清胰活血汤对急性坏死性胰腺炎并多器官功能不全大鼠腹腔内压的影响

李伟冬 贾林 马军 方建志 邱嘉华 黄耀星 潘锦瑶

清胰活血汤对急性坏死性胰腺炎并多器官功能不全大鼠腹腔内压的影响

李伟冬 贾林 马军 方建志 邱嘉华 黄耀星 潘锦瑶

中医学认为重症急性胰腺炎(SAP)为腑气不通、热毒内蕴、血流淤阻所致。治法以理气通腑和通里攻下、清热解毒为主。大黄单剂及复方制剂清胰汤、大承气汤等对SAP疗效已获公认[1-2]。本研究应用自拟的清胰活血汤治疗急性坏死性胰腺炎(ANP)并多器官功能不全(MODS)大鼠，观察其对腹腔内压增高的疗效，为临床治疗奠定实验基础。

一、材料与方法

1．实验动物分组及中药组方：健康SD大鼠30只，体重180～200 g，SPF级，购自广州中医药大学实验动物中心[许可证：SCXK(粤)2008-0020]。按数字表法随机分为ANP组、大承气汤组和清胰活血汤组，每组10只。采用胰管内逆行注射4.5%牛磺胆酸钠(Sigma公司)1 ml/kg体重的方法诱导大鼠ANP并MODS模型[3]。大承气汤组和清胰活血汤组分别在建模前4 h，建模后3、9 h给予大承气汤、清胰活血汤20 ml/kg体重灌胃；ANP组给予等量生理盐水灌胃。清胰活血汤由生大黄(后下)、黄连、黄岑、丹参、厚朴、柴胡各15 g熬制而成。大承气汤由生大黄(12 g后下)、厚朴(15 g)、枳实(12 g)、芒硝(9 g后下)熬制而成。

2．腹腔内压：测压设备为BL-420E+生物机能实验系统(广州医学院机能实验室提供)。制模后24 h，大鼠麻醉后采用平卧位，左下腹穿刺，冠脉扩张球囊导管内充注生理盐水，将连接球囊导管的硬膜外导管接头的另一端连接压力换能器，利用压力换能器与生物机能实验仪，以腋中线为“0”点，大鼠呼气末时换能器所感受的压力就是球囊内压和腹内压[4]。

3．腹水量：测压后处死大鼠，观察腹水的颜色，用干棉球吸尽腹水，并称重。腹水量=湿棉球的重量-干棉球的重量。

4．血清淀粉酶、TNF-α检测：血清淀粉酶采用酶联耦合法测定。TNF-α采用ELISA法，试剂盒购自广州帮能公司。

5．胰腺组织学检查：取胰腺组织，行病理学检查，由专一病理医师阅片，并按照Schmidt等[5]标准进行评分。

二、结果

1．大鼠腹水量及腹内压的变化：ANP组大鼠腹水量为(10.10±2.14)g,呈血红色或暗红色；大承气汤组腹水量为(6.75±1.10)g，呈淡黄偏红色；清胰活血汤组腹水量为(4.73±0.80)g，呈淡黄偏红色。各组间差异均有统计学意义(P值均<0.05)。ANP组、大承气汤组、清胰活血汤组大鼠的腹内压分别为(11.8±1.5)、(6.2±0.9)、(4.11±0.8)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)，各组间差异也有统计学意义(P值均<0.05)。

2．大鼠血清TNF-α、淀粉酶水平的变化：ANP组、大承气汤组、清胰活血汤组大鼠血清TNF-α水平分别为(116.19±15.03)、(102.70±6.32)、(84.90±4.81)μg/L；血清淀粉酶水平为(4483±906)、(2491±904)、(1402±325)U/L，各组间差异均有统计学意义(P值均<0.05)。

3．大鼠胰腺的病理改变：ANP组胰腺病理间质广泛水肿，胰腺腺泡坏死，大量出血及血管周围大量炎症细胞浸润；大承气汤组、清胰活血汤组大鼠胰腺的病变均有不同程度的减轻，尤以清胰活血汤组明显(图1)。ANP组、大承气汤组、清胰活血汤组的胰腺病理评分分别为(13.8±0.78)、(8.8±0.6)、(6.1±0.4)分，各组间差异均有统计学意义(P值均<0.05)。

