不完全抗体交叉配血方法的比较观察

项嘉亮 黄伟刚 赖金养

（广东省江门市人民医院，广东 江门 529000）

近年来随着医学水平的不断发展，对于输血安全的程度也在逐步的提高，避免由于不完全抗体引起输血反应，危及患者生命安全，成为江门市人民医院研究的热点问题[1,2]。本研究通过对江门市人民医院交叉配血情况进行观察和分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取江门市人民医院2008年1月至2009年1月输血科120例接受输血患者作为观察对象，所有患者均在知情同意的情况下，参与本次调查，选取抗D、抗E、抗C、抗c抗体通过抗人球蛋白法、胶体促凝剂法、凝聚胺法敏感度分别测定。

1.2 仪器与方法

1.2.1 材料与仪器

人源血清抗D、抗E、抗C、抗c抗血清，用生理盐水倍比稀释人源血清抗D、抗E、抗C、抗c，每管中加入相应的谱细胞2滴，混匀。分别通过四种不同试剂分别测定不同滴度的抗血清。

1.2.2 所有操作规程均按照《全国临床检验操作规程》严格执行。①凝聚胺法：向各个管中加入0.6mL低离子介质，混匀，放置1min，向管中加入2滴凝聚胺应用液，混匀，静置15s，3000r/min，离心15s，倒掉上清液，轻摇，直到肉眼可见明显凝集状，加入重悬液2滴，轻摇，进行结果判定：阴性：无凝集者；阳性发生凝集反应者。②胶体促凝剂法：向各管中加入2滴胶体促凝剂，离心3000r/min，1min，加入3滴生理盐水进行轻摇，进行结果判定：阴性：无凝集者；阳性发生凝集反应者。③抗人球蛋白法：向标记好的微孔内加入50μL不同滴度的抗血清，每管加入相应的谱细胞50μL，在37℃孵育15min，专用离心机离心5min，进行结果判定：阴性：红细胞完全沉降在凝胶管底部者；阳性：红细胞的凝集块在凝胶表面或者凝胶中者。

1.3 观察指标

观察不完全抗体交叉配血方法灵敏度的对比情况。

2 结 果

观察不完全抗体交叉配血方法灵敏度的对比情况（表1）。

凝聚胺法在不同抗体交叉配血方法中灵敏度明显高于抗人球蛋白法、胶体促凝剂法，P＜0.05，差异均有统计学意义。

表1 观察不完全抗体交叉配血方法灵敏度的对比情况

3 讨 论

近年来，随着交叉配血应用的不断更新和发展，因ABO同型交叉配血不合引起输血事故时有发生[3]。为了更进一步确保输血安全，减少由于不完全抗体引起的输血反应，为探讨快速、灵敏的不完全抗体配血法，提供可靠的理论依据。本研究通过对江门市人民医院不完全抗体几种交叉配血方法，进行分析。一般情况下，红细胞表面有大量的负电荷存在，彼此之间相互排斥，但是当不同类型不完全抗体诱导红细胞出现聚集反应时，就会出现输血反应，威胁患者的生命安全。红细胞聚集主要有两条途径，其一是通过红细胞表面抗体某种变化，缩短红细胞之间的距离，其二是在两个红细胞抗体之间架桥，诱导红细胞发生聚集。根据红细胞聚集原理，应用不同方法，进行交叉配血试验。常用的方法主要有菠萝酶法、抗人球蛋白法、胶体促凝剂法、凝聚胺法。其中菠萝酶法因耗时较多，主要应用于特殊情况，本研究中不用于观察。本研究分别通过不完全抗体分别应用凝聚胺法、胶体促凝法、抗人球蛋白法进行观察。其中凝聚胺法主要是利用低离子介质降低溶液的离子强度，进而减少红细胞周围的阳离子云，促进血清中带有正电荷的IgG抗体和红细胞带负电荷的抗原相结合，从而提高和红细胞摄取抗体的速率，另外加入带有大量正电荷高价阳离子的多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，形成非特异性聚集，使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。胶体促凝法是通过胶体促凝剂如鱼精蛋白、聚乙二醇及草酸盐等进行的，其中鱼精蛋白产生的阳离子和红细胞表面的阴离子结合，缩短了红细胞之间的距离，聚乙二醇促进反应物碰撞和形成免疫复合物，从而提高反应敏感度。抗人球蛋白是检测不完全抗体常用的方法。凝聚胺法在不同抗体交叉配血方法中灵敏度明显高于抗人球蛋白法、胶体促凝剂法。另外有研究表明，凝聚胺法不仅能检测IgM抗体，又能检测IgG抗体，可以解决急诊输血安全性的问题。本研究通过选取抗D、抗E、抗C、抗c抗体通过抗人球蛋白法、胶体促凝剂法、凝聚胺法敏感度分别测定，结果表明，凝聚胺法在不同抗体交叉配血方法中灵敏度明显高于抗人球蛋白法、胶体促凝剂法。综上所述，凝聚胺法检测不完全抗体敏感性较高，操作简便、快速，值得临床推广应用。

[1]王雪明,虞秀兰,刘冬梅,等.微柱凝胶试验交叉配血在临床输血中的应用[J].临床检验杂志,2005,23(4)：318-320.

[2]王俊涛,朱文克,付雪霞,等.不完全抗体交叉配血方法的比较[J].临床医学,2010,30(3)：109-110.

[3]段佳慧,赵拉呱.多凝集红细胞合并不完全抗体临床分析[J].西南军医,2007,9(2)：74.