微生物实验室检验质量控制结果分析

杨 梅

四川省达州市中西医结合医院检验科，四川达州 635000

微生物实验室质量控制主要分为实验室内以及室间质量控制两类，加强实验室内质量控制能够确保微生物检验的真实性以及准确性，而室间质量控制则可确保各实验室之间能够达到一致的检验质量水平，并及时发现实验室日常工作中存在的问题及不足之处，掌握实验室的检测能力。

1 材料与方法

1.1 材料

本组质控样品为市疾病预防控制中心所下发的微生物盲样菌种G007以及G109。

1.2 培养基以及试剂

本研究质量控制所用的培养及以及生化反应管均选自杭州天和微生物试剂有限公司，所用的，沙门菌属诊断学血清选自兰州生物制品研究所，均在有效期内。检测标准参照《食品卫生微生物学检验》（GB/T4789-2003）。

1.3 方法

1.3.1 细菌培养 在无菌操作条件下将盲样开启，并采用营养肉汤对冻干菌种进行溶解、复苏，并置于温度为37℃的培养箱中恒温培养约18～24 h，可见G007呈现浑浊生长，并有略微存在菌膜；同时，G109也呈现浑浊生长现象。

1.3.2 分离平板 分别取一环增菌培养物并将其接种在普通的营养琼脂平板、SS琼脂平板、血平板、EMB琼脂平板以及高盐甘露醇琼脂平板之上，并置于37℃的培养箱中恒温培养24 h。

观察结果：观察可见G007接种至高盐甘露醇琼脂平板之上未出现生长状况，在EMB以及SS琼脂平板之上可见无色透明的小菌落，且菌落呈湿润、光滑状；在普通营养琼脂平板上有两种菌落生长，菌落①是不透明的，其表面较为粗糙，且边缘不整齐，呈黄色和融腊状；菌落②是无色半透明状的，其边缘较为整齐，且呈湿润、光滑状，有隆起现象。取菌种①采用革兰氏染色成为G+大杆菌，可见卵圆形芽胞，菌体不突出。菌落②在EMB以及SS上生长出的菌落经革兰氏染色均表现为G-杆菌，经氧化酶试验结果呈阴性。

而G109在EMB以及SS琼脂平板上未出现菌落生长，在普通营养琼脂平板上有两种菌落生长，①为不透明菌落，表面较粗糙，且边缘不整齐，呈现黄色、融腊状；②为圆形突起菌落，菌落表面光滑，且为半透明、湿润状。菌落①经革兰氏染色呈现为G+大杆菌，可见卵圆形芽胞，菌体不突出；取高盐甘露醇以及营养琼脂平板上生长的菌落②进行革兰氏染色，结果均为G+球菌，且排列均呈葡萄串状。

1.3.3 生化试验以及血清学鉴定 ①生化实验：取G007在EMB以及SS平板上所生长出的菌落以及普通营养琼脂平板之上生长的菌落②接种到三糖铁琼脂斜面上，观察到菌落的生长情况为斜面（-）、产气以及动力均呈阴性；同时进行生化试验，将其置于温度为37℃的培养箱中恒温培养24 h，可观察到葡萄糖酸盐、苯丙氨酸脱氨酶、枸橼酸盐、靛基质、鸟氨酸、葡萄糖产气、尿素、棉子糖、氰化钾、阿拉伯糖、氧化酶以及动力均呈阴性，而赖氨酸、甲基红、硫化氢、木胶糖以及山梨醇均呈阳性，且其生长情况均一致。取G109分别在高盐甘露醇以及普通营养琼脂平板之上生长的菌落②接种到血平板之上，并置于37℃的培养箱中恒温培养24 h，观察到其菌落的形态完全一致，均为不透明、圆形、色泽金黄、中等大小、表面光滑而边缘整齐状态，菌落周围分布有明显透明溶血环，均经生化鉴定显示甘露醇、厌氧甘露醇、过氧化氢酶、触酶以及血浆凝固酶均呈阳性。②血清学鉴定：在TSI斜面菌台血中对G007号菌种性沙门菌血清学凝集试验，其结果显示，O抗原：A-F存在多价O血清（+++），O9++。H抗原：该抗原的1、2相均为阴性，将其接种于琼脂含量为0.7%的平板中进行培养，其结果仍表现为不凝集，它与生理盐水的对照结果呈阴性。

根据生化反应结果、革兰氏染色以及菌落形态可知，在普通的营养琼脂平板上G109、G007菌落①为蜡样芽孢杆菌。

2 结果

根据血清学凝集试验、生化反应结果、革兰氏染色以及菌落的形态，可判定在G007盲样中所检测到的D群沙门菌属于鸡沙门菌中的一种。此外，根据血浆凝固酶、生化反应的结果、革兰氏染色以及菌落形态，可以断定G109盲样中的检出的菌落为金黄色葡萄球菌。G007盲样中检出了蜡样芽孢杆菌以及鸡沙门菌，G109中检出蜡样芽孢杆菌以及金黄色葡萄球菌。检查结果上报上级疾病预防控制中心，均完全准确。

3 讨论

本研究结果显示，本实验室的检测结果客观、真实、准确，质控措施落实较好，质量管理体系处于良好的受控状态。

质控结果的真实、准确性涉及设备、环境以及样品的采集和保存等多方面的因素，应加强各环节以及各要素的技术校核以及质量监督，并建立健全实验室操作规范，加强质量评价，并及时采取有效的纠正措施，确保检测工作处于良好的受控状态。接收样品时一定要谨慎对待，并认真阅读相关的实施方案及方案，及时提出并解决疑问，以面接受样品后因信息不全或者样品不符合要求而造成不必要的麻烦。在开展质控活动前，应做好人员分配，强化技术要求以及责任意识，并全面提高检测人员的平板分离技术以及高疑似菌落识别技术。应加强对常用仪器设备的质量管理，确保器皿的清洁，并注意检查其性能以及运行情况。应根据相关标准进行培养基质量管理和控制，确保培养基以及各试剂均在保存期限内，并具有适用性。分配培养基时应注意少量勤配，并做好灭菌标准之后避光保存。

在细菌鉴定过程中进行生化反应，并注意观察一些特殊的生化反应过程，可逐步排除其他的相似细菌，以便于在进行多株细菌分析时，更加清晰地鉴定和分析。尤其是对于一些具有独特生化反应的细菌具有较好的鉴定价值。而对于生化反应不典型者，则应进行反复试验。同时，还应根据细菌在整个培养以及鉴定过程中的情况以及血清学鉴定等，综合判断并确定鉴定结果。本组两个盲样均经细菌培养、平板分离、血清学鉴定以及生化试验等，鉴定结果准确无误。

总之，加强室间质控考核不仅是对实验室质控情况、检验人员技能、能力的考核和验证，也是提高检验人员的检验水平，有效确保检验结果客观、真实、准确的关键，同时也是预防和控制疾病发生及发展的重要策略及措施。

[1] 马莉.浅谈微生物实验室的日常管理[J].现代测量与实验室管理，2012，20（2）：51-52.

[2] 安静.疾病预防控制系统微生物实验室内部质量控制[J].按摩与康复医学（中旬刊），2011，2（2）：235-236.

[3] 张宏.疾控中心微生物实验室质量控制的研究[J].中外医疗，2011，30（3）：173，175.

[4] 王绥家，黄宏星.微生物实验室培养基的质量控制[J].检验医学与临床，2011，8（20）：2557-2558.

[5] 钟六珍，李建煌.微生物实验室的质量控制管理方法分析[J].临床和实验医学杂志，2012，11（15）：1249-1250.