平皿
- 环境监测用胰酪大豆胨琼脂培养基中和消毒剂效能验证
毒是在距离TSA平皿水平距离大于100 cm、垂直距离约40 cm处对手部进行消毒剂喷洒，因此本文通过实验分析了生产车间日常喷洒消毒剂造成的消毒剂残留对环境监测用预装TSA培养基中环境微生物的影响，讨论该消毒行为的合理性。1 材料与方法1.1 试剂与仪器（1）材料。一次性接种环（批号5720617），10 μL，美国BD公司；pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（批号20211101），北京奥博星生物技术有限责任公司；胰酪大豆胨琼脂培养基（Tryptone
生物化工 2022年6期2023-01-14
- 2种瑶方合剂微生物限度检查方法适用性试验的研究
用，且不适宜采用平皿倾注法进行需氧菌总数计数的液体制剂提供适用性试验的方法参考。1 材料1.1 菌株 枯草芽孢杆菌、黑曲霉、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌(实验室传代批号枯草-3-20200422、黑曲-2-20150330、金葡-2-20200401、白念-3-20200401、铜绿-2-20200401、大肠-2-20200401)，上述菌株的0代(冻干粉菌种)均购自广东环凯微生物科技有限公司，实验室复活并传代培养[1-2]。对枯
中成药 2022年8期2022-12-04
- 水中菌落总数3种检测方法的比较
数检测方法为传统平皿计数法，该方法所使用的营养琼脂平板不能满足厌氧菌等特殊细菌的生理需求，导致部分细菌难以繁殖生长[1]。且在整体试验过程中不仅前处理操作繁琐，易引入外来污染与人为误差，同时对实验室无菌环境及试验人员技术能力要求较高，部分实验室检测能力难以达到要求，不适用于实验室的日常检测。酶底物法(SimPlate法)培养基底物可与微生物特异性酶反应生成蓝色荧光的物质，培养后统计分析得到最终菌落总数[2-3]。美国环保署(EPA)于2002年将SimPl
净水技术 2022年11期2022-11-10
- EasyDisc与传统平皿计数法检测水中菌落总数的比较
方法主要为传统的平皿计数法，即用营养琼脂培养基在36～37 ℃有氧静置培养48 h然后计数，由于该方法的培养条件限制，部分已被证实存在于水体中的有害细菌，如弧菌（Vibrio）、沙门氏菌（Salmonella）等，难以在此条件下生长，导致检测值偏低[1-2]。同时该方法存在诸如培养基配制、灭菌等步骤多，操作过程易引入污染，对检测环境要求高，结果读数耗时且人工读数误差大等不足，不能满足实验室大宗样品的快速检测和突发应急检测的需求，虽然该方法在近期有一定更新，
生物化工 2022年3期2022-08-06
- 炉甘石氧化锌洗剂微生物限度检查法的建立
in 后取上清的平皿法，对本品进行微生物限度检查，回收比值均在0.5～2范围内，说明方法可行［7］。该方法不需使用复杂的仪器设备，具有简便、快捷、准确、可行的优点，能真实反映炉甘石氧化锌洗剂的微生物污染水平，可有效控制该类药品的质量，并为其他含抑菌性不溶性粉末的液体药品的微生物限度检查法提供科学的实验依据。1 仪器与试药1.1 主要仪器数显鼓风干燥箱（JC 1013A，南通嘉诚仪器有限公司）；立式自动压力蒸汽灭菌器（GR85DP，厦门致微）；生化培养箱（L
药品评价 2022年1期2022-03-16
- EasyDisc法与传统平皿计数法检测水中菌落总数的比较
测标准大多以传统平皿计数法作为水中菌落总数的主要检测方法。但随着细菌种类的不断更新，传统平皿计数法并不适用于检测厌氧菌、非嗜中温及对繁殖所需营养有特殊要求的细菌[1]；在试验过程中因操作步骤复杂易引入污染；试验结果判定困难易造成较大的人为误差，对试验技术人员和检测环境要求极高，部分实验室难以达到。因此，不能满足实验室应急样品及大批量样品的检测需求。与传统平皿计数法相比，EasyDisc法具有操作简便、外来污染及人为误差小、无菌环境要求低等优点，且大量试验数
净水技术 2022年3期2022-03-10
- 西藏牦牛多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏分析
线接种于营养琼脂平皿、血清琼脂平皿、麦康凯琼脂平皿和三糖铁琼脂斜面，37℃条件下培养24 h，观察菌落形态。随机挑选单菌落接种于血清肉汤，培养24 h，涂片染色镜检。1.4.3 生化鉴定 按照细菌微量生化鉴定管说明书，将血清肉汤培养物接种至生化反应管，观察显色反应。结果判定参照《兽医微生物学》中多杀性巴氏杆菌生化鉴定标准，详见表1。表1 多杀性巴氏杆菌生理生化指标1.4.4 细菌基因组DNA提取 取纯化后血清肉汤培养物1 ml，参照细菌基因组DNA提取试剂
甘肃畜牧兽医 2021年12期2022-01-05
- 马传染性贫血琼扩试验中琼脂配比浓度及温度因素对琼脂板制作的影响
