胃癌组织中CXCL12、CXCR4的表达及意义

李 力，杨桂芳，漆咏梅，吴惠玲

(1武汉市普仁医院，武汉430081;2武汉大学中南医院)

研究表明，趋化因子CXCL12及其受体CXCR4构成的信号转导通路与肿瘤细胞的增殖潜能和靶器官转移密切相关，但其在胃癌组织中的表达及其与肿瘤浸润、转移关系的报道较少。本研究应用免疫组化法检测了50例胃癌患者癌组织中的CXCL12及CXCR4表达，并探讨二者在胃癌浸润及淋巴结转移中表达的临床意义。

1 资料与方法

1．1 临床资料 选择武汉市普仁医院2005～2010年收治的胃癌患者50例，男23例、女27例，年龄45～80

岁，术前均未行放、化疗。收集患者术后胃癌组织标本，组织学分类为乳头状腺癌13例、管状腺癌15例、黏液腺癌11例、印戒细胞癌11例，其中40例伴淋巴结转移(胃周淋巴结转移癌)。同时选取上述患者距胃癌组织5 cm以上的正常胃黏膜组织(癌旁正常组织)作对照，病理切片证实无增生及肿瘤病变。

1．2 方法

1．2．1 检测方法 将受检者石蜡标本切4μm厚切片，烤干，以松节油脱蜡、梯度浓度乙醇脱水，用3%双氧水消除内源性过氧化物酶活性、柠檬酸修复液修复，玻片封闭后在孵育盒中孵育，暴露抗原;然后加入血清、一抗及二抗，行DBA显色，苏木精复染。采用免疫组化SP法检测各组织中的CXCR4、CXCL12。结果由两位病理医师双盲评定，以细胞膜和细胞质内出现浅黄色、棕黄色着色颗粒，显色面积至少25%判定为阳性表达。

1．2．2 统计学方法 采用SPSS13．0统计软件，数据比较用χ2检验。P≤0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 CXCR4及CXCL12在各组织中的表达 见表1。表1显示，胃癌组织及胃周淋巴结转移癌组织的CXCR4、CXCL12阳性表达率均高于癌旁正常组织(P均＜0．05)，阳性表达主要位于细胞膜和细胞质。

表1 CXCR4、CXCL12在各组织中的表达比较［例(%)］

2．2 CXCL12及CXCR4与胃癌患者临床病理特征的关系 见表2。表2显示，CXCL12及CXCR4在胃癌浸润至肌层浆膜者和有淋巴结转移者中呈高表达。CXCL12和CXCR4表达与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、组织学分型及肿瘤分化程度无明显相关性。

表2 CXCR4及CXCL12与胃癌患者临床病理特征的关系(n=50)

3 讨论

胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤，其转移率、病死率高。近年来，趋化因子及其受体在肿瘤浸润生长及淋巴结转移过程中的作用成为研究的热点。研究表明，CXCR4/CXCL12可调节多种肿瘤细胞增殖［1］，在多种肿瘤浸润及淋巴结转移中发挥作用［2］，其中 CXCR4在乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌及恶性黑色素瘤等23种肿瘤中表达［3］，但目前对其在胃癌组织中的表达及其与肿瘤浸润转移的关系报道较少。

趋化因子是具有趋化作用的细胞因子，目前已发现几十种，这些因子多为小分子多肽。趋化因子根据结构内半胱氨酸的位置分为4个亚族，即C、CC、CXC及CX3X，其对应的受体分别为XCR、CCR、CXCR与CX3C［4］。趋化因子及受体的相互作用对免疫细胞的分化、黏附及迁移起重要作用，参与炎症及组织修复的免疫反应。某些趋化因子可直接刺激肿瘤细胞生长，有的则通过促进瘤组织内新血管形成促进肿瘤生长。研究表明，趋化因子及受体与肿瘤的迁移、转移密切相关。CXCL12又称基质细胞源性因子，属于趋化因子CXC亚家族，编码区含267 bp，编码89个氨基酸残基多肽。CXCL12由基质细胞持续分泌，CXCR4是其惟一的受体。CXCR4编码352个氨基酸，也是CXCL12惟一的配体。近年研究显示，CXCL12和CXCR4广泛表达于心、脑、肾、肺、肝等组织。对乳腺癌患者的研究发现，其CXCR4抗体明显升高;对乳腺癌动物模型应用CXCR4拮抗剂T140治疗后，发现其阳性表达明显降低，提示其抑制了乳腺癌转移的发生［5］。对结直肠癌的研究显示，CXCL12和CXCR4与癌组织局部浸润及淋巴结转移密切相关。卵巢上皮性癌原发灶的CXCL12和CXCR4表达阳性率分别为91%和59%［6，7］。研究表明，CXCL12 和 CXCR4 参与了肝细胞肝癌的发生、发展［8］。对胶质瘤的研究证实，CXC12/CXCR4生物学轴在介导胶质瘤生长、侵袭性及新生血管形成中具有重要作用，并与高级别胶质瘤中血管生成的水平和肿瘤的恶性程度及患者的预后密切相关［9］。而对腺样囊性癌的研究说明，CXCL12/CXCR4在癌组织嗜神经浸润过程中具有一定的作用［10］。本研究结果显示，CXCR4和 CXCL12在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织，表明二者在胃癌的发生、发展中起重要作用。

研究表明，趋化因子CXCL12、CXCR4在肿瘤的转移中发挥重要作用［11］。本研究发现，CXCR4、CXCL12在浸润深的胃癌及转移淋巴结组织中表达较高，进一步证实CXCR4和CXCL12与胃癌转移密切相关。其可能机制为肿瘤的侵袭与转移本身可分泌多种趋化因子并表达其受体，进一步刺激肿瘤生长;而肿瘤生长又与肿瘤血管的生成密切相关，CXCR4在许多器官血管内皮细胞中高表达，而CXCL12是血管内皮细胞趋化诱导剂［12］，因此，CXCR4和CXCL12高表达可能反过来促进肿瘤的侵袭与转移。

综上所述，CXCR4和CXCL12高表达可促进胃癌的浸润及淋巴结转移。检测CXCR4在胃癌组织中的表达可预测患者的预后，CXCR4和CXCL12检测可作为判断胃癌患者癌转移或复发的参考指标。

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