咪达唑仑对氯普鲁卡因致惊厥作用的影响

王　辉　徐小林　陈银宝　姚　磊　徐　佳　李　勇　王晨晨　薛　永 戴体俊

3.徐州医学院麻醉学院,江苏 徐州 221002;4.麻醉药理学教研室徐州,江苏 徐州 221002)

[摘要]目的 从致惊厥的行为学、安全性角度探讨咪达唑仑对氯普鲁卡因致惊厥作用的影响。方法 皮下注射咪达唑仑 20 min后,腹腔注射不同剂量氯普鲁卡因,观察小鼠惊厥潜伏期、持续时间、未惊厥率及死亡率;并按序贯法分析咪达唑仑对氯普鲁卡因致惊厥半数有效量(ED₅₀)和半数致死量(LD₅₀)的影响。结果 0.5、1.0 mg/kg咪达唑仑可延长氯普鲁卡因致小鼠惊厥潜伏期(P<0.05)、缩短惊厥持续期(P<0.01)、减少惊厥发生率和致死率;且本实验剂量咪达唑仑(0.5、1.0mg/kg与5.0、10mg/kg)均可增大氯普鲁卡因致惊厥ED₅₀和LD₅₀。 结论 咪达唑仑可拮抗氯普鲁卡因的致惊厥作用,结果对临床联合用药有一定的参考意义。

[关键词]咪达唑仑;氯普鲁卡因;惊厥;半数有效量;半数致死量

[中图分类号]R971+.2 [文献标识码] A [文章编号]1004-8650(2009)10-122-03

氯普鲁卡因(Chloroprocaine) 是一种起效快、效果确切、没有快速耐药、毒副反应小的短效局麻药[1]。咪达唑仑(Midazolam)为临床广泛应用的苯二氮卓类药物,具有催眠、抗焦虑、抗惊厥等作用[2]。本文从致惊厥的行为学、安全性角度探讨咪达唑仑对罗哌卡因致惊厥作用的影响。

1 材料和方法

1.1 试验动物

昆明种小鼠142只 (徐州医学院实验动物中心提供),雌雄各半,清洁级,体重(25±3)g。小鼠在试验前一天熟悉实验室环境,自由摄食饮水,为避免小鼠各时间段可能出现行为差异对研究结果的影响,实验于每日同一时间段进行。

小鼠随机分为3组:A组(咪达唑仑52):咪达唑仑对氯普鲁卡因致惊厥作用影响;B组(咪达唑仑45):咪达唑仑对氯普鲁卡因致惊厥ED₅₀的影响;C组(咪达唑仑45):咪达唑仑对氯普鲁卡因LD₅₀的影响。

1.2 药品

氯普鲁卡因注射液 (无锡凯夫制药有限公司生产,批号0709202,规格:200 mg咪达唑仑ml),咪达唑仑注射液 (商品名:力月西,江苏恩华药业有限公司,批号20090225,规格:5 mg/ml)。两药均以生理盐水(NS)配至所需浓度(氯普鲁卡因160、200、240、250、300、375及469mg/kg,咪达唑仑0.25、0.5 、1、5.0和10 mg/kg)。

1.3 观察及评价指标

1.3.1 惊厥及其持续时间判断

参照文献[3]方法,以动物兴奋性明显增高,活动增强如跳跃、奔跑,因肢体痉挛体位不能平衡而倒地等指标判断惊厥发生。以从第一次惊厥开始致肌张力下降,到末次惊厥结束、能自主活动为止为惊厥持续时间。

1.3.2 指标评价

1.3.2.1 对氯普鲁卡因致惊厥作用的影响

按分层随机设计法,A组分为4亚组,每组13只,分别为生理盐水组(NS瑼组,0.1 ml /10g)和咪达唑仑各剂量组(M瑼1、M瑼2及M瑼3 组,剂量分别为0.25、0.5 和1.0 mg/kg),均皮下注射给药。本组受试小鼠参照预试验结果的氯普鲁卡因腹腔注射致惊厥剂量250mg/kg,于生理盐水或不同剂量咪达唑仑皮下注射20 min 后注射。观察各组小鼠发生惊厥及死亡情况,并记录惊厥的潜伏期及持续时间。

1.3.2.2 对氯普鲁卡因致惊厥ED₅₀的影响

按分层随机设计法,B组分为3亚组,每组15只,分别为生理盐水组(NS瑽组,0.1 ml /10g)和咪达唑仑各剂量组(M瑽1、M瑽2组,咪达唑仑分别为0.5和1.0 mg/kg),均为皮下注射给药,20 min后腹腔注射氯普鲁卡因。氯普鲁卡因参照200 mg/kg剂量按1:0.8比例配制成不同等比溶液,即按160、200、及250 mg/kg的等比剂量。