PBS）、琼脂、平皿。2 主要仪器水浴锅、天平。3 方法本次实验将琼脂和缓冲液按照不同浓度配制并在12℃和20℃两个温度下分别进行（見表1和表2），进行热水浴加热混匀。将15～18毫升的琼脂液倒入水平桌上的平皿中，厚度约2.5毫米，冷凝后加盖倒置。按照7孔型对琼脂进行打孔，将切下的琼脂取出，并注意不要使琼脂膜与平皿面离动。4 结果分析经过实验操作发现，在12℃、1%琼脂浓度和在20℃、1.15%琼脂浓度条件下即平皿1和平皿9，制备琼脂板打孔步骤中挑出切下琼
新农业 2021年9期2021-06-20
- 磷酸氯喹片微生物限度检查方法适用性研究
2.3.1 常规平皿法试验组：取1∶10 的供试液各10 mL，分别加入2.1 项下计数用的5 种试验菌悬液0.1 mL，摇匀，取1 mL 置平皿中，注入TSA 约20 mL，混匀，待凝固后倒置培养，每个菌株平行制备2 个平皿，计数，取菌落数平均值。菌液组：取pH 7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液各10 mL，分别加入5 种试验菌悬液0.1 mL，取1 mL 置平皿中，注入TSA 约20 mL，混匀，待凝固后倒置培养，每个菌株平行制备2 个平皿，计数，取菌
药品评价 2021年3期2021-04-15
- 一种新型猪场消毒设备空间消毒效果的评价
.1 制备指示菌平皿 参照《兽用消毒剂鉴定技术规范》（1992）农（牧药）字第101号，选用金黄色葡萄球菌29213菌株为消毒试验指示菌。开封冻干菌种后，进行细菌繁殖体菌悬液的制备与活菌计量，通过菌液梯度稀释，每个稀释度做两个平行，在固体培养基上涂菌，37 ℃培养24 h，选平皿菌落可计数范围在30～300个，将计数结果换算成每毫升原液的菌量。原液计数后，将菌液稀释成所需浓度，取100 µL菌液接种到LB固体培养基表面，用灭菌的涂布棒涂布均匀，制备60～8
养猪 2021年2期2021-04-12
- 全自动菌落计数仪在纺织检测中的应用研究
菌落计数问题，若平皿上的菌落数较少时可肉眼直接观察计数，但在高污染样品的检测或者抗菌性试验过程中，平皿上的菌落数较多，几十个甚至几百个，这种情况下要完成大批量检验检疫时肉眼观察菌落数存在耗时严重、眼睛易疲劳。另外，仅留下一个统计数字，原始数据结果无法保存，缺乏后期的数据分析，不利于实现检测的准确性及数据化管理。本试验选择自主合作研发的全自动菌落计数仪，对平皿上的菌落进行计数，与人工肉眼计数结果进行比较，以验证全自动菌落计数仪的准确性、精密度和重现性，从而确
中国纤检 2021年2期2021-03-13
- R2A培养基的应用及有效期的验证
R2A琼脂培养基平皿有效期的验证，证明该培养基平皿在规定时间和贮存条件下，产品质量的稳定性适合生产所需。1 材料与方法1.1 材料与仪器大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、枯草芽孢杆菌 [CMCC(B)63501]、铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉 [CMCC(F)98003]，购自中国食品药品检定研究所。注射用水，磷酸盐标准缓冲液（pH 6.86）、硼
生物化工 2021年1期2021-03-02
- 干枸杞浆果菌落总数测定结果的测量不确定度评价
4) 取两块无菌平皿。用无菌吸管分别吸取 1 mL干枸杞浆果样品的初始悬浮液(10-1稀释度)加到每块平皿中。(5) 另取两块无菌平皿，用另一支无菌吸管，分别吸取 1 mL 10-2样品稀释液。(6) 本试验选取后4个连续的十倍稀释液接种到平皿中，以期获得生长菌落数在10～300之间的平皿，以便计数。(7) 每块平皿倒入12 mL～15 mL冷却到44 ℃～47 ℃的平板计数琼脂，从制备好初始悬浮液(如果是液体样品为10-1稀释液)向平皿内倾倒琼脂，时间不
工业微生物 2020年6期2020-12-28
- 食品微生物实验室一次性无菌耗材验收和管理规程的建立及应用
规格为500 个平皿/箱，10 个平皿/包的一次性无菌培养皿中，10 个平皿/包的包装打开后平皿可以直接使用，则10个平皿/包的包装为最小独立包装，500 个平皿/箱为大包装。4 外观验收接收时，产品应带有合格证明，清晰标注批号和/或生产日期、有效期及贮存条件，否则均应拒收或退回。外包装洁净，形状完好，表面不得有破损、污渍。样品最小独立包装密封性完好，表面不得有破损、污渍。同时可向供应商索取或官网下载检测报告。5 无菌验收5.1 抽样方法每次抽样至少取3
食品安全导刊 2020年27期2020-12-03
- 健脾利湿和胃膏微生物限度检查方法的研究
.3 测定方法 平皿法：平行取四份供试液（1mL/皿），其中2个平皿立即倾注15mL温度不超过45℃胰酪大豆胨琼脂培养基混匀，另2个注入沙氏葡萄糖琼脂培养基摇匀，将以上平皿分别置30～35℃或20～25℃培养，需氧菌培养不超过3d，霉菌及酵母菌培养不超过5d，在3d和5d分别进行计数。2.1.4 回收比值测定2.1.4.1 试验组 分别取1∶10的供试液各9mL，分别加入1mL含菌量≤100cfu的上述五种试验菌液，混匀后吸取1mL置平皿中，马上加入15m
