢拘挛。药理研究认为，牛膝通过扩张下肢血管，改善血液黏度和微循环，起到消肿的治疗作用。鸡血藤入肝、肾经，活血舒筋，治疗腰膝酸痛，麻木瘫痪。鸡血藤可促进机体红细胞生成素分泌、成熟和释放，以补充破坏和死亡的红细胞，维持红细胞相对稳定而发挥补血作用[4-5]。熟地入心、肝、肾经，滋阴补血，治阴虚血少，腰膝痿弱[1]2626。骨碎补入肾、心经，补肾，活血，治肾虚腰痛，风湿痹痛[1]1659，骨碎补中的总黄酮具有较强的抗膝骨关节炎作用[6]。地龙入肝经、肺经、膀胱经，清热熄风，平肝降压，清络通痹，清肺平喘，利尿通淋[7]。海桐皮入肝、脾经，祛风湿，通经络，治风湿痹痛。

临床关于壮骨关节丸造成肝损害的报道，以血清碱性磷酸酶的显著升高为特征，严重者有黄疸、肝脏肿大[8-9]。引起肝毒性的药材，主要是乳香、没药、补骨脂[10]。本实验显示，龙藤筋骨片安全有效，无肝脏、肾脏功能的损害。

[1]南京中医药大学.中药大辞典[M].上海：上海科学技术出版社，2006.

[2]马玉林，李建民，马莉，等.药用植物羌活的研究进展[J].安徽农业科学，2010，38(24)：13092-13093.

[3]张新春，蔡大伟.当归及其有效成分对实验性肝损伤的保护作用[J].中国医院药学杂志，2008，28(9)：739-741.

[4]罗霞，陈东辉，余梦瑶，等.鸡血藤煎剂对小鼠红细胞增殖的影响[J].中国中药杂志，2005，30(6)：479.

[5]陈从显，徐爱钰，许勇，等.鸡血藤总黄酮对小鼠急性肝损伤的保护作用[J].滨州医学院学报，2012，35(3)：189-191.

[6]龚晓健，李运曼，安佰平，等.骨碎补总黄酮的抗膝骨关节炎作用[J].中国天然药物，2006，4(3)：215-218.

[7]单彪，武金霞，张瑞英，等.地龙的药理作用研究进展[J].医学研究与教育，2009，26(6)：77-80.

[8]程经华，蔡皓东.壮骨关节丸不良反应原因分析[J].药物不良反应杂志，2000，2(1)：18.

[9]国家食品药品监督管理局.警惕壮骨关节丸引起的肝损害[J].中国社区医师，2009(8)：21.

[10]周昆，代志，柳占彪，等.壮骨关节丸中肝毒性药材的筛选研究[J].中国药物警戒，2009，6(11)：641，647.

Objective To study the influence of Longtengjingu tablets on hepatic and renal function of mice.Methods The mice were given a gavage of the maximum mass concentration and the maximum volume of longtengjingu tablets for continuous 40 days.During the experimental period，these mice were kept under close observation on the general behavior，the quantity change of food in-take，body weight change，proportion of liver and kidney to the body，index and the changes of hepatic and renal function.Results A fter taking longtengjingu tablets，the m ice showed no significant effects on the serum levels of TP，ALB，AST，ALT，UA，BUN and Cr except reduced food-intake and poormind performance.Conclusion Longtengjingu tablets has no significant effects on hepatic and renal function even when used in a large dosage for a continuous period of time.

Longtengjingu tablets；Hepatic and renal function；M ice

1005-619X(2014)01-0006-02

2013-06-14)