藏荆芥挥发油抗炎与镇痛作用研究*

黄山，江春艳，龙飞

(1.青岛科技大学化工学院药学系，青岛 266042;2.西藏天知药业有限责任公司，日喀则 857000;3.成都中医药大学生药学教研室，611137)

藏荆芥(藏药名萨都那保)为唇形科植物藏荆芥Nepeta angustifolia C.Y.Wu的全草，味苦，性凉，开窍醒神，主治神昏惊厥、卒中、癫、出血性脑梗死、创伤及疼痛等症［1］。藏荆芥与荆芥为同科同属的植物，但是为西藏独有的药材，主要产于西藏拉萨、江孜等地。作为藏医常用药之一，藏荆芥在临床上有着良好的疗效。但是，目前对该药的研究仍较少，这也妨碍对该药的进一步开发，限制了其应用。笔者以藏荆芥挥发油为研究对象，对其抗炎、镇痛作用进行实验研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试药 藏荆芥(Nepeta angustifolia C.Y.Wu)，西藏日喀则地区天知药业有限责任公司提供，经成都中医药大学生药学教研室龙飞博士鉴定符合药用。藏荆芥挥发油按《中华人民共和国药典》2010年版一部甲法提取，得淡黄色、透明油状液体，无水硫酸钠充分脱水后，密闭贮存于棕色瓶中，4℃ 保存备用。实验时用0.5%聚山梨酯80溶液配制使用。二甲苯、冰醋酸均为市售化学纯试剂。泼尼松(天津药业集团新郑股份有限公司，批号:080825)、阿司匹林(山东新华制药股份有限公司，批号:20090610)。角叉菜胶(Sigma公司，批号:122K1444)。

1.1.2 动物 昆明种小鼠(清洁级)，体质量18～22 g，雌雄兼用，随机分组，每组10只，动物合格证号:医动字第0214-07号。SD大鼠(清洁级)，雄性，体质量150～170 g，随机分组，每组10只，动物合格证:医动字第0158-07号。以上实验动物均由成都中医药大学实验动物中心提供，在自由摄食、饮水环境中适应1～2 d后，用于实验。

1.1.3 仪器 JA1203型电子天平(上海天平仪器厂)，YLS-6A型智能热板仪(山东医学科学院设备站)，YLS-7A型足跖容积测量仪(山东省医学科学院设备站)。

1.2 方法

1.2.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 小鼠50只，随机分为5组，即空白对照组(给予纯化水)、泼尼松组(给予泼尼松溶液5 mg)，藏荆芥低、中、高剂量组(给予藏荆芥挥发油0.125，0.250，0.500mL·kg-1)，分别灌胃给药，连续5 d，第5天给药1 h后，将二甲苯涂于小鼠右耳前后两面，每鼠0.1mL，左耳作对照。1 h后处死动物，用直径8mm打孔器分别在两耳同一部位打下圆耳片，用电子天平称定质量。计算耳廓肿胀率和肿胀抑制率。肿胀率(%)=(右耳质量－左耳质量)/左耳质量×100%［2］;肿胀抑制率(%)=(对照组耳肿胀率－给药组耳肿胀率)/对照组耳肿胀率×100%［2-3］。

1.2.2 对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响 大鼠50只，分组及给药同“1.2.1”项。分别灌胃给药连续5 d，第5天给药1 h后，将1%的角叉菜胶0.1mL注入大鼠右后足跖皮下，然后用足跖容积测量仪分别测量致炎前、致炎后1，2，3，4，6 h大鼠足跖至踝关节部的容积，计算足跖肿胀率和肿胀抑制率。肿胀率(%)=(致炎后足跖容积－致炎前足跖容积)/致炎后足跖容积×100%［4-5］。

1.2.3 对小鼠棉球肉芽肿的影响 小鼠50只，分组及给药同“1.2.1”项。乙醚麻醉后，在每只小鼠左侧腹股沟处埋入高压灭菌棉球3 mg，手术过程严格无菌操作，并在局部注入16万U·mL-1青霉素0.1mL。术后灌胃给药，连续7 d。第8天处死小鼠，取出棉球，剔除脂肪组织，称定质量，60℃烘干24 h，称定质量，并计算抑制率。抑制率(%)=(对照组肉芽肿干质量－给药组肉芽肿干质量)/对照组肉芽肿干质量×100%［6］。

