IGF-1、Survivin在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及相关性分析

庞 蕾，胡海霞，李 伟※

(1.尚义县医院妇产科，河北 尚义 076750； 2.中国人民解放军251医院病理科，河北 张家口 075000)

宫颈癌是第二位最常见的女性恶性肿瘤，其以鳞状细胞癌最常见，占60%～80%[1]。肿瘤细胞的形成是细胞失控性、无限性增殖的表现，这一过程是多种细胞因子、多种基因共同参与的结果。胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)被认为与组织细胞的增殖、分化、凋亡关系密切，而生存蛋白(Survivin)是迄今发现的作用最强的凋亡抑制因子[2-3]，但两者在宫颈鳞状细胞癌组织中的研究少见。本研究主要探讨IGF-1、Survivin在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及其与宫颈鳞状细胞癌的临床病理特征的关系和两者的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2009年1月至2012年2月尚义县医院收治的经临床病理医师诊断为宫颈鳞状细胞癌的患者75例、宫颈上皮内瘤变患者35例、慢性宫颈炎患者30例，将其不同疾病列为三组。宫颈鳞状细胞癌患者年龄29～66(47±1)岁，年龄<47岁者49例，≥47岁者26例；肿瘤直径<3 cm者6例，≥3 cm者69例；宫颈上皮内瘤变患者年龄27～59(41±2)岁。慢性宫颈炎患者年龄26～57(40±4)岁。组织学类型分类[4]：角化型20例、非角化型50例、小细胞型5例。根据国际妇产科联盟(FIGO)2000年修订的宫颈肿瘤TNM分期标准：Ⅰ期11例，Ⅱ期19例，Ⅲ期25例，Ⅳ期20例。淋巴结有转移者54例，无转移者21例。远处转移者25例，无远处转移者50例。癌细胞增殖指数(Ki-67)≥75%者68例，<75%者7例；癌细胞p53阳性者61例，阴性者14例。所有患者术前均未接受放化疗。

1.2主要试剂和方法 即用型鼠抗人IGF-1单克隆抗体、即用型兔抗人Survivin多克隆抗体及相关配套试剂均由福州迈新生物技术有限公司提供。染色采用免疫组织化学法(EnVisionTM)，步骤参照检测试剂盒说明书进行。用已知阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。

1.3判断标准 IGF-1着色以细胞质出现棕黄色颗粒染色为阳性，应用阳性细胞百分比法进行结果整理。阴性：阳性细胞<1%；弱阳性(+)：阳性细胞2%～25%；中度阳性(++)：阳性细胞26%～50%；强阳性(+++)：阳性细胞>51%[5]。Survivin以细胞质呈现棕黄色颗粒染色为阳性，显微镜下随机选择10个有代表性的视野，计算阳性细胞占镜下细胞的百分比，其比值>10%为阳性表达[6]。

1.4统计学方法 应用SPSS 17.0统计软件进行数据处理，计数资料采用χ2检验，相关性分析采用Spearman检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1IGF-1、Survivin在宫颈病变组织中的表达 IGF-1在慢性宫颈炎组织的胞质和胞核中均未着色，显示为阴性(图1，见封三)，而在宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞状细胞癌组织病变中的肿瘤细胞质呈现棕黄色颗粒，显示为阳性(图2、3，见封三)。Survivin在慢性宫颈炎组织无胞质着色，显示为阴性(图4，见封三)，而在宫颈上皮内瘤变组织、宫颈鳞状细胞癌组织病变中的肿瘤细胞质呈现棕黄色颗粒，显示为阳性(图5、6，见封三)。IGF-1在宫颈鳞状细胞癌组织、宫颈上皮内瘤变组织、慢性宫颈炎组织中阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.01)，IGF-1在宫颈鳞状细胞癌组织中阳性表达率高于宫颈上皮内瘤变组织和慢性宫颈炎组(χ2=3.89，P<0.05；χ2=25.67，P<0.01)。Survivin在宫颈鳞状细胞癌组织宫颈上皮内瘤变组织、慢性宫颈炎组织中阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.01)，Survivin在宫颈鳞状细胞癌组织中阳性表达率高于宫颈上皮内瘤变组织、慢性宫颈炎组织(χ2=6.40，P<0.05；χ2=22.46，P<0.01)(表1)。

图1 图2 图3

图4 图5 图6

表1 IGF-1、Survivin在宫颈病变组织中的阳性表达 [例(%)]