中国医药科学 2020年15期2020-10-22
- 阿法替尼和塞瑞替尼微生物限度检查方法验证
悬液1 mL注入平皿中，测定每1 mL 的活菌数。供试品对照组：取1∶10 供试液S1A 和S2A 各9.9mL，分别加入稀释剂0.1 mL，混匀，取1 mL 注入平皿中，测定供试品的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数。取1 ∶100供试液S1A 和S2A 各9.9 mL，分别加入稀释剂0.1 mL，混匀，取1 mL 注入平皿中，测定其需氧菌总数。试验组：取1 ∶10 的供试液S1A 和S2A 9.9 mL 各5 份，分别加入制备好的试验菌液0.1 mL，混匀，
中国药业 2020年17期2020-09-10
- 益生菌检测在食品微生物实验教学中的应用
L样品匀液于灭菌平皿内，每个稀释度做2个平皿。稀释液移入平皿后，将冷却至48 ℃的莫匹罗星锂盐和半胱氨酸盐酸盐改良的MRS培养基倾注入平皿约15 mL，转动平皿使混合均匀。在36 ℃下厌氧培养72 h后，对平板上的所有菌落进行计数。样品稀释和平板倾注的整个过程须在15 min内完成。(2)嗜热链球菌的计数。依据对待检样品中嗜热链球菌可能含量的估计，选择连续的3个稀释度，分别吸取每一个稀释度的样品匀液1 mL置已于灭菌的平皿内，每一个稀释度均做2个平皿做为平
农业工程 2020年5期2020-06-27
- 柠条种子伞形采集器的设计与应用
要的重新固定采集平皿即可，减少了人工的长途跋涉，改善了操作人员的工作环境[4]。2.2 组合式设计，便于外出携带沙漠地区进行种子收集作业，携带过多的工具，柠条种子伞形采集器采用便携式、可拆卸设计，由收集平皿、种子筒相互连接组成，有利于沙漠地区长距离种子采集的需要。同时采集器上带有拴系设计，可将采集器用绳子、铁丝拴系在柠条树干或周边树枝上，防止大风吹落种子筒造成种子洒落的现象。2.3 随时放置，提高种子采集效率柠条种子伞形采集器采用组合式设计，便于在柠条种子
绿色科技 2020年1期2020-04-19
- 盐酸特比奈芬凝胶微生物限度的检查方法及效果
试品对照组：需在平皿中加入等量的供试液，之后即刻将琼脂培养基加入到平皿中，等到凝固发生之后设置出规定的温度，细菌需培养24～48 h，霉菌及酵母菌需培养48～72 h，制备2 个平皿，并测定供试品的本底菌数，进行平行实验[6]。（cfu 为菌落形成单位）观察组：需在平皿中把50～100 cfu 的试验菌及供试液加入，之后即刻将琼脂培养基加入到平皿中，等到有凝固发生之后培养霉菌及酵母菌48～72 h，设置规定好的温度，细菌培养24～45 h，并实施平行培养，
中国药物经济学 2019年6期2019-07-06
- 3M纸片法在水质检验工作中的应用效果评价
验：3M纸片组和平皿计数组，比较两种检验方法检测水中细菌准确度和标准菌株总数。结果：3M纸片法检测大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的结果明显优于平皿计数法组，P【关键词】3M纸片;水质检验;效果水是人们赖以生存的主要物质之一，水质好坏直接关系着人们身体健康状况，所以必须要保障人们日常生活水质安全。但是，随着工业社会的发展和人类文明的进步，环境污染成为困扰人类发展的重要问题，水质安全问题也引起人们高度关注。因此要要做好水质检验工作，过去人们往往采用平皿计数法进行水质
现代养生·下半月 2019年3期2019-04-28
- 4种兼性厌氧微生物农药的芽孢含量检测方法研究
培养方法 采取涂平皿法、平皿夹层法、倒平皿法分别对四种兼性厌氧微生物农药进行含量测定。试验前在无菌条件下将药剂稀释到适宜浓度。涂平皿法是将适宜浓度的稀释液吸取100μL于培养基平板上，用曲玻棒均匀涂布在整个平板表面，放于最适宜培养条件下进行培养。平皿夹层法参考穆军等分离纯化厌氧细菌的方法。将10mL灭菌培养基倒入平板内，待冷却后，将适宜浓度的稀释液吸取100μL于培养基平板上，用曲玻棒均匀涂布在整个平板表面，涂布完成后将10mL 45℃左右的培养基再次倒入
农药科学与管理 2019年1期2019-03-06
- 美国国家家禽改良计划标准程序（2014版）—细菌学检查程序（1）
氏菌的麦康凯琼脂平皿（MAC）和煌绿新生霉素平皿（BGN）以及用于检测肠炎沙门氏菌的MAC平皿、BGN平皿和木糖赖氨酸Tergitol 4平皿】。推荐的细菌学复苏和鉴定程序请参考图1。采集器官和组织后应立即进行选择性增菌培养。◎图1 对肠炎沙门氏菌阳性环境的禽类和鸡白痢－鸡伤寒有反应的禽类的分离培养程序（2）选择性增菌培养（参考图1）。器官样本的采集与培养应与肠道样本分别进行，最后采集肠组织防止交叉感染。应从如下器官或位置采集样本用于选择性增菌液培养： （
