巨大口蘑Tsw－06生物学特性研究*

雷 萍，张文隽，吴亚召，孙小娟，刘博文，黎 涛

（1.陕西省微生物研究所，陕西 西安 710043；2.陕西三原玉圆食用菌专业合作社，陕西 三原 713800）

巨大口蘑 （Tricholoma giganteum Massee）， 别名洛巴伊口蘑、大白口蘑，商品名为白色松茸、洛巴口蘑、金福菇等，是珍稀的食用菌品种，属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、白蘑科、口蘑属，是热带地区的大型真菌，在非洲、南亚大陆和我国台湾、香港、云南、福建、广东等地自然分布[1]。

巨大口蘑营养丰富，据分析每100克干品中含有蛋白质27.56%、粗脂肪9.58%、总糖38.44%、粗纤维8.20%，其子实体肥厚脆嫩，味微甜而鲜美，耐贮性好，适于鲜销与干制加工，深受市场青睬。通过对巨大口蘑Tsw－06的生物学特性进行系统的研究，为其菌种生产、人工栽培提供了科学依据[2]。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

巨大口蘑Tsw－06菌种来自于陕西省微生物研究所微生物资源中心第三研究室。

1.2 培养基

1.2.1 母种培养基

采用综合PDA培养基。

1.2.2 碳源测定基础培养基

蛋白胨0.5%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%、VB110 mg·L－1、琼脂2%，pH自然。用蒸馏水配制。

1.2.3 氮源测定基础培养基

葡萄糖 2%、 KH2PO40.1%、 MgSO40.05%、 VB110 mg·L－1、琼脂2%，pH自然。用蒸馏水配制。

1.2.4 栽培料培养基

木屑78%、麦麸20%、蔗糖1%、石膏1%、石灰0.5%。

1.3 方法

1.3.1 菌丝对温度的选择试验

以综合PDA培养基为基础培养基，分别设置10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃八个处理。采用平板培养法，接入巨大口蘑Tsw－06菌种后，培养6 d，以平板培养基上菌落直径为菌丝生长量的指标。实验重复5次，取其菌落直径的平均值，比较菌丝生长情况，选择菌丝最适生长温度。

1.3.2 菌丝对pH值的选择试验

以综合PDA培养基为基础培养基，调节培养基pH值分别为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0六个处理。采用平板培养法，接入巨大口蘑Tsw－06菌种后，于28℃下恒温培养6 d，以平板培养基上菌落直径作为菌丝生长量的指标。实验重复5次，取其菌落直径的平均值，比较菌丝生长情况，选择菌丝最适pH值。

1.3.3 菌丝对碳源的选择试验

碳源测定基础培养基7份，分别添加蔗糖2%、麦芽糖2%、乳糖2%、葡萄糖2%、甘露糖2%、淀粉2%、玉米粉2%。每个培养皿内分别加入20 mL培养基，每组由5个平板组成，将巨大口蘑Tsw－06菌种接入制备好的平板中，于28℃下恒温培养6 d，以平板培养基上菌落直径作为菌丝生长量的指标。实验重复5次，取其菌落直径的平均值，比较菌丝生长情况，选择菌丝最适碳源。

1.3.4 菌丝对氮源的选择试验

碳源测定基础培养基6份，分别添加蛋白胨0.5%、酵母粉0.5%、 (NH4)2SO40.5%、NH4NO30.5%、麦麸0.5%、黄豆粉0.5%。每个培养皿内分别加入20 mL培养基，每组由5个平板组成，将巨大口蘑Tsw－06菌种接入制备好的平板中，于28℃下恒温培养6 d，以平板培养基上菌落直径作为菌丝生长量的指标。实验重复5次，取其菌落直径的平均值，比较菌丝生长情况，选择菌丝最适氮源。

1.3.5 菌丝对培养基含水量的选择试验

取烘干的栽培料 （原料均在60℃下烘干至衡重），分别按培养基含水量50%、55%、60%、65%、70%、75%配料，装入30 mm×200 mm试管。每只试管装入干料20 g，每组由10个试管组成，将巨大口蘑Tsw－06菌种接入制备好的试管中，于28℃下恒温培养7 d，进行菌丝生长情况测定。实验重复5次，以菌丝在10个试管中平均生长速度作为菌丝生长量指标，选择菌丝最适培养基含水量。

2 结果与分析

2.1 不同温度对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

巨大口蘑Tsw－06菌丝体的生长速度对温度变化很敏感，菌丝生长速度随着温度的升高而加快，在25℃和30℃均达到最大，然后又逐渐降低，结果见表1。

从表1中的数据可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌丝在温度10℃～40℃均能生长，适宜生长温度为20℃～30℃，在45℃下基本不生长，在温度30℃生长速度最快，但与温度25℃不存在显著性差异。

2.2 不同pH值对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

巨大口蘑Tsw－06菌丝体在不同的pH值下生长情况见表 2。

表1 不同温度对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

表2 不同pH值对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

从表2中的数据可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌丝体在pH值4～8内均能生长，适宜生长的pH值为5～6，在pH为9时基本不生长，在pH值6时生长速度最快，且与其它pH值相比达到极显著性差异。

2.3 不同碳源对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

巨大口蘑Tsw－06菌丝体在不同的碳源下生长情况见表3。

表3 不同碳源对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

从表3中的数据可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌丝体在供试的7种碳源上均能生长，生长最慢的是乳糖，生长速度低于CK；而生长最快的是玉米粉，其次是淀粉，且菌丝浓密健壮，生长势旺盛。因此，巨大口蘑Tsw－06菌丝体生长的最适碳源是玉米粉。

2.4 不同氮源对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

巨大口蘑Tsw－06菌丝体在不同的氮源下试验结果见表4。

表4 不同氮源对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

从表4中的数据可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌丝体在以黄豆粉为氮源的培养基上菌丝生长最快，其次是麦麸和酵母粉，且菌丝浓密，生长势旺盛；在 (NH4)2SO4上不生长。因此，巨大口蘑Tsw－06菌丝体生长的最适氮源是黄豆粉。

2.5 培养基不同含水量对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

巨大口蘑Tsw－06菌丝体在不同的含水量下生长情况见表5。

从表5中的数据可以看出，巨大口蘑Tsw－06菌丝体生长的含水量范围为55%～75%，含水量为50%时不生长。较合适的含水量为70%～75%，在含水量70%时菌丝生长速度最快。

3 讨论

从试验结果可知，巨大口蘑Tsw－06生长的最适温度为25℃～30℃，最适pH值为6.0，最适碳源是玉米粉，最适氮源是黄豆粉，较合适培养基含水量为70%～75%。本项目研究的数据为巨大口蘑Tsw－06菌的菌种生产、栽培工艺的确定，提供了基本条件。

表5 不同含水量对巨大口蘑Tsw-06菌丝生长的影响

对巨大口蘑Tsw－06菌丝生长营养条件探索时发现，缺少碳源或氮源，菌丝生长都很差，尤其是缺少氮源时，菌丝不生长；巨大口蘑Tsw－06在以天然物质玉米粉作碳源或以非动物蛋白黄豆粉作氮源时，菌丝生长速度最快，可能是这些大分子有机物水解后可以提供多种形式的营养物质，同时这些有机物中可能含有一些生长促进因子，刺激菌丝生长；而碳源为乳糖和氮源为 (NH4)2SO4时，菌丝生长受到抑制。

[1]黄年来.中国食用菌百科[M].北京：中国农业出版社，1993.

[2]应建浙，卯晓岚，马启明.中国药用真菌图鉴[M].北京：科学出版社，1987.