复方板蓝根喷雾剂的制备与质量控制研究

广东岭南职业技术学院（510663）曹智启 罗宪堂 杨凤琼 李岩

复方板蓝根喷雾剂处方由板蓝根和大青叶组成，具有清热解毒、凉血利咽之功能，用于治疗温毒发斑、舌绛紫暗、喉痹、烂喉丹痧、痈肿等症[1]。目前临床上广泛使用的剂型是板蓝根冲剂和糖浆剂。但由于含糖量高，服用量大，糖尿病和肥胖病症者不宜服用。为此，我们在原糖浆剂的基础上，改进制剂工艺而制成复方板蓝根喷雾剂(以下称本品)，解决了上述问题，而且有使用方便的特点。采用高效液相色谱(HPLC)法对靛玉红的含量进行测定，结果满意，并具有简便、快捷、分离度高、重现性好等优点，可用于该制剂的质量控制。

1 制备工艺

1.1 处方 板蓝根500g，大青叶500g。

1.2 工艺 称取处方量的板蓝根及大青叶，粉碎，混合，用6倍量的65%乙醇渗漉法提取，漉液回收乙醇后，加水放置，滤过，制成1000ml，即得。

2 质量控制

2.1 性状 本品为喷雾剂，为棕褐色溶液，气微，味微苦。

2.2 鉴别

2.2.1 取本品溶液1.0ml，置于滤纸上，晾干，置于紫外灯(365nm)下观察，显蓝色荧光。

2.2.2 取本品溶液1.0ml，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，分别加乙酸乙酯制成0.2mg/ml的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法制备硅胶G薄层板，取供试品溶液5ul，对照品溶液各5ul，分别点于硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90)一醋酸乙酯一二乙胺(7.5：5：1)展开，取出晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点。

2.3 检查应符合喷雾剂[2]项下有关的各项规定。

2.4 含量控制

2.4.1 仪器与试药 LC-100型高效液相色谱仪(上海伍丰公司)，包括LC-100输液泵、7725i手动进样器、LC-100紫外检测器、LC-100色谱工作站；AS20500B型超声波清洗器(功率500W，天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。靛玉红对照品(供含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号为0717—200404)；复方板蓝根喷雾剂(广东岭南职业技术学院药物制剂室自制)；其它试剂均为AR级。

2.4.2 方法与结果

2.4.2.1 色谱条件 色谱柱：DiamonsiTM,C18(250mm×4.6mm，5um)；流动相：甲醇一0.1%乙酸铵一乙酸(80∶20∶1)；流速：1.0ml/min；检测波长：286nm；理论塔板数按靛玉红峰计算应不低于5000，在此条件下靛玉红能达到理想的分离效果，分离度>1.5。

2.4.2.2 溶液的制备

2.4.2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的靛玉红对照品约0.5mg，分别置50ml的量瓶中，用甲醇溶解并定容，即得。

2.4.2.2.2 供试品溶液的制备 移取复方板蓝根喷雾剂溶液约1ml，置10ml量瓶中，加甲醇约5ml，超声处理20min，取出，放冷，加甲醇至刻度，用0.45um微孔滤膜过滤，即得。

2.4.2.2.3 阴性对照溶液 移取按处方比例及生产工艺制备的不含板蓝根和大青叶原药材的阴性样品，按“2.4.2.2.2”项下方法制备，即得。

2.4.2.3 空白试验 分别精密移取靛玉红对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各20ul，注入色谱仪。结果供试品在靛玉红对照品相应位置处有相似的吸收峰，而阴性对照在此位置处无吸收峰，说明其他成分不干扰靛玉红的测定。

2.4.2.4 标准曲线的绘制 精密移取靛玉红对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml分别用甲醇稀释，定容至10ml容量瓶，注入HPLC色谱仪，测定峰面积，以峰面积积分值 (x)为横坐标，进样浓度 (y)为纵坐标，绘制标准曲线，计算，得靛玉红的回归方程为y=7.39903e-006x+0.000744645 (r2=0.999945，n=7)。结果表明，靛玉红的进样量分别在0.0812～0.9745ug/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。

2.4.2.5 精密度试验 每次进样上述对照品溶液20ul，重复进样6次，测定。结果靛玉红峰面积的RSD=0.58%，表明仪器的精密度良好。

2.4.2.6 重现性试验 移取复方板蓝根喷雾剂样品（批号为20110925）5ml，按“2.4.2.2.2”项下方法制备供试品溶液，每次进样20ul，共6次。结果靛玉红的平均含量为1.643ug/ml，RSD= 0.51%，表明试验方法的重现性良好。

2.4.2.7 稳定性试验 精密移取新配制的供试品溶液，按上述色谱条件分别于制备后2、4、6、8、10h内各测定1次。结果靛玉红含量的RSD=0.55%，表明在提取后10h内供试品溶液稳定。

2.4.2.8 加样回收率试验 精密移取已知含量的复方板蓝根喷雾剂样品（批号为20110925）5ml共6份，精密加入已知浓度的靛玉红对照品溶液，按样品测定方法测定。结果详见附表1。

2.4.2.9 样品含量测定 按上述色谱条件和测定方法测定样品含量。结果详见附表2。

附表1 靛玉红的加样回收率试验结果（n=6)

附表2 复方板蓝根喷雾剂中靛玉红的含量测定结果(n=3)

3 小结与讨论

3.1 本品的制备工艺合理，采用醇水两步提取，尽可能提取了其有效成分，且质量可控制，可代替冲剂和糖浆剂用于临床。

3.2 在展开剂中加入少量二乙胺使其成碱性，可避免靛玉红产生拖尾现象。

3.3 在选择系统适应性条件时，流动相曾选择甲醇-0.1%醋酸(65：35)，结果靛蓝与靛玉红分离度不好，杂质峰干扰太多，而且出峰时间长。选用文中流动相分离度大于1.5，分离效果较好。

3.4 本方法经稳定性试验证明，结果在2h内稳定。同时进行重现性试验和加样回收率试验，结果满意，可作为本品质量控制的方法。