气相色谱法测定三七伤药片中冰片的含量

杨亚丽 吴 芳 陕西省食品药品检验所(西安 710061)

三七伤药片由三七、制草乌、雪上一枝蒿、冰片、骨碎补、红花、接骨木、赤芍八味中药组成,收载于《中国药典》2010版一部。具有舒筋活血、散瘀止痛之功效。用于治疗跌打损伤,风湿瘀阻,关节痹痛,急慢性扭挫伤,神经痛等症。其中冰片作为处方中的君药具有开窍醒神,清热止痛的功效。近年来通过对市场抽检样品的检测,我们发现含冰片制剂中冰片的质量相差很大,有的甚至以樟脑代替冰片投料。为了更有效的控制三七伤药片的内在质量,建立了该制剂中冰片的含量测定方法,从而保证临床疗效。

1 仪器、试药及试剂 1.1仪器 Agilent 6890N气相色谱仪,FID检测器;Sartorius AG ME 235S型电子分析天平。

1.2 对照品及试剂 冰片对照药材(批号为110743-200504)购自中国药品生物制品检定所;水杨酸甲酯和乙酸乙酯等试剂均为分析纯。

1.3 样品 三七伤药片由生产企业提供。

2 色谱条件 采用弹性石英毛细管柱(柱长30m,内径 0.320mm,膜厚度 0.50 μ m)DB-W AX(聚乙二醇 -20M,Agilent公司);程序升温:初始温度120℃,以每分钟 10℃的速率升温至 180℃,保持3min;进样口温度为 220℃,检测器温度为 250℃;分流比为 5:1。

3 方法与结果 3.1内标溶液的制备 精密称取水杨酸甲酯 2.0183g,置于 1000m L容量瓶中,加入乙酸乙酯至刻度,摇匀;精密称取以上溶液 125m L,置于 500mL容量瓶中,加入乙酸乙酯至刻度,摇匀即得.浓度为 0.5046mg/mL。

3.2 对照品溶液制备及校正因子计算 取冰片对照药材适量,精密称定两份,分别置 25mL容量瓶中,加内标溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取2 μL,注入气相色谱仪,以龙脑和异龙脑峰面积之和计算校正因子。平均值为 0.6804,RSD为 1.28%。结果见表 1。

表1 校正因子计算

3.3 供试品溶液的制备 取三七伤药片样品适量,研匀,精密称取适量,置锥形瓶中,精密量取内标溶液 10mL,称定重量,超声 15min,放冷,称定重量,用内标溶液补足减失的重量,摇匀,即得。

3.4 线性关系 精密称取冰片对照药材适量,置25mL容量瓶中,加内标溶液至刻度,摇匀,制成 4.9024mg/m L的溶液;精密吸取上述溶液依次加内标溶液进行稀释。以上溶液分别精密吸取 2 μ L,注入气相色谱仪,测定峰面积。以溶液的浓度为横坐标,以冰片的峰面积为纵坐标进行线性回归。结果表明线性关系良好。实验数据及结果见表 2。

表2 冰片对照药材(2 μ l)线性关系

3.5 专属性试验 取对照药材溶液、样品溶液、阴性对照溶液,按本文条件分别进样,色谱图见图 1,结果表明,本条件下,阴性无干扰。

3.6 稳定性实验 取三七伤药片供试品溶液,每隔一定时间进样一次。因溶剂和待测成分均具有挥发性,故测定溶液在约 24h内的峰面积,分别统计龙脑、异龙脑及冰片的峰面积。结果表明样品溶液在 24h内稳定。实验数据及结果见表 4。

图1 对照药材溶液、样品溶液、阴性对照溶液色谱图1 异龙脑 2 龙脑 3 水杨酸甲酯

表3 稳定性实验

3.7 重复性实验 取三七伤药片样品,按供试品溶液制备方法制备 7份供试液并依次编号 1～ 7。同法进样,计算含量。结果表明重复性良好。实验数据及结 果见表 5。

表4 重复性实验

3.8 回收率实验 精密称取三七伤药片样品 0.1g,共称 7份,分别置于锥形瓶中并依次编号 1～ 7;精密称取冰片对照药材 21mg,置于锥形瓶中,精密加入内标溶液(含水杨酸甲酯为 0.504575mg/mL)100mL溶解,精密量取 10m L分别加入 1～ 7号锥形瓶中,各精密吸取 2 μL注入气相色谱仪,计算加样回收率。结果表明加样回收率良好。实验数据及结果见表 6。

表5 回收率实验

3.9 含量测定实验 取三七伤药片样品,按照供试品溶液处理方法制备供试液并测得峰面积进行计算。测试结果见表 7。

表6 样品含量测定结果

3.10 含量测定限度制定 根据样品测定结果及处方中冰片的量,样品含量测定限度暂定为:本品每片含冰片以龙脑(C10H18O)和异龙脑(C10H18O)的总量计不得少于 1.05mg。

4 讨 论 4.1超声时间决定了有效成分的析出 在实验过程中,研究了超声时间对冰片含量的影响,确定超声 15min为最佳条件。

4.2 根据三七伤药片处方 冰片为 1.05g制成1000片,即每片含 1.05mg。生产厂家 3有一批样品未检出冰片;另外生产厂家 4虽检出一定量的冰片,但同时检出樟脑。根据测定结果,中药制剂中冰片的投料存在问题比较突出,质量标准需要改进和提高,以对制剂质量进行科学合理的控制。

[1] 中国药典委员会.中国药典(一部 )[S].北京:化学工业出版社,2010:136.

[2] 张 磊.气相色谱法测定一次性使用输液器中环氧乙烷残留量 [J].安徽医药,2009,13(10):1189-1190.