健康人体内甲磺酸加替沙星对茶碱稳态药代动力学的影响*

朱 华，贾玲昌，倪 立，芮建中，孙礼琴，许建国

1苏北人民医院，扬州 225001；2南京军区南京总医院，南京 210002

加替沙星(gatifloxacin)是新一代氟喹诺酮类广谱抗菌药物，它抗菌谱广，抗菌活性强，对感染性疾病，尤其是呼吸系统感染疗效佳。茶碱(theophylline)属黄嘌呤类药物，具有松弛支气管平滑肌的作用，广泛用于支气管疾病的治疗。因此在临床上茶碱与加替沙星经常联合应用治疗呼吸系统疾病。

国内外氟喹诺酮类药物对茶碱的药物动力学影响研究较多，研究表明，依诺沙星[1]、环丙沙星[2]、培氟沙星[3-4]对茶碱的代谢抑制显著。但对于加替沙星对茶碱药代动力学的影响国内报道各异。梁红云[5]等报道联用加替沙星后茶碱的血药峰浓度、曲线下面积比单用茶碱有显著升高，提示加替沙星对茶碱的吸收代谢有明显影响。黄健莹[6]等报道各时点的茶碱血药浓度无显著性差异，说明加替沙星不影响茶碱的血药浓度变化，两者合用是安全的。国外Niki等[7]报道了5名健康受试者，采用自身对照，通过比较单独使用茶碱和联用加替沙星后茶碱药代动力学参数，结果4例峰浓度（Cmax），药时曲线下面积（AUC0-12），血浆清除率（CL）无显著性差异，但其中 l例Cmax上升55%，AUC0-12上升44%。

为了进一步了解加替沙星对人体茶碱稳态药物动力学是否存在影响，现就茶碱与加替沙星联合应用时，在健康受试者体内药代动力学的相互作用作一考察，以期为临床治疗、安全有效地合用茶碱与加替沙星提供依据。

1 材料与受试者选择

1.1 材料

安捷伦1100高效液相色谱系统 （G1312A泵、G1314A检测器、G1329A进样阀、1100工作站）；Sigma1-13离心机（德国）；WH-3漩涡混合器（上海沪西分析仪器厂）。

茶碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号:100121-199903）；内标对乙酰氨基酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号:100018-200408）；茶碱缓释胶囊（海南普利制药有限公司，规格:0.1 g，批号:061001）；甲磺酸加替沙星胶囊（扬州市三药有限公司，规格:0.2 g，批号:070116）；水为去离子水；甲醇、乙腈为色谱纯；其他试剂为分析纯。

1.2 受试者选择

年龄:（20.2±1.5）岁，体重:（64.9±7.8） kg，身高:（174.1±3.5）cm，试验前经严格体检和血尿常规检查，证实心、肝、肾及胃肠功能正常或无变化。本实验经我院伦理委员会批准；患者签署了知情同意书。排除标准:对甲磺酸加替沙星胶囊或茶碱过敏史者；怀孕或哺乳妇女；受试前2周服用其他药物。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Lichorspher ODS(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相:甲醇-水（22.5∶77.5，V/V）；流速:1.0 mL·min-1；检测波长:273 nm；柱温:室温。

2.2 血浆样品预处理

精取待测血浆300μL，加入100μL内标对乙酰氨基酚（5μg·mL-1），混匀，加入 20%高氯酸 200μL，混旋 1 min，10000 r·min-1离心 5 min，取上清液20μL 进样。

2.3 方法学考察

2.3.1 专属性 将空白血浆、加入茶碱标准溶液及内标溶液的空白血浆、给药后血浆样品，按“2.2”项下方法操作，分别得到色谱图（图1）。结果表明，血浆中内源性物质不干扰茶碱的测定，茶碱和内标对乙酰氨基酚峰型良好，分离完全，在本实验所采用的色谱条件下，茶碱出峰时间在10.7 min左右，内标对乙酰氨基酚出峰在8.7 min左右，无杂峰干扰测定，基线平稳。本方法具有较高的特异性，能准确测定血浆中的药物浓度，灵敏度较高。

图1 茶碱、对乙酰氨基酚的色谱图

2.3.2 标准曲线的制备 取空白血浆0.3 mL，分别加入茶碱标准液，涡旋混匀，制成0.156、0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20μg·mL-1的标准含药血浆，按“2.2”项下操作，记录色谱图，以茶碱与对乙酰氨基酚的峰面积比为纵坐标，血浆药物浓度为横坐标，进行线性回归，得标准曲线。茶碱浓度在0.156～20μg·mL-1范围内，线性关系良好，标准曲线方程Y=6.929X+0.021，r=0.9999，最低定量限为 0.156μg·mL-1。