2.2IGF-1、Survivin的表达与宫颈鳞状细胞癌临床病理因素的关系 在宫颈鳞状细胞癌相关临床病理因素中，IGF-1的表达与肿瘤大小、淋巴结转移、远处脏器转移、FIGO分期有关，差异均有统计学意义(P<0.05)，与年龄、组织学类型、增殖指数(Ki-67)、p53无关，差异均无统计学意义(P>0.05)；Survivin的表达与淋巴结转移、远处脏器转移、FIGO分期、p53有关，差异均有统计学意义(P<0.05)，与肿瘤大小、年龄、组织学类型、增殖指数(Ki-67)无关，差异均无统计学意义(P>0.05)(表2)。

表2 IGF-1、Survivin的阳性表达与宫颈鳞状细胞癌临床病理因素的关系 [n=75，例(%)]

2.3宫颈鳞状细胞癌组织中IGF-1与Survivin表达的相关性 在75例宫颈鳞状细胞癌组织中，IGF-1阳性而Survivin阴性者3例，IGF-1阴性而Survivin阳性者5例，两者均为阳性、阴性者分别为40例、27例，经Spearman相关性检验分析显示，两者呈显著正相关(rs= 0.78，P<0.01)(表3)。

表3 宫颈鳞状细胞癌组织中IGF-1与Survivin表达的相关性 (例)

3 讨 论

IGF-1是IGFs家族的成员之一，主要由肝细胞合成、分泌，肝外组织也可分泌IGF-1，主要功能有降血糖、促物质代谢、促进细胞分裂及细胞增殖等。唐泓波等[7]研究IGF-1基因缺失小鼠(LID小鼠)乳腺癌模型发现，LID小鼠与正常小鼠相比，肿瘤潜伏期延长、发生率降低、瘤体生长缓慢、肿瘤细胞凋亡比例升高，提示血清低IGF-1对乳腺癌的发生有抑制作用。也有资料显示，男性血清中IGF-1水平升高可提示发展成前列腺癌的风险升高[8]。本研究资料显示，IGF-1在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞状细胞癌组织中的表达率分别为3.33%、37.14%、57.33%，表明IGF-1的表达随着宫颈病变的发展而不断的升高，推测IGF-1的高表达预示着宫颈癌发生的可能性增大。同时本研究还发现，IGF-1的阳性表达率与肿瘤大小、FIGO分期、淋巴结转移、远处脏器转移有关。IGF-1蛋白在淋巴结转移组或远处脏器转移组中的表达显著高于无淋巴结转移组或远处脏器转移组，显示IGF-1的高表达预示着肿瘤转移的可能性增大。

人类Survivin基因位于染色体17q25，全长14.7 kb，由3个内含子和4个外显子组成，其编码产生的蛋白由142个氨基酸组成。在正常状态下，Survivin仅在少数组织中表达，如胎盘、胚胎、睾丸、胸腺等。但在病理状态下，Survivin过表达于乳腺癌、非小细胞肺癌、胃癌、食管癌等多种恶性肿瘤组织中，且Survivin在恶性病变组织中的表达远远高于良性病变组织，其过度表达被认为是恶性度增高及预后不良的重要指标[9-11]。本研究结果表明，Survivin在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞状细胞癌组织中的表达率分别为6.67%、31.43%、60.00%，随着宫颈病变严重程度的升高Survivin的表达逐渐增高，进一步证实Survivin参与了宫颈病变的演变过程。在宫颈鳞状细胞癌临床病理因素中，Survivin的阳性表达与FIGO分期、淋巴结转移、远处脏器转移、p53有关，说明Survivin在癌组织中表达越强，癌细胞的生存能力越高，进而为癌细胞浸润转移创造条件，其机制可能是与Survivin有效地维持微小血管网的结构，抑制胱天蛋白酶的凋亡，促进血管内皮生长因子的内皮细胞保护功能有关。

本研究Spearman相关性检验分析显示，IGF-1与Survivin在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达呈正相关，提示两者存在一定程度的相互协调作用，共同促进了肿瘤细胞抗凋亡的能力，但两者相互作用的机制或信号通路以及与肿瘤细胞耐药的关系还有待进一步研究。总之，IGF-1、Survivin在宫颈癌中表达越高，则预示着癌细胞浸润转移的能力越强。

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