毛木耳菌丝体营养优势菌株的筛选研究*

赵 爽， 布 达， 刘 宇， 许 峰， 耿小丽， 王守现， 孟莉莉

（1.北京农林科学院植保环保研究所，北京 100097；2.河南农业大学生命科学学院，河南 郑州 450002）

毛木耳Auricularia polytricha(Mont.)Sacc.，隶属于担子菌门、层菌纲、木耳目、木耳科、木耳属，自然情况下主要分布在热带和亚热带地区。毛木耳的生命力强，适应性广，栽培方法简便，生产周期短，产量高，所以是一个世界性的重要栽培品种，主要栽培地区涉及到我国南方和东南亚一些国家[1]。

毛木耳是一种药食同源的食用菌，作为食品其脆而有韧性，口感好，别有风味，是深受消费者欢迎的一种食用菌食品。每100克干品含粗蛋白质7 g～9.1 g、粗脂肪0.6 g～1.2 g、 碳水化合物 64.6 g～69.2 g、 粗纤维 9.7 g～14.3 g、灰分 2.1 g～4.2 g， 热量 1230.10 kJ～1334.70 kJ。 还含胡萝卜素 0.01 mg、 硫胺素 0.09 mg～0.36 mg、 抗坏血酸 7.04 mg～8.35 mg 以及尼克酸 1.7 mg～4.0 mg[2]。毛木耳中富含 Zn、Fe、 Ca、 Mg、 Cu、 Mn、 K、 Na等人体需要的微量元素[3]。

中医认为，毛木耳具有滋阴强阳、清肺益气、补血活血、止血止痛的功效，是一种具有保健功能的食品[4]。从药用价值上分析，毛木耳的腺苷成分，具有抑制二磷酸腺苷（ADP）诱导血小板聚集的作用，对动脉粥样硬化的发生具有保护作用，毛木耳的粗多糖也能够诱导血小板的聚集，并且具有明显的量效关系[5]。其中，蛋白质和多糖是毛木耳发挥功效的重要营养物质，本研究以这两个指标为基础对保藏的不同品种的毛木耳进行测定，以筛选出利用价值高的毛木耳品种。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 供试菌株

供试的毛木耳菌株为本实验室多年保藏菌株，分别为毛木耳杂交6号、毛木耳杂交34号、毛木耳白背120、毛木耳特大、毛木耳西南召、毛木耳紫木耳、毛木耳781、毛木耳福建农和毛木耳丰收一号。

1.1.2 培养基

综合PDA培养基：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂粉20 g（北京梦怡美公司）、KH2PO43 g、VB110 mg（湖北华中药业）、蛋白胨5 g（北京奥博星公司，总氮＞9%、氨基氮＞3%）、MgSO41.5 g，蒸馏水1000 mL；综合 PDA液体培养基为上述培养基不添加琼脂粉，其它试剂均为分析纯，购自北京化学试剂公司。

1.1.3 试剂

BCA蛋白定量试剂盒购于北京博迈德科技公司，苯酚、浓硫酸、NaCl和乙醇均为分析纯，购自北京化学试剂公司。

1.1.4 实验仪器

生物安全柜MSC 1.2，美国Thermo公司；全波长酶标仪VERSA max，美国Molecular Devices公司；精密天平AR2140，美国奥豪斯公司；旋转蒸发仪RE－52AA，上海振捷公司；恒温培养摇床HZQ－F160，江苏太仓公司。

1.2 实验方法

1.2.1 菌种活化及培养

将毛木耳斜面菌株接种到综合PDA平板上进行活化，25℃恒温培养，待菌丝长满平板后将其接种到液体培养基中，25℃、160 r·min－1摇瓶培养7 d后，再转接1次液体摇瓶培养7 d后收集菌丝体，存于－20℃冰箱内待用。

