磺胺脒片含量测定方法的研究

广东省韶关市食品药品检验所（512028）何绍萍 陈华龙 罗蔚

磺胺脒片是磺胺类药，主要用于细菌性痢疾、肠炎等，收载于《卫生部药品标准化学药品及制剂》第一册[1]，质量标准中采用永停滴定法测定其含量，其测定结果容易因为人员的操作出现误差、重现性差。本文采用HPLC法测定磺胺脒片的含量，该方法灵敏度高、专属性强、重现性好、结果准确，是一种行之有效的检测方法，值得推广使用。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1200型高效液相色谱仪，UV-2550紫外分光光度计（日本岛津），XS105DU十万分之一电子天平（梅特勒托利多仪器有限公司），ZYT-1型自动永停滴定仪。

附表1 加样回收率试验结果（n=6）

附表2 含量测定结果（n=3）

1.2 试药 甲醇：色谱纯；水为纯化水；其他试剂为分析纯；磺胺脒对照品（供含量测定用，规格：约100mg，批号：100412-200401，中国药品生物制品检定所）；磺胺脒片（广东台城制药股份有限公司，规格：0.5g，批号：20090905、20101205、20110311）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：依利特Hypersil ODS2（5μm，4.6mm×200mm）；流动相：水-冰醋酸-甲醇（69∶1∶30）；流速：1.0mL/min；检测波长：263nm；进样量：20μL；柱温：25℃。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取磺胺脒对照品11.90mg，置100mL量瓶中，加甲醇适量，振摇使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；精密量取10mL，置另一25mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺脒50mg），置50ml量瓶中，加甲醇适量，振摇使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2mL，置另一50mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.3 方法学验证

2.3.1 线性关系考察 取上述对照品溶液，分别进样2，4，8，16，32μL，按上述色谱条件测定，以进样量（X）对峰面积（Y）进行回归，得回归方程Y=25907.452X-1502.657，r=0.9998（n=5）。结果表明，磺胺脒进样量在0.0952～1.5232μg范围内与峰面积线性关系良好。

2.3.2 专属性试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪，测定。色谱图见附图。

2.3.3 精密度试验 精密吸取“2.2.1”中对照品溶液20μL，重复进样5次，测得磺胺脒峰面积的RSD为0.2%（n=5）。精密度良好。

2.3.4 重复性试验 取同一批号样品（批号：20090905）6份，分别按供试品溶液制备方法制备，测定磺胺脒含量，RSD为0.5%（n=6）。

2.3.5 稳定性试验 精密吸取供试品溶液，分别在0，2，4，6，8h进样20μL，测定磺胺脒峰面积。磺胺脒峰面积积分值RSD为0.3%（n=5），这表明供试品溶液在8h内稳定，说明其稳定性良好。

2.3.6 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品（批号：20090905，标示含量97.4%）适量6份，分别精密加入磺胺脒对照品溶液适量，按“2.2.2”项中供试品溶液的制备方法制备，按上述色谱条件测定，计算加样回收率，结果见附表1。

2.4 样品含量测定 取3批样品按供试品溶液制备法制备，并按上述色谱条件测定峰面积，以外标法计算其含量，并将测得结果与原标准（《中华人民共和国卫生部药品标准化学药品及制剂》第一册）的永停滴定法测定结果进行比较比较，结果见附表2。

3 讨论

3.1 HPLC法测定磺胺脒片的含量，简化了磺胺脒片的含量测定方法。

3.2 检测波长的选择 取磺胺脒对照品适量，用甲醇溶解，在200～400nm波长扫描，磺胺脒在202nm与263nm处有均最大吸收，由于202nm已靠近紫外吸收区的末端，故采用了263nm作为检测波长。

3.3 流动相的选择 比较了不同比例的甲醇-水、水-冰醋酸-甲醇、乙腈-0.025mol/L冰醋酸溶液作流动相进行试验[2][3]，结果表明，以水-冰醋酸-甲醇（69∶1∶30）为流动相磺胺脒的峰形好，保留时间适中，柱效高。

3.4 永停滴定法对仪器的精度要求很高，精度不高则会对检出限有一定的限制，终点读数也会由于人员的操作容易出现误差，造成重现性差。本文采用HPLC法测定磺胺脒片，方法简便准确、重现性好。