中国畜牧业 2019年3期2019-03-05
- 一次药敏试验及其应用
内，同时也将接种平皿用报纸包好置于其内，121℃高压灭菌30min。（4）经高压灭菌后趁热取出，温度降到56度左右，在生物安全柜里将培养基倾入灭菌的培养皿，每一空皿倾入培养基20ml，放入4℃冰箱中备用。2.1.3 病料处理 在超净工作台上取出采集的肺组织、肝组织，用灭菌手术刀剪剪去手指大小的病变边缘组织，然后用吸水纸吸干组织水分，在酒精灯火焰上灭菌固定，最后剪开组织进行接种培养。2.1.4 细菌接种 （1）用洗手液将双手洗净，擦干，再用75%酒精棉球檫试
山东畜牧兽医 2019年3期2019-02-13
- 除湿止带胶囊微生物限度检查法方法的验证
，取1 mL注入平皿中，平行制备2个平皿，注入15～20 mL胰酪大豆胨琼脂培养基，混匀，凝固后，倒置培养。置30～35 ℃培养3 d。试验组（2）取1ı10供试液10 mL，加入铜绿假单胞菌菌液0.1 mL混匀，取1 mL注入平皿中，平行制备2个平皿，注入15～20 mL胰酪大豆胨琼脂培养基，混匀，凝固后，倒置培养。置30～35 ℃ 33 ℃培养3 d。试验组（3）取1ı10供试液10 mL，加入大肠埃希菌菌液0.1 mL混匀，取1 mL注入平皿中，平行
中国医药指南 2018年30期2018-11-16
- 空气微生物检测平板暴露法平皿支撑架的设计与应用＊
常用的检测方法，平皿检测方法的要求：I类环境—平皿摆放位置，房间＞10 m2者，每增加10 m2增设1个采样点，布点位置应距墙壁1 m处，采样高度距地面0.8~1.5 m；II、III、IV类环境—室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线3点，内、外点的布点位置应距墙壁1 m处，采样高度距地面0.8~1.5 m。监测时间要求 I、II类环境区域每月1次，III类环境区域中的普通病房不做常规监测。当怀疑医院感染爆发或疑似爆发与医院环境有关时，应及时进行监测，
天津护理 2018年3期2018-07-05
- 鸡大肠杆菌的简易药敏试验
，10个）、玻璃平皿（直径90mm，10个）、烧杯等。3 试验步骤3.1 消毒准备将烧杯、玻璃平皿、玻璃棒、小玻璃瓶用干燥灭菌箱160℃灭菌2h，冷却备用。用打孔器将定性滤纸打成圆形药敏纸片若干份（直径约6mm，100片/份），干燥灭菌箱灭菌备用。3.2 平皿培养基制备先向烧杯中加入100mL蒸馏水，再加入4.5g普通营养琼脂，边混合边搅拌，使琼脂全部溶化。然后将烧杯放入高压蒸汽灭菌锅，加热至121℃20min。稍作冷却后，缓慢解压。然后，趁热将琼脂倒入平
畜牧兽医科技信息 2018年6期2018-06-20
- BSL-3实验室实验活动及意外事故对室内环境生物污染的定量分析
采样液直接滴加至平皿中充分混匀，然后对采样平皿进行培养。每平方厘米的微生物数为 M = N·F·D/A，其中 N 为平皿培养之后的菌落数（或噬菌斑数）；F 为采样管内液体总体积；D 为稀释倍数；A 为采样涂抹面积。每次实验后喷洒 75% 的酒精溶液和紫外灯彻底消毒灭菌。1.2.1 吹吸混匀产生气溶胶 将 1 ml 替代微生物培养液置于 2 ml 离心管中，1 名操作人员使用移液枪反复吹吸混匀，操作 15 min。5 min 时使用Andersen 六级采样
中国医药生物技术 2018年2期2018-04-27
- 鸡非典型新城疫、大肠杆菌病混合感染诊治
分别接种于血琼脂平皿，于37℃培养24 h后，挑取可疑菌落涂片、染色，镜检，结果见革兰氏阴性短杆菌。病料同时接种于伊红美蓝及麦康凯琼脂平皿，于37℃培养24 h后进行观察，结果伊红美蓝平皿上见微红色菌落，麦康凯平皿上见黑紫色带光泽的菌落。细菌学检查结果为大肠杆菌。3.2 聚合酶链反应 采取病鸡血液及病变组织样品各2份，用新城疫病毒（NDV）通用型荧光RT-PCR检测试剂盒进行检测，结果2份组织样品NDV阳性。4 防治病鸡淘汰和隔离。鸡群投服多种维生素，增强
四川畜牧兽医 2018年9期2018-03-20
- 马传染性贫血病琼脂凝胶免疫扩散试验常见问题浅解
1）培养箱（2）平皿：规格直径90mm，洁净灭菌（3）打孔器：七孔梅花形、孔径约5mm，孔距为3mm（4）分析天平（5）微量移液器及吸头（6）三角烧瓶（7）酒精灯2.3 操作步骤（方法）（1）凝胶的配制：取琼脂糖1.0g，直接加入含有0.1‰硫柳汞的100mL的PBS中，用热水浴溶化混匀。（2）制板（浇板）：将平皿放在水平台上，每平皿倒入热溶化的琼脂液15～18mL，厚度约2.5mm左右,自然冷却。（3）打孔 ：在琼脂板上选好位置，用打孔器打孔。用直径3m
畜牧兽医科技信息 2018年9期2018-02-13
- 基于伺服控制的平皿自动分装系统研究