2.3.3 定量下限 按“2.3.2”方法制备一系列低浓度样品进行分析，以信噪比S/N≥3时相应的浓度为最低检测浓度，最低检测限为 0.1μg·mL-1。

2.3.4 精密度试验和相对回收率试验 取空白血浆，按“2.3.2”项下方法，制备低、中、高3个浓度血浆样品，每一浓度进行5样本分析，连续测定5天，以1天内测得的茶碱浓度计算日内精密度，以5天内测定的浓度计算日间精密度。并计算相对回收率。结果见表1。

表1 精密度试验和相对回收率试验结果（，n=5）

表1 精密度试验和相对回收率试验结果（，n=5）

2.3.5 稳定性试验 配制血浆样品高、中、低3个浓度各9份，分别考察1天内室温放置的稳定性，3个周期反复冻融的稳定性，以及置-20℃下冰冻20天的稳定性。结果表明:低、中、高3个样品测定的RSD分别为:3.85%、1.60%和1.23%，稳定性良好。

2.4 药动学试验

健康男性志愿者 14名， 于 8∶00、20∶00空腹口服茶碱缓释片200 mg，bid。如此连续服用3天，于第4天清晨8∶00空腹口服茶碱缓释片200 mg，分别于0、0.5、1、2、3、5、7、9、12 h 取静脉血 3.0 mL，于离心管中离心后取血清，置-20℃冰箱中保存，待测。于第5天清晨8:00茶碱用法不变的情况下，同时加服甲磺酸加替沙星胶囊400 mg，每天1次，如此连续服用4天，于用药后的第9天清晨8∶00空腹口服两药，分别在 0、0.5、1、2、3、5、7、9、12 h 取静脉血 3.0 mL，于离心管中离心后取血清，置-20℃冰箱中保存。

2.5 数据处理

2.5.1 平均血药浓度-时间曲线 根据14名受试者单独口服茶碱和联用加替沙星的血药浓度-时间数据，绘制平均血药浓度-时间曲线。见图2。

图2 14名受试者单用与合用加替沙星后茶碱的平均血药浓度-时间曲线

2.5.2 健康受试者单用与合用加替沙星后茶碱的药动学参数 采用3p97程序进行统计分析，选用非参数法计算药动学参数，Cmax和Tmax为实测值，AUC采用梯形法计算曲线下积分面积。主要药动学参数采用SPSS11.5统计软件进行配对t检验。单用和合用加替沙星后，茶碱的药动学参数Cmax、t1/2、CL、AUC0-12、AUC0-∞之间有显著性差异（P＜0.01）。 见表 2。

表2 健康人体内加替沙星胶囊对稳态茶碱药动学参数的影响(，n=14)

表2 健康人体内加替沙星胶囊对稳态茶碱药动学参数的影响(，n=14)

注:与单用茶碱组比较，*P＜0.01

3 讨 论

本实验结果表明，单用和合用甲磺酸加替沙星后， 茶碱的药动学参数 Cmax、t1/2、CL、AUC0-12、AUC0-∞之间有显著性差异(P＜0.01)。Cmax明显下降，t1/2明显减小，AUC0-12与AUC0-∞明显下降。甲磺酸加替沙星对健康人体内茶碱稳态药动学有影响，由于试验未设计茶碱加服甲磺酸加替沙星胶囊后的当天测定茶碱的血药浓度，无法比较合用后茶碱的血药浓度的变化情况。两药合用茶碱浓度降低可能是加替沙星对肝药酶的诱导作用，合用可能降低茶碱疗效。提示两药合用应监测茶碱的血药浓度。

在考察加替沙星对茶碱稳态药动学有影响的同时，也测定了合用茶碱后加替沙星的血药浓度。利用文献报道的健康志愿者的加替沙星的药代动力学参数与实验中健康志愿者的药代动力学参数比较，加替沙星的药动学参数 tmax、Cmax、t1/2、AUC0-12、AUC0-∞与文献报道的药动学参数比较,两者之间无显著性差异（P＞0.05）。在健康人体内茶碱对加替沙星的药代动力学影响不大。

[1]吴 畏，赵 语.依诺沙星对氨茶碱药代动力学的影响[J]. 解放军药学学报，2003，19(1):47-9.

[2]梁宇坚，肖 力，王永林.环丙沙星对慢性阻塞性肺疾病患者氨茶碱药物动力学的影响[J].医学文选，2001，20(3):276.

[3]Lode H.Evidence of different profiles of side effects and drug-drug interactions among the quinolones the pharmacokinetic standpoint[J].Chemotherapy,2001,47(Suppl 3):24-31.

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[5]梁红云，李承军，陈一芬，等.加替沙星对慢性阻塞性肺病患者茶碱缓释片药动学的影响[J].中国药师，2007，10（10）:986-7.

[6]黄健莹，梁健健，曾建红.加替沙星对人体长效茶碱血清浓度影响的研究 [J].广东药学院学报，2004，20（2）:145-6.

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