三黄滴鼻液中黄芩苷含量测定

刘君 黎志福 欧阳春华

三黄滴鼻液制剂处方中含有黄芪、黄芩、黄连等八味药材，是我市某医院的自制制剂，主治鼻炎和过敏性鼻炎。药材黄芩在该处方中是主药，有关黄芩中的黄芩苷含量测定，己有法定方法［1］，而三黄滴鼻液中黄芩苷含量测定的方法，国内外未见报道。本文对三黄滴鼻液中黄芩苷含量进行了定量测定。该方法简便、准确，专属性强，可以作为三黄滴鼻液中黄芩苷含量的质量控制方法。

1 仪器与试剂

1.1 仪器 LC-10ATvP高效液相色谱仪，SPD-10A检测器，Lc solution工作站(日本岛津公司);AG-135电子分析天平(瑞士梅特勒公司)。

1.2 试药与试样 甲醇(色谱纯，上海国药集团)、黄芩苷对照品(110715-201016，94.0%，中国药品生物制品检定所提供)、三黄滴鼻液样品三批(批号101220，101221，110301株洲市某医院制剂室提供)

2 方法与结果

2.1 色谱条件 选用 Agilent ZORBAX SB-C18(5 μm，250 mm×4.6 mm)为分析柱，以甲醇-水(50:50)为流动相，流速1.0 ml/min，检测波长274nm，柱温为35℃，理论板数按黄芩苷峰计算不低于2500。

2.2 对照品溶液制备 精密称取黄芩苷对照品I:0.01271 g，II:0.01145 g，置 100 ml量瓶中，加流动相溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 供试品溶液制备 精密量取样品溶液5 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，滤过，取续滤液作供试品溶液。

2.4 阴性对照溶液制备 按三黄滴鼻液处方与工艺要求，制备缺黄芩药材的阴性样品，取阴性样品溶液，照2.3项下供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。

2.5 专属性试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照液各5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明:供试品色谱中，在与对照品色谱峰相应的位置上有一相同的色谱峰，而阴性对照溶液在与对照品色谱峰相应的位置处未见色谱峰(见图1)。

图1 HPLC色谱图

2.6 线性关系与范围 精密吸取黄芩苷对照品I续滤液2、4、6、8、10 μl进样，测定其峰面积，以样品量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为:Y=4210327X-75979，r=0.9999(见表1)，线性范围为:0.2389 ～1.1947 μg。

表1 线性关系考察结果

2.7 精密度试验 精密取同一对照品溶液5 μl，重复进样5次，记录峰面积(见表2)，计算 RSD=0.1%(n=5)，结果表明精密度良好。

表2 精密度试验结果

2.8 稳定性试验 取同一供试溶液分别于0、1、2、4、8、12、24 h进样5 μl，记录峰面积(见表3)。结果显示，供试品溶液峰面积在24 h内变化不大，RSD=0.1%(n=6)，表明样品溶液在24 h内稳定。

表3 稳定性试验结果

2.9 回收率试验 精密量取已知含量的样品5 ml，置20 ml容量瓶中，分别精密加入黄芩苷对照品I溶液5.0、6.0、7.0 ml，加流动相定容至刻度，作为供试液，每一浓度梯度制备三份供试液，分别测定含量，分别计算回收率(见表4)，RSD为0.3%，平均回收率为99.48%，结果表明，该方法准确性符合要求。

表4 回收率试验结果

2.10 样品测定 按拟定的含量测定方法，依法测定三批样品中黄芩苷的含量，重复测定2次，计算平均值，结果(见表5)。

表5 三批样品黄芩苷含量测定结果

3 讨论

3.1 从三批样品黄芩苷含量测定的结果分析，由于该制剂原质量标准未对黄芩苷的含量进行控制，各批之间黄芩苷的含量相差比较悬殊，有可能是黄芩原药材质量差异造成的，也有可能是因为生产过程中，工艺控制不严格造成的。鉴于此，有必要对该制剂黄芩苷的含量进行控制。

3.2 采用该测定方法，其他药材组分未对黄芩苷形成干扰，线性关系、精密度、稳定性、回收率试验均较好地满足方法学验证的要求，方法专属性强，简便、准确，可以作为三黄滴鼻液中黄芩苷含量的质量控制方法。

［1］中国药典委员会.中国药典.二部.北京;化学工业出版社，2010:282.