093）0 引言平皿是制药、食品、疾控、医疗等多个领域微生物检测必备的器材。在现代实验室中，各类无菌培养基的分装是必不可少的，因此平皿自动分装系统被广泛地应用于菌落样本的生产制备过程中。平皿自动分装系统可高效地完成平皿的分装，与手动分装方式相比，该系统的使用降低了操作者的劳动强度，并提高了分装效率和精度[1,2]。传统平皿自动分装系统利用平皿上盖与下盘直径差的构造，设计了内直径大于下盘而小于上盖的开盖装置，当平皿沿该装置中心线水平下落时，实现上盖与下盘分离
制造业自动化 2017年9期2018-01-18
- 三种用于血液透析和相关治疗用水微生物学监测方法的评价
，分别采用血琼脂平皿(35℃，72 h)、胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)平皿(35℃，72 h)、R2A营养琼脂(23℃,168 h)三种方法进行培养，比较三种方法菌落计数、菌落和超干预值(≥50 CFU/mL)检出率的差异。结果采用三种方法对透析液和透析用水进行检测，血琼脂平皿、TSA平皿、R2A营养琼脂菌落检出率分别为40.28%、63.89%和69.44%，差异有统计学意义(χ2=14.16，P血液透析； 透析液； 透析用水； 微生物学监测[Chin J
中国感染控制杂志 2017年8期2017-08-23
- 室内空气微生物不同采样方法检测分析
营养琼脂培养基、平皿（直径9cm）、灭菌的采样液（生理盐水）。1.2.2 检测方法液体撞击法：采样前将10mL的灭菌采样液加入到液体撞击式玻璃采样器的玻璃吸收管中，将空气采集速度调节至1.0L/ min，连续收集空气25min。空气样本采集完成后将灭菌采样液加入到平皿中，并在平皿中加入融化并冷却至45℃的普通营养琼脂，每管采样液对两个平皿进行接种，以上处理完成后将平皿放置于36℃的恒温箱中进行培养，48h后对微生物进行统计。微生物数量（cfu/m3）=N×
化工设计通讯 2017年5期2017-06-05
- 二氧化氯消毒剂对空气中几种微生物杀灭效果的研究
生产。综合PDA平皿：去皮马铃薯200 g熬汁，葡萄糖20 g，琼脂 20 g，KH2PO43 g，MgSO41.5 g，蛋白胨 5 g，维生素B110 mg，加蒸馏水定容至1000 mL，121℃灭菌20 min，用于空气中微生物的收集。食用菌接种室4间：面积35～60 m2，条件基本相同，试验前房间门窗打开，自然通风换气。试验时均无人员及动物在场。1.2试验方法1.2.1 消毒处理方法 二氧化氯消毒剂均在临用前配制，每个接种室门窗密闭，设置多个熏蒸点，
食用菌 2017年4期2017-05-23
- 水中微生物能力验证菌落总数的方法研究
方法有国家标准的平皿计数法和地方标准的复合酶底物法，通过能力验证和实验室间比对，科学分析少量数据并得出结果，两种方法的结果均接近样品真值，其中复合酶底物法呈现的结果更准确，不需要在无菌条件下操作，在实验室经验成本条件允许下可推广该技术。使用平皿计数法比较两种不同形态的菌种，结果得出当菌种体积越小、体液越深，在培养的时候越容易分辨个数，得出的结果越准确。菌落总数；复合酶底物法；能力验证；实验室间比对1 引 言菌落总数作为判定水中被细菌污染程度的标志，长期作为
环境与可持续发展 2017年2期2017-04-05
- 鸡大肠杆菌对12种抗菌药的药敏试验
取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的二分之一。然后，找到第二点划线至平皿的二分之一，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，去药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。将平皿培养基置于37℃温箱中培养24 h后，观察
兽医导刊 2017年3期2017-03-08
- 羊螨虫病诊断及其防治
将其放在消过毒的平皿中，加入适量的甘油保持痂皮湿润。3.2 病料的检查方法3.2.1 死螨的检查将病料采集回来后，采用以下两种方法对病料进行检查：浸油法（帕里雪尔柯娃氏法）：把痂皮皮屑少许放在载玻片上，滴上3滴液体石蜡油，加盖玻片，当皮屑在石蜡油浸泡下变得稍稍透明时，轻轻压动搓揉使得材料变薄，在低倍镜下检查，发现虫体即可确诊。漂浮法：取病料少许加入10%的氢氧化钠水溶液，浸泡过夜，使皮屑溶解，放入离心管，用离心机2 000转/min，离心5 min去除离心
河南畜牧兽医 2017年11期2017-02-27
- 万古霉素耐药折点调整对异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌筛选方法的影响
（hVISA）的平皿筛选方法选择的影响，寻求一种敏感、有效的平皿筛选方法。方法 收集临床MRSA菌株215株，分别用浓度为6 mg/L、4 mg/L、2 mg/L万古霉素脑心浸液琼脂平皿（BHIV6、BHIV4、BHIV2）及浓度为5 mg/L替考拉宁脑心浸液琼脂（BHIT5）进行hVISA筛选，同时应用菌群分析/曲线下面积（PAP/AUC）法检测hVISA，以PAP/ AUC法作为金标准，对比上述4种平皿筛选方法的敏感度及特异度。结果 PAP/AUC检测