1.2.2 菌丝体蛋白质含量的测定

标准曲线的制作：利用标准样品小牛血清蛋白（BSA）配置成不同浓度的蛋白溶液，采用BCA蛋白定量试剂盒制作标准曲线[6]。

根据赵爽等改良的方法，用BCA蛋白定量试剂盒测定9个品种菌丝体中蛋白质的含量[6]。

1.2.3 菌丝体水溶性多糖含量的测定

标准曲线制作：将葡萄糖 105℃烘干至恒重，配置成不同浓度溶液，采用苯酚－硫酸法制作葡萄糖标准曲线[6，7]。

同样根据改良后的多糖测定法，采用苯酚－硫酸法测定9个毛木耳品种中水溶性多糖的含量。

2 结果与讨论

通过BCA和苯酚－硫酸法制作出蛋白质和葡萄糖的标准曲线[6]，根据分光光度法测定出样品的吸光度值回归到线性方程中，可计算出9个品种菌丝体的蛋白质和水溶性多糖的含量，具体测定结果见表1和表2。

通过分析比较发现，毛木耳福建农、毛木耳特大木耳品种和毛木耳紫木耳菌丝体中蛋白质含量相对较高，分别占菌丝体鲜重的8.99%、7.759%和7.528%，是蛋白质含量筛选中的优势菌株；在水溶性多糖含量比较中发现，毛木耳紫木耳、毛木耳特大木耳和毛木耳丰收一号3个品种的水溶性多糖含量较高，分别占菌丝体干重的2.625%、1.55%和1.525%，与其它品种比较均达到了显著性差异的程度，为水溶性多糖筛选中的优势菌株。

为建立种质资源信息平台，本实验室测定了不同品种菌丝体的蛋白质和多糖含量，比较发现，毛木耳福建农菌丝体中蛋白含量明显高于姬松茸的优势菌株姬松茸11号，是其的1.64倍，毛木耳紫木耳菌丝体中多糖含量明显高于姬松茸中优势菌株姬松茸7号，是其含量的1.75倍[6]。这种差异可能是来自于种间的差异，也与不同菌种的生长周期和生长史有关系，同时发酵条件也是导致营养物含量变化的一个至关重要的因素。

表1 9个毛木耳品种菌丝体蛋白含量测定结果

表2 9个毛木耳品种菌丝体多糖含量测定结果

由于蛋白质和多糖含量在同一物种不同品种间存在一定的差异，所以在毛木耳功能产物加工中，可以根据需求选定毛木耳品种，通过改良发酵工艺使目标产物最大化生产，为深加工产品的开发提供稳定的材料来源，也为扩大栽培提供理论基础，同时本研究数据可以为毛木耳种质资源库提供有力的营养学数据。

3 结论

经过本实验研究，毛木耳福建农是9个品种中蛋白质含量最高的菌株，毛木耳紫木耳是所有检测品种中水溶性多糖含量最高的菌株，从营养、功能性角度分析它们都属于优势菌株，可以作为扩大栽培或深加工的优势材料，用以进一步挖掘毛木耳的可利用资源。

[1]罗信昌，陈士瑜.中国菇业大典[M].北京：清华大学出版社，2010.

[2]张丹，郑有良.毛木耳 (Auricularia polytricha)的研究进展[J].西南农业学报， 2004， 17(5)： 668－673.

[3]吕文英.黑木耳和毛木耳中无机营养元素含量的测定与研究[J].微量元素与健康研究，2007，24(4)：30－31.

[4]高峰，谢凌慧，卢伟，等.毛木耳液体菌种的研究及栽培试验[J].中国食用菌， 2009， 28(3)： 32－34.

[5]赵因，张悦.毛木耳的药理作用及其临床应用 [J].基层中药杂志，2001， 15(1)： 49.

[6]赵爽，刘宇，王守现，等.不同品种姬松茸菌丝体蛋白质和水溶性多糖含量的研究[J].食品工业科技，2010，31(12)：121－122，126.

[7]张维杰.糖复合物生化研究技术 （第二版）[M].杭州：浙江大学出版社，1994.