图1ANP组(a)、大承气汤组(b)、清胰活血汤组(c)胰腺病理改变(×200)

讨论SAP可出现腹内压增高，且随着SAP病情的发展而加重，是SAP严重程度的重要指标之一[6]。我们前期研究显示，ANP大鼠的腹水量于制模后1 h开始增加，并出现明显胃肠胀气；3 h后腹内压进行性升高，24 h时达到峰值。因6 h时点为炎症介质反应高峰，表明ANP大鼠进行性腹内高压是炎症反应的后续效应[6]。因此，及时有效干预炎症反应可抑制腹内压进行性增高。TNF-α在所有炎症介质中处于始动地位，成为抗炎症介质的重要靶点。

中西医结合治疗在SAP的抗炎、胃肠功能调理和改善微循环等领域取得重大进展，大黄单剂及清胰汤、大承气汤等复方制剂亦在临床较广泛。本研究配置的清胰活血汤，除生大黄外，保留了清胰汤的柴胡(具有降低炎症因子释放、减少白细胞游走和改善微血管通透性的作用)、黄岑(双重调节平滑肌)、黄连(抗菌抗炎)以及大承气汤的厚朴等有效成分，还添加了丹参(扩张外周血管，改善胰腺微循环，并能抗凝血和抑制血小板凝聚，防治缺血后的再灌注损伤和强力消除自由基，对肠黏膜屏障功能也具有较好的保护作用[7])，旨在从抑制胰酶和炎症因子释放、改善胃肠功能和胰腺微循环等多靶点全方位治疗SAP。本结果显示，清胰活血汤确在降低炎症介质TNF-α和血清淀粉酶水平、减少腹腔渗出和降低腹腔内压、显著改善胰腺病理损害等方面均明显优于大承气汤。究其效果一方面与柴胡、黄岑和黄连具有广谱抗菌消炎，镇痛退热，抑制TNF-α释放和减轻炎症有关；另一方面与丹参和生大黄配伍促进排出肠内毒素和积气积液，减轻胰腺及其他脏器水肿，缓解IAP增高以及改善胰腺微循环，减轻再灌注造成的“二次损伤”等机制密切相关。

[1] Zhang MJ, Zhang GL, Yuan WB, et al. Treatment of abdominal compartment syndrome in severe acute pancreatitis patients with traditional Chinese medicine. World J Gastroenterol, 2008,14:3574-3578.

[2] Deng LH, Xiang DK, Xue P, et al. Effects of Chai-Qin-Cheng-Qi Decoction on cefotaxime in rats with acute necrotizing pancreatitis. World J Gastroenterol, 2009,15:4439-4443.

[3] 邱嘉华,陈奕金,贾林,等. 牛磺胆酸钠诱导急性坏死性胰腺炎大鼠模型的理想浓度. 中华胰腺病杂志, 2010,10:120-122.

[4] 贾林,陈奕金,黄耀星,等. 重症急性胰腺炎大鼠模型腹腔内压和血TNF-α的时相改变及规律. 中华胰腺病杂志，2010,10:106-108.

[5] Schmidt J,Rattner DW,Lewandrowski K,et al.A better model of acute pancreatitis for evaluating therapy.Ann Surg,1992,215:44-56．

[6] Rosas JM,Soto SN,Aracil JS,et al.Intra-abdominal pressure as a marker of severity in acute pancreatitis.Surgery,2007,141:173-178.

[7] Xiping Z, Yan P, Xinmei H, et al. Effects of dexamethasone and Salvia miltiorrhizae on the small intestine and immune organs of rats with severe acute pancreatitis. Inflammation, 2010,33:259-266.

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2012.02.019

广东省中医药局科研课题(008006)、广州市中西医结合科研课题(2008A02)

510180 广州，广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科(李伟冬、贾林、邱嘉华、黄耀星)，中医科(马军、方建志、潘锦瑶)

贾林，Email:jialin@medmail.com.cn

2011-02-23)

(本文编辑：屠振兴)