中国感染与化疗杂志 2016年4期2016-09-09
- 马传染性贫血的实验室检测方法
角瓶、90mm的平皿、冰箱、水浴箱、250ml量筒、打孔器、酒精灯、纱布、小刀、棉花、仪器、玻璃笔、带盖磁盘、恒温箱、滴管。3 试剂优质琼脂粉，蒸馏水，抗原，阳性血清，PBS液，PBS液的配制：pH7.4的0.01mol/L磷酸盐缓冲溶液（PBS）。磷酸氢二钠（12H2O）2.9g；磷酸二氢钾0.3g；氯化钠8.0g；无离子水式蒸馏水1000ml。4 琼脂板制备琼脂板规定为90mm平皿，外周孔径为6mm、中央孔径为4mm、空间距为3mm的打孔器，带盖瓷盘。
中国畜牧兽医文摘 2016年4期2016-02-03
- 连花清瘟颗粒微生物限度检查方法的研究
物限度检查法中的平皿法进行回收率试验，结果金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的回收率均小于70%，其余试验菌株的回收率均大于70%，采用培养基稀释法进行试验（1∶10供试液，0.2ml/皿），金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的回收率均大于70%。采用常规法对样品进行大肠埃希菌检查，结果阳性菌生长良好，说明本品在该条件下对大肠埃希菌的抑制作用可以忽略。据此，拟定本品的微生物限度检查方法草案如下。取本品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，振摇至供试
首都食品与医药 2015年2期2015-10-28
- 琼脂扩散试验的影响因素及注意事项
脂冷凝后加盖，把平皿倒置，放在装有湿纱布的搪瓷盘中，防止水分蒸发，保证湿度。1.2 打孔打孔是琼脂扩散试验中的关键，反应孔应现用现打，放在4℃冰箱中过夜后再使用。实验室常用梅花打孔器，然后用针头挑出内容物。用此种方法在打孔的过程中，注意挑出空内容物时避免将凝胶划破，否则可造成孔与孔之间产生裂痕，产生错误的实验结果。如果试验检测的样品数量不是很多，还可以将若干梅花打孔器先放在空平皿中，孔口朝下，向平皿中倒入稍冷却的热融化琼脂液，之后迅速并平稳地放入4℃冰箱中
新农业 2015年5期2015-05-21
- 等离子体体外抑制白假丝酵母菌生长的实验研究
琼脂培养基SDA平皿上采用分区划线，置于37℃培养箱内进行分离培养，纯化菌种。3 d后挑取单个菌落，转种于沙氏固体培养基上，在37℃恒温培养箱中使其大量繁殖。再过3 d，重复上一步操作1次。3 d后，取培养基表面的白假丝酵母菌菌落，将其溶于少量0.9%氯化钠溶液中，振荡，使其彻底溶解，用比浊仪调整菌悬液浓度至（1～2）×108CFU／ml，并用血细胞计数板计数验证，并将对其浓度进行调整达到1×108CFU／ml，最终再经过稀释，得浓度分别为1×108、1×
安徽医科大学学报 2015年12期2015-03-20
- 3M 纸片法在水质检验工作中的应用
安全的重要措施，平皿计数法是多年来被广泛采用的水质检测方法，其操作过程复杂、消毒清洗量大，易出现假阴性结果[1]。为克服该检测方法的不足，人们研制出了更为有效的纸片检测方法。3M 纸片法通过在细菌生长所需营养成分中附加着色剂，使其比平皿计数法等传统检测方法更易于判读[2]，但其应用价值尚待进一步证实。有鉴于此，该文探讨了3M 纸片法在水质检验工作中的应用价值，现报道如下。1 资料与方法1.1 检测材料高压蒸汽灭菌器（山东新华医疗器械公司生产，YXQG02
中国卫生产业 2015年16期2015-01-10
- 银离子纤维含量对织物抗菌性能的影响
浴锅，一次性塑料平皿，接种环，三角涂布棒，移液枪，酸碱滴定管，胶头滴管，烧杯，镊子等实验室常用器具。1.3 实验菌种革兰氏阴性细菌：大肠杆菌（ATCC29522）；革兰氏阳性细菌：金黄色葡萄球菌（ATCC6538）。1.4 抗菌实验方法1.4.1 琼脂平皿扩散法将0.1mL实验菌悬液用三角涂布棒均匀涂于无菌营养琼脂培养基平板表面，将经过高压灭菌的直径为25mm±5mm的圆形试样和对照样分别放置于平皿中央，用无菌镊子轻轻按压，使试样紧紧贴附在营养琼脂培养基上
山东纺织科技 2014年1期2014-12-03
- 民族药复方美登木片微生物限度检查结果与分析
菌对照液分别注入平皿(每种2个平皿)，倾注培养基培养后计数，结果见表1。1.2.2 供试品组 取复方美登木片(批号：090401)1∶10、1∶100、1∶1000的供试液各1ml 分别注入平皿(每个稀释级2个平皿)倾注培养基培养后计数。结果见表1。1.2.3 试验组(供试品加阳性对照菌液组) 取复方美登木片(批号：090401)1∶10、1∶100、1∶1000的供试液各1ml 分别注入平皿(每个稀释级2个平皿)分别加入大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽
