消化道恶性肿瘤患者不同疗程化疗后网织红细胞计数的临床研究

刘志贤，刘华东，徐艳存，张传志

(湘潭市第一人民医院检验科，湖南湘潭411101)

化疗是消化道恶性肿瘤患者治疗的主要方法之一，化疗药物的不良反应主要是造成骨髓造血功能短期的不同程度抑制，引起全血细胞数目的减少，伴发感染、贫血、出血等危重症状［1］。因此，寻求一种灵敏可靠的指标来反映消化道恶性肿瘤患者不同疗程化疗过程中骨髓的造血功能情况，对帮助临床医师选择化疗时机、科学合理用药具有重要意义。该项研究对87例消化道恶性肿瘤患者化疗前后外周血白细胞(white blood cell，WBC)计数、血小板(platelet，PLT)计数、网织红细胞百分比(RET%)进行了检测，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择湘潭市第一人民医院2009年5月至2011年10月经病理组织学检测确诊施行化疗的消化道恶性肿瘤患者87例，男72例，女15例，年龄34～65岁，平均年龄53岁。其中胃癌患者26例，肝癌患者25例，胆管癌患者13例，肠癌患者23例。

1.2 化疗方案 选用药物是氟尿嘧啶(5-FU)、甲酰四氢叶酸钙(CF)、羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(DDP)、依托泊苷(VP-16)，联合化疗药物组合有三种:①5-FU，CF，HCPT;②5-FU，CF，PDD;③5-FU，CF，VP-16。化疗剂量与每一个静脉化疗周期量相同，即5-FU每个周期2.5～3.0 g，CF 100～150 mg/d(使用5-FU当天前2～4 h应用)，HCPT每个周期40～50 mg。PDD每个周期100 mg，VP-16每个周期300～500 mg，输入腹腔的液体量为2500～3000 mL。

1.3 检测方法

1.3.1 仪器及试剂 ①18°×4扇形窥盘由刘志贤［2］自行设计，并获得国家专利，专利号为 ZL 200720062751.1，由江苏世泰实验器材有限公司制作，网织红细胞染色液为改良网织红细胞染色液［3］。②日本东亚公司生产的SYSMEX XT-2000i全自动血细胞分析仪，所用试剂均为进口原厂配套。

1.3.2 质量控制 全血质控物为进口原厂配套。每日开机后预热30 min进行室内质控，分别测定三种浓度的全血质控物，两次测定的结果均在允许范围内方可测定患者标本，严格按仪器标准操作程序文件操作。

网织红细胞手工计数质量控制方法［4］:18°×4扇形窥盘法变异系数值控制在10%以内，具体方法如下:①试剂不变质。购买的煌焦油蓝染液有效期较长(4℃可保存2年)。②网织红细胞充分染色，染料与血液之比 2∶1，充分混匀，置 37℃染色15～20 min。③避免网织红细胞头部低、尾部高，用压片横抹法，趁热制片，立即干燥，使红细胞分布均匀。④计数红细胞的数目参照陈宝梁［4］的建议。⑤识别标准，即任何无核的或有两个以上的相当于RNA蓝染物颗粒的红细胞或有明显着色的细粒状或细网状物者为网织红细胞。

1.3.3 标本采集和检测 患者化疗前和化疗后第7、14、21天分别采集其清晨空腹静脉血2 mL，EDTA-K2抗凝，用XT-2000i全自动血细胞分析仪检测WBC、PLT。用18°×4扇形窥盘计数RET%。WBC、PLT和RET%的参考范围分别是(4.0～10.0)×109/L、(100～300)×109/L、0.5%～1.5%。

1.4 统计学方法 采用SPSS 13.0软件进行统计学分析，计量资料用均数±标准差(±s)表示，采用方差分析，组间两两比较采用q检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

各疗程消化道恶性肿瘤患者化疗前与化疗后各项参数测定结果进行比较差异均有统计学意义(P＜0.05)，化疗后骨髓造血功能明显受到抑制;第1～6个疗程第7天WBC、PLT和RET%于化疗后明显降低，第14天降到最低，差异有统计学意义(P＜0.05)。第4个疗程第21天仅PLT恢复正常，第5个疗程第21天WBC和RET较化疗前降低，第6个疗程WBC、PLT和RET%均较化疗前降低(P＜0.05)，差异有统计学意义(表1)。

3 讨论

化疗是消化道恶性肿瘤患者的主要治疗方法之一，但是化疗没有辨别能力，往往在杀死癌细胞的同时也对正常细胞产生杀伤作用，从而导致机体出现各种不良反应，影响治疗进程。化疗常见的不良反应有:①骨髓抑制、免疫功能降低，出现WBC、PLT减少，使患者易患细菌、真菌和病毒感染。②消化道反应，如恶心、呕吐、腹泻、口腔溃疡、味觉受损等。③毛发脱落、皮肤黏膜改变。④血尿、膀胱炎、前列腺炎、尿道梗阻或慢性出血等。其中又以不同程度的骨髓抑制对机体所造成的影响最为严重，可引起WBC和PLT数目的减少，伴发感染、贫血、出血，危害极大。因此，该项研究通过87例消化道恶性肿瘤患者化疗前后外周血WBC、PLT和RET进行检测，寻求反映消化道恶性肿瘤患者各疗程治疗过程中骨髓造血功能情况的可靠指标，用以指导临床选择化疗时机和科学合理用药。

对于基层医院来说，网织红细胞计数是反映骨髓造血功能的重要指标，它能判断贫血的类型，评价骨髓造血能力，观察贫血疗效，对患者的骨髓造血功能预后判断起着非常重要的作用。该项研究结果显示，WBC、PLT和 RET%第1～6个疗程呈进行性下降，化疗后骨髓造血功能明显受到抑制，各疗程第7天WBC、PLT、RET%于化疗后明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。第1、2个疗程第14天 WBC、PLT、RET%最低，差异较第7天增大，RET%开始恢复，第21天各项指标恢复正常，但WBC较化疗前降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，说明 RET%比WBC 和 PLT 恢复快，与顾瑛等［5］和萧剑军等［6］报道一致。

综上所述，不同疗程之间消化道恶性肿瘤患者WBC、PLT和RET可作为基层医院评价不同疗程消化道恶性肿瘤患者化疗后骨髓造血功能受抑制和开始恢复的敏感指标，对临床医师能准确把握消化道恶性肿瘤患者骨髓抑制状态，及时调整治疗方案，不失时机地给予各种支持疗法及化疗时机的选择具有重要的临床意义。

［1］托马斯.临床实验诊断学［M］.上海:上海科学技术出版社，2004:877-878.

［2］刘志贤.一种新型18°×4扇形网织红细胞计数窥盘［J］.生物医学工程与临床，2007，11(3):215-217.

［3］刘志贤，李剑鸿，袁雯.改良网织红细胞染色液的应用评价［J］.生物医学工程与临床，2009，13(3):247-250.

［4］陈宝梁.国际血液学标准化委员会推荐的网织红细胞活体染色显微镜计数法［J］.中华医学检验杂志，1993，16(2):196.

［5］顾瑛，刘薇芬，雷鸣.肿瘤患者化疗过程中网织红细胞参数的动态分析［J］.国际检验医学杂志，2007，28(12):1136-1137.

［6］萧剑军，彭杰文，何洁冰.网织红细胞在乳腺癌化疗前后的变化及临床意义［J］.中国肿瘤临床与康复，2008，15(2):116.