辣萝卜干中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定分析研究

赵晶　张爱琳

摘要 [目的]了解宁河县酱腌菜辣萝卜干中防腐剂和甜味剂的使用情况，加强食品添加剂的监测。[方法]通过薄层色谱法和高效液相色谱法对辣萝卜干中苯甲酸、山梨酸和糖精钠进行定性定量分析。[结果]分析表明，辣萝卜干中苯甲酸含量为0.590 4 g/kg，山梨酸含量为0. 309 8 g/kg，糖精钠含量为0. 090 8 g/kg，通过参考GB2760-2011《食品添加剂使用卫生标准》标准进行评价，样品辣萝卜干中苯甲酸、山梨酸和糖精钠均在限量使用范围內。[结论]研究可为酱腌菜生产企业采用食品添加剂提供一定的理论依据，保障消费者食用安全、健康、放心。

关键词 食品防腐剂；薄层色谱；高效液相色谱；辣萝卜干

中图分类号 S609.9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）20-06776-03

Analysis and Detection of Benzoic Acid， Sorbic Acid and Saccharin in Dried Radish Pickles

ZHAO Jing，ZHANG Ailin

（Ninghe Product Quality Supervision and Inspection， Tianjin 301500；College of Food Science and Biotechnology，Tianjin Agricultural University，Tianjin 300384）

Abstract [Objective] To understand the use of preservatives and sweetener in dried radish pickles and strengthen the monitoring of food additives. [Method] The benzoic acid， sorbic acid and saccharin sodium was analyzed in qualitative by means of the thin layer chromatography （TLC） and high performance liquid chromatography （HPLC） methods for spicy dried turnip. [Result] The results showed that the Benzoic acid content is 0.590 4 g/kg， sorbic acid content is 0.309 8 g/kg， saccharin sodium content is 0. 090 8 g/kg， by reference to the hygienic standards of using food additives GB2760-2011 standard to evaluate， benzoic acid， sorbic acid and saccharin sodiumin in the sample spicy dried turnip are within the scope of limited use. [Conclusion] The results could provide a safe use quantity standard for manufacturers and need to strengthen the supervision and monitoring， to ensure the health and safety of consumers in the future.

Key words Food preservatives； TCL； HPLC； Dried radish pickles

辣萝卜干是一种独具风味、具有悠久历史的食品，传统萝卜干利用食盐腌渍及添加适量的防腐剂来保鲜防腐[1]。由于部分加工企业通过加大防腐剂和糖精钠的使用量来抑制产品中的微生物，改善风味和适口性，以延长其保存期，这也造成防腐剂和糖精钠的超标问题[2]。长期的研究表明，化学合成防腐剂和甜味剂存在致癌性、致畸性和易引起食物中毒等问题，已引起了人们的高度关注[3]。近年来，一系列由食品防腐剂使用不当造成的安全事件层出不穷，已给人们敲响了警钟，因此，食品防腐剂的安全性及检测方法已成为公众和行业共同关注的焦点[4]。目前，在食品工业中常用的酸性防腐剂大多为苯甲酸和三梨酸，甜味剂为糖精钠。同时测定食品中多种防腐剂的技术，即食品防腐剂的同时检测技术已逐渐成为目前防腐剂检测领域新的研究点[5]。笔者针对辣萝卜干中常见的防腐剂和甜味剂超标问题，采用薄层色谱和反相高效液相色谱法相结合对辣萝卜干腌菜中常用的防腐剂和甜味剂同时进行测定，探讨一种高效、便捷的测定方法，同时也为酱腌菜企业采用食品添加剂提供理论依据，保障消费者食用安全、健康、放心。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1

样品来源。 辣萝卜干来自宁河县超立食品厂。

1.1.2

主要试剂。标准品：苯甲酸、山梨酸、糖精钠，均为分析纯，含量>99.0%，天津科密欧。

试剂：甲醇、乙醇、乙腈，均为色谱纯，含量为99.9%，上海国药集团；乙酸铵、乙酸锌、乙醚、石油醚、氢氧化钠、亚铁氰化钾、正丁醇、氨水、无水乙醇等化学试剂，均为分析纯，天津科密欧；瓶装纯净水，娃哈哈；蒸馏水，实验室制备；甲醇，色谱纯。薄层板：为聚丙烯酰胺板，购自天津为科生物技术有限公司。

1.1.3

仪器及色谱条件。安捷伦1200高效液相色谱仪，PDA100光电二极管阵列检测器紫外检测，ZORBAX Eclipse XDBC18（4.6×150 mm，5 μm）色谱柱；流动相：甲醇+乙酸铵 （5+95），流速 1 ml/min，检测波长230 nm，进样量10 μl；吹风机，层析缸，玻璃毛细管。

1.2 检测方法和评价标准

薄层色谱法，参考中国轻工业出版社《食品分析》中的方法加以改进进行测定[6]。GB/T 23495-2009 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定高效液相色谱法进行定量测定；按照GB2760-2011《食品添加剂使用卫生标准》（ 苯甲酸≤1.0 g/kg，山梨酸≤1.0 g/kg，糖精钠≤0.15 g/kg） 进行评价。