中国民族民间医药 2014年20期2014-09-12
- 痛经宁颗粒微生物限度检查方法的验证
验证2.2.1 平皿法和培养基稀释法试验组:1）平皿法。取1∶10供试液,分别注入直径为90mm的平皿中,每个平皿注入 1mL,并分别加入试验菌 1mL（50～100 cfu/mL）,分别倾注相应的营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基15 mL。按大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌顺序平行制备,每种菌制备2个平皿,以下同。2）培养基稀释法。取1∶10供试液1mL,等量分注于5个平皿中,每个平皿中再分别加入试验菌1mL（50～100
中国药业 2014年22期2014-05-02
- 夏荔芪胶囊微生物限度检查方法研究
方法 本试验采用平皿法和培养基稀释法对该品种进行微生物限度检查方法验证,通过三次独立平行试验,各试验菌的回收率均可达到70%以上。结论 采用平皿法、培养基稀释法联用检查细菌数,霉菌及酵母菌数,可客观地反映该药物中微生物的污染状况,且可操作性强。夏荔芪胶囊;微生物限度检查;平皿法;培养基稀释法;回收率夏荔芪胶囊是我公司自主研发的国家中药六类新药。新药“夏荔芪胶囊”针对良性前列腺增生的主要病证,以健脾益肾,利水散结为治疗原则,结合多年临床用药经验研制而成,为良
中国中医药现代远程教育 2014年1期2014-02-07
- 复方清热颗粒对鲍氏不动杆菌外排泵影响的实验研究*
丙沙星的MH琼脂平皿，CIP的质量浓度分别为0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32、64、128、256 μg/mL， 将 32 株鲍氏不动杆菌分别接种于已配制好的含不同浓度环丙沙星的MH琼脂平皿中，细菌接种量约为105CFU。即采用琼脂对倍稀释法测出CIP对上述32株鲍氏不动杆菌的最小抑菌浓度（MIC）值（药物敏感试验的操作及结果的解释参照美国临床实验室标准委员会（CLSI）2011版标准［5］）。称取 4 mg CCCP，用 2 mL
中国中医急症 2013年4期2013-10-02
- 蔷薇科中药配方颗粒微生物限度检查法方法学研究
验证。方法：采用平皿法和培养基稀释法。结果：其中5种 （山楂、苦杏仁、桃仁、木瓜和乌梅）中药配方颗粒可采用平皿法进行细菌、霉菌及酵母菌计数检查；另外3种 （地榆、枇杷叶和金樱子）可用培养基稀释法进行细菌计数、霉菌及酵母菌计数检查；控制菌均可用常规法检查。结论：蔷薇科中药配方颗粒多数无抑菌性，少数对个别菌谱的微生物有一定的抑菌性。蔷薇科中药；配方颗粒；微生物限度；方法学验证蔷薇科（Rosa multiflora）植物主要分布在北半球温带、亚热带及热带山区等地
中国民族民间医药 2013年9期2013-03-03
- 桔子汁促进真菌生长的实验报道
于真菌在普通琼脂平皿上生长缓慢，菌落小，常影响真菌的鉴定，如能探讨一种促进其生长的诱导剂就显得尤为重要。根据真菌的生长特性，故选取含维生素C丰富的桔子汁作为添加物、观察临床分离真菌在添加有桔子汁的中国蓝琼脂平板上的生长情况，现将结果报告如下。1 材料与方法1.1 桔子汁的制备 取市售沙糖桔去皮、捣碎、过滤取汁。1.2 桔子汁中国蓝平皿的制备 该琼脂由杭州天和试剂有限公司生产，常规中国蓝平皿的制备是1000ml蒸馏水加中国蓝琼脂粉40g高压灭菌后制备平皿，桔
实验与检验医学 2012年5期2012-01-14
- 乳核内消液微生物限度检查方法学验证
试液1 mL注入平皿。2.3.2 培养基稀释法 第一法:取供试液1 mL注入5个平皿中(每个平皿0.2 mL);第二法:取供试液1 mL注入10个平皿中(每个平皿0.1 mL)。2.3.3 薄膜过滤法 取供试液10 mL，加至pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL中，混匀，薄膜过滤，总冲洗量为300 mL。2.4 回收率实验2.4.1 实验组 取规定量供试液及各实验菌50～100 cfu，分别注入同一平皿中，立即倾注琼脂培养基，平行制备2个平皿，凝
医药导报 2011年6期2011-12-08
- 复方血栓通胶囊微生物限度检查法的验证
0的样品稀释液。平皿法直接取稀释液为供试液。2.1.3 培养基的适用性检查 按照《中国药典》(2010版)相关规定检查，培养基上的菌落平均数不小于对照的菌落平均数的70%，形态大小与对照的一致，判定培养基的适用性检查符合规定。2.1.4 验证方法2.1.4.1 平皿(常规)法2.1.4.1.1 试验组 取供试液1 ml和50～100 cfu的试验菌各1 ml，分别注入平皿中立即倾注相应琼脂培养基，每株试验菌平行制备2份，按平皿法测定其菌数。2.1.4.1.