1.2.4 小鼠醋酸扭体法镇痛实验 小鼠50只，随机分为5组，即空白对照组(给予纯化水)、阿司匹林组(给予阿司匹林8 mg)，藏荆芥低、中、高剂量组(给予藏荆芥挥发油溶液 0.125，0.250，0.500mL·kg-1)。各组均灌胃给药1 h后腹腔注射0.7%的醋酸溶液，每只0.2mL，记录10 min内各组小鼠出现扭体反应的次数［7］。

1.2.5 小鼠热板法镇痛实验 将筛选合格的雌性小鼠50只随机分为5组，分组及给药同“1.2.4”项，分别测定给药前痛阈值。各组分别于灌胃给药后30，60，90，120 min测定痛阈值。若小鼠超过60 s仍无反应，按 60 s计算［8］。

2 结果

2.1 藏荆芥挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

结果见表1。藏荆芥挥发油对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用。

2.2 藏荆芥挥发油对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响 结果见表2。藏荆芥挥发油能抑制角叉菜胶致大鼠足跖肿胀，减轻肿胀程度，与空白对照组比较差异有统计学意义;而且，随着致炎时间的延长，空白对照组足跖肿胀程度不断显著增加，而藏荆芥挥发油各剂量组足跖肿胀程度均未明显增加。

2.3 藏荆芥挥发油对小鼠棉球肉芽肿的影响 结果见表3。给药组均具有抑制小鼠肉芽肿生长的作用，与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。

2.4 小鼠醋酸扭体法镇痛实验 结果见表4。藏荆芥低、中、高剂量组醋酸所致小鼠扭体次数均明显减少，与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。

2.5 小鼠热板法镇痛实验 结果见表5。藏荆芥高、中、低剂量组均能在给药后30，60，90，120 min延长小鼠的痛阈值，与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。

3 讨论

藏荆芥挥发油高、中、低剂量对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的炎症反应均有明显的抑制作用，对小鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型也有明显的抑制作用。说明藏荆芥挥发油对炎症早期毛细血管通透性增加、炎症物质渗出、组织水肿，以及炎症后期肉芽组织增生均有较强的拮抗作用，提示该药对炎症有较强的防治作用。

表1 5组小鼠二甲苯致耳廓肿胀情况Tab.1 Results of xylene－induced ear edema in 5 groups of mice ±s

表1 5组小鼠二甲苯致耳廓肿胀情况Tab.1 Results of xylene－induced ear edema in 5 groups of mice ±s

与空白对照组比较，*1P＜0.01Compared with blank control group，*1P＜0.01

组别 剂量/(mL·kg－1)小鼠/只左耳质量 右耳质量 差值mg肿胀率 抑制率%藏荆芥挥发油低剂量组 0.125 10 16.05±1.72 31.80±2.12 15.75±1.85 99.54±17.93 15.83中剂量组 0.250 10 16.13±1.41 30.98±3.14 14.85±2.95 92.89±21.08*1 21.45高剂量组 0.500 10 16.04±1.22 30.23±2.53 14.19±2.32*1 89.02±16.07*1 24.73泼尼松组 5 mg 10 15.81±1.50 29.15±4.29 13.34±4.21*1 85.59±31.62*1 27.63空白对照组 … 10 15.47±1.21 33.65±3.24 18.18±3.02 118.26±22.18…

表2 5组大鼠角叉菜胶致足跖肿胀率测定结果Tab.2 Results of carrageena-induced paw edema in 5 groups of rats %，±s

表2 5组大鼠角叉菜胶致足跖肿胀率测定结果Tab.2 Results of carrageena-induced paw edema in 5 groups of rats %，±s

