心脑血管疾病患者的载脂蛋白E基因多态性与血脂水平相关性

李 婷 杨兰辉 穆剑强 张 婷

（云南省红河州第一人民医院，云南蒙自661199）

论著／冠心病

心脑血管疾病患者的载脂蛋白E基因多态性与血脂水平相关性

李 婷 杨兰辉 穆剑强 张 婷

（云南省红河州第一人民医院，云南蒙自661199）

目的 探讨心脑血管疾病患者的载脂蛋白E（apoE）基因多态性同自身血脂水平的相关性。方法 采用聚合酶链反应酶切技术以及血脂检测技术分别对心脑血管疾病患者（观察组）和对照组健康人群进行研究，对两组人群中心脑血管疾病出现率和血脂水平同apoE基因多态性的相关性进行分析。结果 两组人群中apoE基因多态性的分布不同，对照组中载脂蛋白E3等位基因所占比例高于观察组，而观察组中E2和E4所占比例高于对照组，具有统计学差异（P＜0.05）。分析两组患者的血脂指标，携带E2等位基因的人群甘油三酯水平高于携带E3和E4的人群，携带E4等位基因的人群总胆固醇水平高于携带E3和E2的人群。结论 心脑血管疾病患者中载脂蛋白E2及E4等位基因的比例较高，提示两者是导致心脑血管疾病高危因素之一，甘油三酯水平升高同E2等位基因具有相关性，而总胆固醇水平升高同E4等位基因具有相关性。

载脂蛋白E；聚合酶链反应；基因多态性；血脂

动脉粥样硬化是导致心脑血管疾病的高危因素,在国外的致死率达到了50%[1]，而我国的心脑血管疾病发病率也呈上升趋势。导致动脉粥样硬化的因素非常多，包括遗传因素、年龄因素、性别因素以及高血压和饮食习惯等。其中由遗传因素导致的血脂代谢紊乱同心脑血管疾病的发病率密切相关,临床研究证明载脂蛋白E基因（apoE）同脂质代谢异常具有紧密的相关性。本文对apoE基因多态性在心脑血管疾病患者和健康人群中的分布情况进行了分析，对apoE基因多态性同心脑血管疾病以及血脂水平的相关性进行了分析。

1 材料与方法

1.1 一般资料

我院在2012年9月-2013年9月共收治139例心脑血管疾病患者，临床均得到确诊，疾病类型包括脑梗死、脑梗死合并脑出血、脑梗死合并高血压、脑梗死合并冠心病等，将患者设为观察组；选择116例健康人群作为对照组，对照组和观察组的年龄因素、性别因素等一般资料没有统计学差异（P＞0.05），具有可比性。

1.2 实验方法

1.2.1 apoE基因型检测 抽取3ml抗凝静脉血，使用低渗溶血以及酚/氯仿法提取白细胞中的基因组,进行沉淀和洗涤，干燥后放入TE缓冲液进行溶解，然后冻存备用。采用PCR引物对apoE基因特异片段进行扩增，扩增产物长度为244bp。采用酶切鉴定apoE的基因型：首先选择5m扩增产物，使用2%含量的琼脂糖凝胶电泳上对DNA片段进行检测，然后使用凝胶电泳自动成像仪进行观察和拍照。

1.2.2 血脂检测 采用酶法分别检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)；检测仪器为奥林巴斯5821全自动生化分析仪。

1.3 统计分析

使用统计软件SPSS17.0对数据进行统计学分析。采用t检验计量资料的组间比较结果，采用χ2检验分类资料的组间构成比，P＜0.05说明具有统计学差异。

2 结果

2.1 apoE基因多态性同心脑血管疾病的相关性

E3/3型比例在两组人群中的比例最高；观察组E2/3和E3/4所占比例高于对照组，而E3/3型低于对照组，比较具有统计学差异（P＜0.05），见表1。

2.2 apoE基因多态性同血脂之间的关系

通过对两组患者的血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）及HDL-C进行检测，结果显示观察组TC、TG 和HDL-C指标显著高于对照组，其中观察组患者中E4/4比例最高的其总胆固醇水平明显高于无E4/4的患者，而患者中E2/3比例最高的甘油三脂水平明显高于无E2/3的患者，比较具有统计学差异（P＜0.05）。见表2。

