猪伪狂犬病病毒gE 基因缺失苗免疫试验

仉 弦

（山东省新泰市畜牧兽医事业发展服务中心，山东泰安 271200）

猪伪狂犬病是一种由伪狂犬病病毒引起的传染病，它不仅会影响家畜、野生动物和伴侣动物，还会危及试验动物的健康。该病的临床表现主要包括发热、脑脊髓炎和生产母猪的严重繁殖障碍。这种病毒造成的经济损失仅次于口蹄疫和猪瘟。虽然猪伪狂犬病在我国的猪群发生相对较早，但是对这种疾病的了解仍然不足。由于缺乏应有的警惕和恰当的防制对策，这种病流行猖撅，危害日益严重。为了预防猪伪狂犬病，需要采取一系列的预防措施。一方面农民和饲养员需要加强对猪伪狂犬病的了解，提高对疫情的警惕性。另一方面要加强猪群的管理和卫生，减少病毒的传播。此外，还应该加强疫苗的研发和使用，提高猪的免疫力，降低疫情的发生率。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

猪伪狂犬病毒ELISA 抗体检测试剂盒购自武汉某公司。试验猪来自于山东省泰安市新泰市某规模化生猪养殖场。试验时间为2020 年1 月至2021 年2 月，共选择了250 头繁殖母猪和200 头种公猪以及1000 头仔猪。猪伪狂犬病病毒gE 基因缺失苗购自浙江某公司。

1.2 试验方法

将250 头繁殖母猪和200 头种公猪以及1000头仔猪按照随机分组原则分为5 组，每组各繁殖母猪50 头、种公猪50 头和仔猪200 头。

1.3 血液采集

在免疫接种14d 后随机从试验各组猪群前腔静脉或者耳静脉采集血样10 份，将采集到的血液样本放入无菌试管中，3000r/min 离心10min将血清分离出来-20℃冷冻保存待测。

1.4 抗体检测与判定方法

将冻存的血清样本在室温条件下解冻。试剂盒中所配的稀释液和酶标板准备好。将稀释液加入到每个酶标板孔中，再加入2μL 待检测血清样本。将酶标板封闭，摇晃15～30s，并在37℃孵育1h。酶标板孔内的液体倒掉并用洗涤缓冲液洗板，重复此步骤3 次。将稀释液加到酶标板孔中，再加入10μL 酶标记抗体。将酶标板封闭，摇晃15～30s，并在37℃孵育1h。将酶标板孔内的液体倒掉并用洗涤缓冲液洗板，重复此步骤3次。加入底物溶液到每个酶标板孔中，并在37℃下孵育20min。每个酶标板孔中加入终止溶液，并振荡混匀。使用酶标仪检测每个孔的吸光值，记录样本的OD 值。S=样品孔OD630nm值，N=阴性对照孔OD630nm值平均。若S/N≤0.6，样品应判定为阳性，S/N＞0.7，样品应该判定为阴性。0.6＜S/N≤0.7，样品疑似阳性必须重新测试。

2 结果

2.1 各组猪伪狂犬病S/N 均值

由表1 可知，普通免疫、跟胎免疫、定时免疫组猪群在100 日龄之前猪伪狂犬病S/N 均值小于0.6，这说明3 个组的免疫效果良好，3 种免疫方法都可以用于今后的生猪免疫接种。100 日龄之后抗体呈现逐渐消退的态势，需要加强疫苗免疫接种。种猪免疫组的猪伪狂犬病S/N 均值大于0.7，这说明母原抗体在40 日龄左右，逐渐消退为阴性，生猪在育肥养殖阶段容易受到野毒株感染，所以在今后免疫程序制定过程中需要强化二次免疫。

表1 免疫接种程序

表1 试验各个组别猪伪狂犬病S/N 均值

2.2 各组别猪群抗体合格率

由表2 可知，普通免疫、跟胎免疫、定时免疫组种猪的免疫合格率达到了100%，仔猪49 日龄前的抗体合格率也能够达到100%，增长，但75 日龄之后，抗体水平呈现逐渐下降的态势，120 日龄合格率趋近于0，这个阶段有可能增加猪伪狂犬病毒野毒株感染的机会，建议在仔猪首次免疫接种之后，适当进行第2 次强化免疫接种。种猪免疫组28 日龄猪的抗体合格率在80%，42 日龄之后抗体合格率呈现急剧下降的态势，基本没有保护率，说明仔猪从母体当中获得的母源抗体维持时间不长。

表2 各组别猪群抗体合格率

3 讨论

3.1 猪伪狂犬病免疫接种效果分析

通过本次研究，通过免疫接种效果可以看出，本次所选择的疫苗能够产生良好的免疫保护效果，无论是跟胎免疫还是一年两次免疫，或者每间隔4 个月进行免疫，均能够取得良好的免疫接种效果，种猪的免疫抗体合格率达到100%，仔猪在49日龄前抗体合格率也能够达到100%。75 日龄之后，仔猪的抗体呈现逐渐消失的态势，120 日龄基本消失。在今后猪伪狂犬病疫苗免疫接种过程中，为了增强猪群的免疫能力，避免野毒株传入，建议仔猪在首次免疫接种之后进行第2 次强化免疫接种，而种公猪和繁殖母猪在春秋两季进行免疫接种之后，如果不给仔猪进行免疫，接种仔猪在35 日龄之后抗体水平逐渐下降，直到全部为阴性，不能够抵抗野毒株的侵袭，因此该种方法不宜推广应用。