与空白对照组比较，*1P＜0.01Compared with blank control group，*1P＜0.01

组别 剂量/(mL·kg－1)大鼠/只1 h 2 h 3 h 4 h 6 h藏荆芥挥发油低剂量组 0.125 10 32.10±11.10 40.08±12.36 51.64±13.86 62.32±13.62*1 67.49±12.95*1中剂量组 0.250 10 27.75±6.35 39.24±9.92 48.82±9.95*1 57.27±14.49*1 63.46±17.40*1高剂量组 0.500 10 22.70±6.35*1 34.06±19.14*1 43.01±13.15*152.97±17.95*1 58.27±12.57*1泼尼松组 5.00 mg 10 19.76±6.39*1 30.26±6.95*1 41.21±7.84*1 51.89±8.49*1 58.72±9.57*1空白对照组 … 10 35.45±10.94 53.91±18.76 65.63±17.56 80.72±14.96 92.78±15.32

表3 5组小鼠棉球肉芽肿测定值Tab.3 Results of tampon－induced granuloma in 5 groups of mice ±s

表3 5组小鼠棉球肉芽肿测定值Tab.3 Results of tampon－induced granuloma in 5 groups of mice ±s

与空白对照组比较，*1P＜0.01Compared with blank control group，*1P＜0.01

组别 剂量/(mL·kg－1)小鼠/只肉芽肿湿重 肉芽肿干重mg抑制率/%藏荆芥挥发油低剂量组 0.125 10 76.87±9.53*118.80±3.66*125.37中剂量组 0.250 10 62.15±14.66*116.45±2.86*134.70高剂量组 0.500 10 52.73±12.70*114.43±2.80*142.72泼尼松组 5.00 mg 10 40.35±7.91*111.10±3.26*155.93空白对照组 … 10 97.57±18.98 25.19±3.63…

表4 5组小鼠醋酸所致扭体次数测定值Tab.4 Results of writhing times of mouse induced by acetic acid in 5 groups of mice ±s

表4 5组小鼠醋酸所致扭体次数测定值Tab.4 Results of writhing times of mouse induced by acetic acid in 5 groups of mice ±s

与空白对照组比较，*1P＜0.01Compared with blank control group，*1P＜0.01

组别 剂量/(mL·kg－1)小鼠/只扭体次数/次藏荆芥挥发油低剂量组 0.125 10 17.75±4.35中剂量组 0.250 10 14.83±6.03*1高剂量组 0.500 10 13.08±4.64*1阿司匹林组 8.00 mg 10 5.17±2.52*1空白对照组 …10 21.92±4.14

表5 5组小鼠对热板所致疼痛潜伏期的测定值Tab.5 Results of the pain latency of mouse induced by hot plate in 5 groups of mice ±s

表5 5组小鼠对热板所致疼痛潜伏期的测定值Tab.5 Results of the pain latency of mouse induced by hot plate in 5 groups of mice ±s

与空白对照组比较，*1P＜0.01Compared with blank control group，*1P＜0.01

组别 剂量/(mL·kg－1)小鼠/只 给药前 给药后30 min 60 min 90 min 120 min藏荆芥低剂量组 0.125 10 15.26±3.83 17.57±2.92 17.82±2.73 22.12±2.82*1 26.10±3.62*1中剂量组 0.250 10 15.31±2.66 18.56±2.94 22.83±3.86*1 25.75±5.35*1 28.91±4.04*1高剂量组 0.500 10 15.27±3.18 21.17±2.78*1 25.27±3.51*1 28.53±2.74*1 30.77±8.94*1阿司匹林组 8 mg 10 15.30±4.30 18.06±2.73 23.19±3.35*1 28.41±5.49*1 34.78±5.32*1空白对照组 … 10 15.14±3.03 15.25±3.33 15.09±2.36 15.86±3.49 15.56±3.33

藏荆芥挥发油对小鼠醋酸扭体反应有明显的抑制作用，并能明显延长热刺激小鼠痛阈值。说明藏荆芥挥发油对化学和物理刺激引起的疼痛均有良好的镇痛效果，可缓解临床炎症反应引起的疼痛。

上述实验结果表明，藏荆芥挥发油有良好的抗炎镇痛作用，为其临床应用提供了药效学基础，而藏荆芥的其他药理作用也有待于进一步研究。

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