2.3 apoE基因多态性同心脑血管疾病的相关性分析

apoE不同基因型在脑出血、高血压、冠心病等脑梗死合并症患者中所占比例，E2/3、E3/4型所占比例均高于对照组人群，而E3/3型所占比例均低于对照组，而E3/3型在无合并症的患者中所占比例较高，比较结果具有统计学差异（P＜0.05）。见表3。

表1 对照组和观察组的apoE基因型的对比情况

表2 观察组患者不同apoE基因型之间的血脂指标对比

表3 apoE基因多态性同心脑血管疾病的相关性对比

3 讨论

载脂蛋白E(apoE)构成血浆脂蛋白的重要成分，主要通过肝脏合成，通常在低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)广泛存在。apoE基因多态性同许多疾病具有相关性，例如高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病以及脑卒中等[2]。通过采用聚合酶链反应(PCR)方法对人基因组DNA中的apoE片段进行扩增,然后在 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 (polyacrylamide gelelectrophoresis，PAGE)对apoE的基因型进行检测,通过对apoE基因多态性在心脑血管疾病患者及健康人群中的分布情况进行研究，并联合血脂和脂蛋白等多项指标，从而分析apoE基因多态性同心脑血管疾病、心脑血管合并症以及血脂水平之间的相关性。Chow dhury等通过分析147例心脑血管疾病患者、80例脑出血患者以及190健康人群，结果证明E3/4以及E4等位基因是导致脑血栓的高危因素，E2等位基因是导致脑出血的高危因素[3]。Kokub等研究证明E2和E4基因是导致脑血栓和脑出血的高危因素，并且同患者的年龄因素具有相关性。导致结果不一致性的因素是多方面的。首先引发心脑血管疾病的高危因素还有遗传因素、环境因素、年龄因素等其他因素共同作用；其次选择病例时，需要大量的样本才能完成更加深入的研究。尽管不同研究者的研究结果不尽相同，但apoE基因多态性是导致心脑血管疾病的高危因素已经普遍得到肯定。其致病原理是apoE基因多态性通过影响脂质代谢最终导致心脑血管疾病的发生，并对疾病的预后也起到相应的影响。ApoE能够调节脂质代谢，apoE不同类型的异构体对血浆脂质水平造成的影响有明显的差异。大部分研究认为，apoE多态性不会对HDL-C及apoA1起到明显的作用；E2不会对LD受体以及apoE受体产生亲和力，而E3和E4之间的亲和力没有显著差异；E2比例较高的个体其血脂变化为甘油三酯出现升高，E4比例较高的个体其血脂变化为总胆固醇出现升高但甘油三酯没有明显变化[4]。

本次研究发现：apoE基因分布情况，心脑血管疾病患者中，载脂蛋白E2和E4等位基因比例显著高于健康人群，E3等位基因比例显著低于健康人群，比较具有统计学差异（P＜0.05）；血脂变化方面，E2等位基因同甘油三酯水平升高具有相关性，E4等位基因同总胆固醇水平升高具有相关性，说明载脂蛋白E2 和E4基因是导致心脑血管疾病的高危因素。

［1］ 黄刚，袁刚，汪道文.载脂蛋白及其基因多态性与冠心病的关系[J].临床内科杂志，2008，21（02）：114-115.

［2］ 王永卿，吴婵娟，姚敏，张应爱，郑玲玲.黎族心脑血管疾病患者apoE基因多态性分析[J].检验医学，2012，18（04）：227-228.

［3］ 马娟，田青.血脂代谢相关基因与冠心病的关系[J].云南医药，2009，18（05）：178-179.

［4］ 王永卿，周凯玲，姚敏，符先先，郑青，钟祥旭.黎族心脑血管疾病患者载脂蛋白E基因多态性与血脂的关系[J].中国老年学杂志，2012，23（08）：376-377.

李婷，1977年生，女，汉族，红河蒙自人，主管技师，主要从事生化检验方面的工作。