1.3 标准溶液的配置

①苯甲酸标准储备液：准确称取0.236 0 g苯甲酸鈉，加水溶解并定容至200 ml。此溶液1 ml相当于含苯甲酸1.00 mg。

②山梨酸标准储备液：准确称取0.268 0 g山梨酸钾，加水溶解并定容至200 ml。此溶液1 ml相当于含山梨酸1.00 mg。

③糖精钠标准储备液：准确称取0.170 2 g糖精钠，加水溶解并定容至200 ml，此溶液中糖精钠的含量为1.00 mg。

④混合标准使用液：分别准确吸取不同体积苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准储备液，将其稀释成苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量为0、0.020、0.040、0.080、0.100、0.200、0.300 mg/ml混合标准使用液。⑤展开剂：正丁醇∶氨水∶无水乙醇=7∶2∶1；

显示剂：溴甲酚紫-乙醇（50%）溶液（0.4 g/L），用氢氧化钠溶液（4 g/L）调至pH为8。

1.4 样品的处理

称取辣萝卜干2～3 g（精确至0.001 g）于研钵中研碎，用20 ml水分数次清洗转移至25 ml容量瓶中，加0.5 ml盐酸（1+1）酸化，用15、10 ml乙醚提取2次，每次振摇1 min，将上层醚提取液吸入另一个25 ml带塞量筒中，合并乙醚提取液。用3 ml氯化钠酸性溶液（40 g/L）洗涤2次，静止15 min，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入25 ml容量瓶中，加乙醚至刻度，混匀。吸取10.0 ml乙醚提取液分2次置于10 ml带塞离心管中，在约40 ℃的水浴上挥干，加入0.10 ml乙醇溶解残渣，移入离心管中，4 000 r/min离心5 min，吸取上清液，用微孔滤膜过滤，备用。

1.5 结果计算

薄层色谱的计算公式：

2 结果与分析

2.1 聚丙烯酰胺薄层色谱对苯甲酸和山梨酸的定性分析

从图1可知，由2个薄层板对照显色，可以定性判定辣萝卜干中含有防腐剂山梨酸钾和苯甲酸钠，在该试验条件下苯甲酸和山梨酸的比移值分别为0.50和0.52，以斑点面积的大小不能够准确定性，所以采用液相色谱进行定量分析。

2.2 外标法绘制单一组分标准曲线

从图2可知，采用外标法对山梨酸、苯甲酸和糖精钠进行色谱分析，线性关系良好，山梨酸标准曲线方程为Y=58 093.88X-120.39，相关系数为0.999 6，残留标准误差为205.47；苯甲酸标准曲线方程为Y=34 186.01X-358.57，其相关系数为0.997 6，残留标准误差为279.65；糖精钠标准曲线方程为Y=18 565.36X-18.94，相关系数为0.999 9，残留标准误差为13.13。

2.3 混合标准液RPLC测定分析

吸取10 μl混合标准应用液注入色谱仪中，根据保留时间定性，外标峰面积法与标准比较定量。苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准品色谱见图3。从图3 可知，苯甲酸保留时间为4.708 min，山梨酸保留时间为6.647 min，糖精钠保留时间为8.822 min。

2.4 辣萝卜干样品RPLC测定

吸取10 μl 辣萝卜干净化液注入色谱仪中，根据保留时间定性，外标峰面积法与标准比较定量分别计算出苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量，样品图谱见图4。

根据图4各组分含量，代入公式，计算出在辣萝卜干中苯甲酸的含量为0.590 4 g/kg，山梨酸含量为0.309 8 g/kg，糖精钠含量为0.090 8 g/kg。样品结果按照GB2760-2011《食品添加剂使用卫生标准》对苯甲酸、山梨酸和糖精钠的使用限量（MRL）进行评价国标限量，该辣萝卜干中防腐剂苯甲酸钠、山梨酸和糖精钠均在合理使用范围。

图4 辣萝卜提取液色谱

3 结论

薄层色谱法能够快速简便地判定样品中是否含有食

品防腐剂，这为防腐剂的初筛提供了方便，再通过反相液相色谱能检测多种防腐剂和甜味剂，线性关系良好。从随机抽样检测结果来看，生产商同时使用了苯甲酸和山梨酸来对辣萝卜干防腐保鲜，使用糖精钠提升适口性，其含量均在使用限量内。

有的厂家为保持产品的鲜度，超量使用防腐剂情况令人担忧，尤其是夏季对于散装酱腌菜中苯甲酸、山梨酸超标率较高，今后还需关注对苯甲酸、山梨酸的监测。甜味，适口性强，糖精钠作为成本较低的甜味剂和防腐剂一样都是由人工合成，企业为了改善食品的风味而过多地加入糖精钠，这些是造成防腐剂和糖精钠超标的主要原因。因此，食品卫生监督部门加大生产、流通各个环节监督力度，定期监测，以提高食品卫生质量，确保广大消费者的健康和安全。

参考文献

[1]

陈宇鸿，沈仁富，陈海红.酱腌菜中苯甲酸、山梨酸含量的检测结果分析[J].中国卫生检验杂志，2012，22（2）：336-337.

[2] 鞠福龙，李春娟，李东刚.气相色谱-质谱联用法同时检测调味品7种防腐剂[J].中国调味品，2009，34（10）：79-81.

[3] 王向阳，管佳.天然防腐剂对萝卜干腐败微生物的控制研究[J].中国调味品，2008，357（10）：34-36.

[4] 朱晓囡，苏志国.反相液相色谱在蛋白质及多肽分离分析中的应用[J].分析化学，2004，32（2）：248-254.

[5] 曾亚丽.果汁饮料中防腐剂的检测[J].农产品加工·学刊，2010，217（8）：108-109.

[6] 华南农业大学.食品分析[M].北京：中国轻工业出版社，2008.