3.2 猪伪狂犬病免疫接种低下的原因分析

3.2.1 种公猪伪狂犬病免疫接种低下的原因与对策分析

种公猪伪狂犬病免疫接种低下的原因包括了伪狂犬病疫苗的质量参差不齐，部分疫苗的免疫效果不理想，影响了接种效果。疫苗接种方法不当，如注射部位不准确、注射深度不够、疫苗混合不匀等，也会导致免疫接种效果不佳。此外，免疫程序不合理，如接种时间过早或过晚、接种间隔过长或过短等，会影响免疫效果。同时，种公猪的健康状况不佳，如患有疾病、营养不良等，会影响疫苗的免疫效果。选用质量可靠、免疫效果好的伪狂犬病疫苗，确保接种效果。确保疫苗接种部位准确、注射深度适宜，疫苗混合均匀，避免疫苗浪费和接种失败。根据猪只的年龄、健康状况和当地疫情等因素，制定合理的免疫程序，确保接种效果。保证种公猪的营养需求，加强疾病防治，提高猪只健康状况，增强疫苗的免疫效果。

3.2.2 繁殖母猪伪狂犬病免疫接种低下的原因与对策分析

母猪伪狂犬病免疫接种低下可能有多种原因，疫苗的储存、运输和使用条件不当可能导致疫苗效力下降。对策是确保疫苗的正确储存温度和有效期，遵循疫苗使用说明书。母猪在孕期和哺乳期期间，特别是在怀孕早期，免疫应该得到特别关注。对策是制定适当的免疫计划，确保母猪在适当的时间接种疫苗。同时，母猪的免疫状态可能受到其他疾病、营养不良或应激等因素的影响，从而影响对伪狂犬病疫苗的免疫反应。对策是通过改善母猪的饲养环境、提供高质量的饲料和增加营养补给来提高母猪的免疫状态。养殖员在接种过程中可能存在技术操作不当或未按照正确程序进行接种的情况。对策是提供充足的培训和教育，确保养殖员正确掌握接种技术。

3.2.3 仔猪猪伪狂犬病免疫接种低下的原因与对策分析

猪伪狂犬病是一种由病毒引起的猪类传染性疾病，它对猪的健康和生产造成了严重威胁。有些地区缺乏严格的免疫接种制度，导致仔猪免疫接种工作不够规范、及时和全面。一些农民或养殖户在接种过程中缺乏专业知识和正确操作，导致免疫效果低下。部分地区使用的疫苗可能存在质量问题，如疫苗保存不当、未按照要求使用新鲜疫苗等，影响疫苗的有效性。部分养殖户考虑到经济利益，为了降低成本而减少了免疫接种的频次或剂量，从而导致免疫接种不足。为了解决上述问题应该制定相关政策法规，明确责任人和执法机构，加强对免疫接种制度的监管和落实。建立健全的免疫登记和档案管理体系，确保仔猪免疫接种的全覆盖和及时性。同时，政府和兽医主管部门应加强对农民和相关养殖人员的接种技术培训，提高其免疫接种的操作水平和技术娴熟度。加大对兽药企业和疫苗生产企业的监管力度，严格执行有关疫苗质量标准和规范，确保疫苗的质量安全。加强对疫苗存储和运输环节的监控，确保疫苗的有效性。

4 小结

猪伪狂犬病是一种十分危险的传染病，对于农民和饲养员来说，应该时刻保持警惕，加强预防工作，以保障猪的健康和生产。选用猪伪狂犬病病毒gE 基因缺失苗时，应选择具有良好免疫效果和可靠口碑的疫苗。根据猪只的年龄、体重、健康状况和当地疫情等因素，制定合理的免疫程序。确保疫苗接种部位准确，注射深度适宜，疫苗混合均匀，避免疫苗浪费和接种失败。在疫苗运输、储存和使用过程中，要严格遵循相关规定，避免疫苗污染。在疫苗接种后，要密切观察猪只的免疫反应，如出现异常反应，要及时处理。此外，猪伪狂犬病病毒gE 基因缺失苗免疫接种是预防和控制猪伪狂犬病的有效手段。在实际操作过程中，要关注疫苗的选择、免疫程序的制定、接种方法的规范、防止疫苗污染等方面，确保免疫接种效果。同时，加强猪舍环境卫生管理，提高猪只健康状况，也是提高免疫接种效果的重要因素。综合考虑多种因素，做好猪伪狂犬病病毒gE 基因缺失苗免疫接种工作，有助于保障猪群的健康和生产效益。