按序贯法[4]操作如下:各组第一只小鼠皮下注射各组别相应剂量的咪达唑仑,20 min后腹腔注射生理盐水或各组最高剂量氯普鲁卡因,观察30min内是否发生惊厥,若惊厥第二只小鼠下调一个剂量,操作如上,若依然惊厥再下调一个剂量;若不惊厥第三只小鼠上调一个剂量,第4-15只小鼠序贯操作如上,根据序贯法的相关公式分析不同剂量咪达唑仑组氯普鲁卡因致惊厥ED₅₀。

1.3.2.3 对氯普鲁卡因LD₅₀的影响

C组按分层随机设计法分为3亚组,每组15只,分别为生理盐水组(NSC组,0.1 ml/10g)和咪达唑仑各剂量组(MC1、MC2组,咪达唑仑分别为5.0和10 mg/kg),给药方法和氯普鲁卡因给药剂量和方法与1.3.2类似,分析不同剂量咪唑安定组氯普鲁卡因LD₅₀。

1.4 统计学分析 致惊厥潜伏期和持续时间以 (x±s)表示,统计学分析采用SPSS17.0软件。各组间用单因素方差分析和q检验,两组的ED₅₀和LD₅₀采用t 检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对致惊厥作用的影响

与NS_A组相比,M_A2及M_A3组小鼠惊厥潜伏期延长 (P<0.05);M_A2及M_A3组惊厥持续时间缩短 (P<0.01)咪达唑仑各剂量组未惊厥小鼠只数随剂量增加而增加,且与NS_A组相比,M_A2及M_A3组差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2 对氯普鲁卡因致惊厥ED₅₀的影响

NS_B组致惊厥ED₅₀为152.5 mg/kg,与其相比,M瑽1、M瑽2组ED₅₀增加(P<0.01)。见表2。

2.3 对LD₅₀的影响

NSc组致惊厥LD₅₀为451.7 mg/kg,与其相比,MC1、MC2组LD₅₀增加(P<0.01)。见表3。

3 讨论

局麻药系临床麻醉最常用的药物,其所致中枢神经系统(CNS) 毒性惊厥为临床上常见的并发症,如得不到及时处理,可迅速发展为CNS抑制,循环虚脱以致呼吸停止,严重威胁着患者生命安全[5]。氯普鲁卡因作为短效局麻药,目前对其抗惊厥作用的研究尚且较少。咪达唑仑是一种水溶性的苯二氮卓类药物,其消除半衰期短,在临床麻醉中具有广阔的应用前景[6-7]。

本研究的预试验提示,腹腔注射氯普鲁卡因的致惊厥剂量为250 mg/kg,故本研究在此基础上进行,观察注射咪达唑仑20 min后注射氯普鲁卡因的惊厥发生情况。

试验结果初步提示,咪达唑仑可拮抗氯普鲁卡因的致惊厥作用。其可能机制为,咪达唑仑与γ-氨基丁酸(GABA)的苯二氮卓类位点结合,导致氯离子内流,细胞超级化,产生抑制作用,从而拮抗和减轻惊厥的发生[6]。苯二氮卓类具有的中枢性肌松作用,可对抗惊厥时的肌肉收缩[8]。咪达唑仑可延长氯普鲁卡因惊厥发生的潜伏期,为制止惊厥发作赢得时间;缩短惊厥持续期可减轻惊厥造成的损害;降低惊厥发生数及死亡数表明降低了毒性;咪达唑仑剂量依赖性地增大氯普鲁卡因致惊厥ED₅₀和LD₅₀,表明联用可增强用药安全性。

4 结论

本试验结果初步表明,咪达唑仑可拮抗氯普鲁卡因致惊厥作用。

参考文献:

[1] 解轶,黄绍强,梁伟民.氯普鲁卡因鞘内给药神经毒性的研究进展[J].复旦学报(医学版),2008,35(3):461-463.

[2] 戴体俊.麻醉药理学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2008:92-94.

[3] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理学实验方法学[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2003:863.

[4] 孙瑞元.定量药理学[M].北京:人民卫生出版社,1987:203-214.

[5] 盛恒炜,综述,徐世元等.局麻药引起毒性惊厥的影响因素[J].广东医学,2003,24(12):1374-1375.

[6] Olkkola KT,Ahonen J.Midazolam and other benzodiazepines[J].Handb Exp Pharmacol,2008,182(2):335-360.

[7] Hong JY,Lee IH,Shin SK,et al.Caudal midazolam does not affect sevoflurane requirements and recovery in pediatric day-case hernioplasty[J].Acta Anaesthesiol Scand,2008,52(10):1411-1414.

[8] 戴体俊.麻醉药理学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2008:25.

(收稿日期2009-06-27)