中国实用医药 2011年19期2011-06-02
- 医用综合晾干架与培养皿置放架的研制与应用
毒效果,通常采用平皿沉降法进行空气采样细菌培养,由于没有专门的辅助工具,无法准确按照规范执行操作。为此我们研制了一种医用综合晾干架与培养皿置放架,达到日常晾干所需、方便。采用平皿沉降法行空气采样,符合医院感染管理规范要求及消毒技术规范要求的目的。1 结构及制作医用综合晾干架与培养皿置放架采用不锈钢材料制作,整个断面呈三角形,支架由横支架和立支架组成,三角形支架和下面的储物柜固定组成一个可以移动的可晾晒并可放置医用器械的整体。具体结构:综合架顶端为横支架,横
护理研究 2011年17期2011-02-28
- 沙土管、 冷干管真菌染菌检查方法
的菌液1 ml置平皿中，注入15 ～ 20 ml温度不超过45℃的溶化的玫瑰红钠琼脂培养基和改良马丁琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。每稀释级每种培养基制备2个平皿。2.4.3 在无菌操作条件下，将黑曲霉的新鲜培养物用0.9%无菌NaCl溶液逐级稀释至10-3。分别取10-2、10-3浓度的菌液1 ml置平皿中，注入15 ～ 20 ml温度不超过45℃的溶化的玫瑰红钠琼脂培养基和改良马丁琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。每稀释级每种培养基制备2个平皿。2.
化工与医药工程 2011年2期2011-02-27
- 板车消炎颗粒微生物限度检查法的验证
l,加入到 1个平皿中,平行制备 10个平皿,分别加入已制备好的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液 1ml(含 50～100cfu),每种菌平行制备 2个平皿,含金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的平皿倾注营养琼脂培养基,置 30℃～35℃培养 3d,计数;含白色念珠菌、黑曲霉的平皿倾注玫瑰红钠琼脂培养基,置 23℃～28℃培养 5d,计数。2.3.2 菌液组 分别取已制备好的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆
中国实用医药 2011年4期2011-01-29
- 疗养房的空气质量监测及注意事项
然沉降在营养琼脂平皿上。采样时将普通营养琼脂平皿放于室内3～5个，一般小于30 m2的疗养房至少里、中、外放3个；30 m2以上疗养房应设5个(东、西、南、北、中)，高度为1.2～1.5 m。采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露5 min，盖好。送检验科细菌室置37℃恒温箱培养24 h，记录每个平皿上的菌落数。2 细菌计数方法采用奥氏公式，将所得菌落数换算成浮游菌数。根据经验公式测算，5 min内在100 cm2面积上降落的细菌数，相当于10 L空气中所
中国疗养医学 2010年3期2010-11-30
- 实验动物皮肤病原真菌检测方法的改良
病兔样品经由沙氏平皿法和沙氏试管斜面培养法分别进行培养。结果 在3只真菌感染病兔中应用试管斜面法我们只检测到1例皮肤病原真菌阳性，而采用沙氏平皿法3例阳性全部检出。结论 结合临床检测经验，我们认为本研究的沙氏平皿法优于沙氏试管斜面法，在实验动物皮肤病原真菌常规检测中具有推广应用价值。实验动物;皮肤病原真菌;检测方法;改良皮肤病原真菌是小鼠、大鼠、兔等实验动物常见致病菌，在各类实验动物中必须排除。作者在长期实践中发现，真菌的检出率与真菌的培养方法有很大的关系
中国比较医学杂志 2010年6期2010-09-17
- 复方兽药的药敏试验(药敏片法)与药物选择
菌培养物，分别在平皿边缘相对4点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2，然后找到第2点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。(另:可将待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，将少量混悬液倒入平皿培养基上，轻晃平皿使铺匀，放置5～10min)。3.1.2 贴片 将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取已制好的干燥药敏片分别贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。若使观察结果更准确，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基
山东畜牧兽医 2010年1期2010-08-15
- 舒阴液洗剂微生物限度检查方法学验证
L分别加入置2个平皿中。2.2 直接接种法菌液制备取1∶10供试液2mL，分别加入置2个平皿中，再分别加入大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉菌50～100个菌/mL的菌液1mL，作为加阳性菌供试液样。每种菌制备2份。2.3 培养基稀释法供试液的制备将1∶10供试品溶液1mL，分别注入10个平皿中，每个0.1mL，10个为一组，共两组。2.4 培养基稀释法加阳性菌供试液的制备将1∶10供试品溶液1mL，分别注入10个平皿中，每个0.
中国医药指南 2010年2期2010-07-30
- 复方牛蒡子含片体外抑菌作用研究＊
2.1.4 含药平皿制备分别取上述供试品药液2 mL，加入无菌平皿内，立即加入温度为45～50℃的营养琼脂培养基18 mL，即刻摇匀，供检测大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌试验用;分别取上述供试品药液2 mL，加入血琼脂培养基(含10%无菌脱纤羊血)18 mL，即刻摇匀，供检测肺炎链球菌及乙型溶血性链球菌试验用;则制成的平皿中含生药质量浓度依次为 200，100，50，25，12.5，6.25，3.12，1.56，0.78 g/L 的复方牛蒡子含片含药平皿。取咽
中国药业 2010年24期2010-06-02