葡萄籽原花青素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

王红珊，曹毅敏，杨 晋，吴 琳，李国豪，臧林泉

(1.广州市第一人民医院，广东 广州 510180;2.广东药学院，广东 广州 510006)

心肌缺血再灌注是指在短时间的心肌血液供应中断，然后在一定时间内恢复供血，原来的缺血心肌细胞较供血恢复前会发生更为严重的损伤［1］。葡萄籽原花青素(procyanidins)是葡萄籽提取物中的一种有效成分，具有一定的抗炎症、抗衰老的作用。本文研究了葡萄籽原花青素对于大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。

1 材料

葡萄籽原花青素(纯度:98.48%)，中国药科大学天然产物教研室提供。

SD大鼠，雌雄各半，体重220～270 g，购自广州中医药大学(大学城校区)实验动物中心，动物合格证号:SCXK(粤)2008-0020。

2 方法

2.1 分组及给药

SD大鼠50只，随机分为5组:假手术组、模型组、葡萄籽原花青素低、中、高剂量组，每组10只。

按照文献方法［2-3］进行大鼠心肌缺血再灌注手术处理。假手术组在进行处理后，穿线但不结扎左冠状动脉前降支，120 min后结束实验;模型组及葡萄籽原花青素低、中、高个剂量组结扎左冠状动脉前降支30 min，再灌注90 min后结束实验，其中，假手术组和模型组分别在穿线或者结扎前30 min腹腔注射生理盐水，葡萄籽原花青素低、中、高剂量组于结扎前腹腔注射给葡萄籽原花青素50，100和200mg/kg。

2.2 检测指标

5组大鼠在60 min后腹主动脉取血，按试剂盒说明书测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。

腹主动脉取血后，立刻取出心脏，置于生理盐水中，分离静脉、动脉和左右心室。将左心室称重，采用氯化硝基四氮唑蓝染色法，分离正常心肌和梗死心肌，分别称重，计算心肌梗死面积(即梗死心肌重量占左心室重量的比例)。

2.3 统计分析

3 结果

结果见表1。由表1可以看出，不同剂量葡萄籽原花青素均可以降低大鼠CK、LDH、AST和MDA的水平，升高大鼠体内SOD的水平，与模型组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，葡萄籽原花青素的作用具量效关系。心肌梗死面积随着葡萄籽原花青素剂量的增加而减少，三个剂量组与模型组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。

表1 五组大鼠生化指标检测结果比较(n=10，±s)Tab.1 The comparison of biochemical indicator in five groups(n=10，±s)

表1 五组大鼠生化指标检测结果比较(n=10，±s)Tab.1 The comparison of biochemical indicator in five groups(n=10，±s)

与模型组比较:1P＜0.05Compared with model group:1 P＜0.05

组 别 剂量/(mg/kg)CK/(μ/L)LDH/(μ/L)AST/(μ/L)MDA/(μmol/L)SOD/(μ/mL)心肌梗死面积/%假手术组 － 230±89 424±32 188±18 4.8±1.2 524±26 0模型组 － 5 8432±1 523 2 589±451 607±56 19.5±3.6 419±15 64.5±11.3原花青素组 50 7 863±6561 1 126±1571 516±391 14.9±2.81 436±231 49.4±12.81 100 5 121±4821 785±1121 384±271 9.7±2.51 457±241 38.6±9.71 200 2 498±2691 441±591 223±221 7.1±2.61 498±191 14.3±8.71

4 讨论

原花青素是自然界中广泛存在的聚多酚混合物，主要由儿茶酚的单体、二聚体、三聚体等组合而成，目前已经从葡萄籽中分离提取了十几种原花青素，据报道［4］，葡萄籽原花青素可以用于外周静脉功能不全、淋巴水肿以及微循环障碍，广泛的用于药物与化妆品领域。

本研究中，我们重点研究了葡萄籽原花青素对缺血再灌注过程中心肌细胞损伤的保护作用，结果表明，不同剂量的葡萄籽原花青素均可以显著的降低血清CK、LDH、AST和MDA的水平，与张国霞等的研究结果一致［5］。同时，葡萄籽原花青素还可以升高SOD的水平，与钟书辉等［6］的研究结果相符合。由于CK、LDH、AST和MDA水平与心肌细胞损伤成正相关，这四个指标水平的下降表明心肌细胞受损程度下降，而SOD正好相反，其水平与心肌细胞损伤程度成负相关，SOD水平的提高说明心肌细胞是损伤减轻。因此，葡萄籽原花青素对心肌细胞有一定的保护作用。同时，通过心肌梗死面积比较，我们同样可以看出葡萄籽原花青素对于心肌缺血再灌注的保护作用，说明葡萄籽原花青素在抗衰老、抗自由基生成方面具有一定的效果，有望用于心脏疾病的治疗。

［1］黄志华，李良东，肖 海.3'-大豆苷元磺酸钠对心肌缺血/再灌注损伤及抗氧化作用的影［J］.中国药理学通报，2009，25(4):481-483.

［2］徐晓军，陆 波，盛海峰.醋柳黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用［J］.药学服务与研究，2005，5(2):119-121.

［3］邓汉武.大鼠心肌缺血再灌注损伤实验法［J］.中国药理学通报，1989，5(2):317-319.

［4］董六一，陈志武.心肌缺血/再灌注损伤与炎症反应［J］.中国临床药理学与治疗学，2008，13(5):582-588.

［5］张国霞，武 艳，韩冬梅.原花青素对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用［J］.中国生化药物杂志，2010，31(3):170-172.

［6］钟书辉，张艳，李乐雯.原花青素对心肌缺血再灌注大鼠血清T-AOC、CRP及NO 的影响［J］.中国生化药物杂志，2011，32(3):228-229.