TCT 结合HR⁃HPV 基因检测对宫颈癌及癌前病变筛查的临床意义

来鹏 祁发玲 穆廷杰

宫颈癌由宫颈癌前病变发展而来，早期筛查、发现并积极治疗宫颈癌前病变对防治宫颈癌有积极意义［1］。液基细胞学（ThinPrep cytologic test，TCT）检查是在巴氏涂片的基础上应运而生的新技术，其诊断符合率较巴氏涂片更高，但易受诊断医师的主观判断影响，导致漏诊、误诊［2］。研究证实高危型人乳头瘤病毒（high⁃risk human papillomavirus，HR⁃HPV）病毒持续性感染是引起宫颈癌及癌前病变的主要原因［3］。因此，HR⁃HPV 基因检测也是筛查宫颈癌的有效方法。但该方法仅能确诊病毒感染，无法甄别持续性感染这一必要因素［4］。有关研究发现，当TCT 提示非典型鳞状细胞（atypical squa⁃mous cells of undetermined significance，ASCUS）和低度鳞状上皮内病变（low⁃grade squamous intraepi⁃thelial lesion，LSIL）时，可结合HR⁃HPV 基因检测分流高危人群［5］。本研究以组织病理学结果作为诊断标准，分析TCT 与HR⁃HPV 基因检测联合检测对宫颈癌及癌前病变的筛查效能，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2022 年1 月至2022 年12 月于临夏州人民医院妇科门诊筛查宫颈病变者6 762 例，年龄平均（35.24±9.86）岁。纳入标准：①成年女性，有性生活史；②自愿接受TCT、HR⁃HPV 基因检测；③无子宫切除、盆腔放疗史；④签订知情同意书。排除标准：①就诊前已确诊宫颈癌或癌前病变；②无性生活史；③妊娠或哺乳女性；④合并其他恶性肿瘤；⑤有子宫切除、盆腔放疗史；⑥近三个月内有宫颈治疗或宫颈活检史。本研究经院伦理委员会批准同意。

1.2 检查方法及诊断

1.2.1 TCT 检测

于非月经期进行。嘱受检者膀胱截石位，使用窥阴器暴露宫颈后，擦净宫口分泌物，采集样本，提取沉淀细胞及病源微生物，使用DC⁃4212制片染色一体机（广州安必平医药科技股份有限公司）将标本制作成直径1.5 cm 的薄层细胞涂片，自动巴氏染色。由两名经验丰富的病理科细胞学医师读片，参考TBS 分类系统［6］进行诊断：①未发现异常；②异常鳞状上皮细胞：包括ASCUS、LSIL（CIN1）、高度鳞状上皮内病变（High⁃grade Squamous Intraepithelial Lesions，HSIL，CIN2）、鳞状细胞 癌（squamous cell carcinoma，SCC，CIN3）；③异常腺细胞：包括非典型腺上皮细胞（atypical glandularcells，AGC）、原位腺癌（adenocarcinoma⁃in⁃situ，AIS）、腺癌（adenocarcino⁃ma，AC）。除①外，其他均视为阳性。

1.2.2 HR⁃HPV 基因检测

采用人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒（广州安必平医药科技股份有限公司），TCT 标本采集完成后，使用一次性采样拭子刷取宫颈分泌物，以PCR⁃反向点杂交法检测15 种高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73、82），3 种疑似高危型HPV（26、53、66）和10 种低危型HPV（6、11、40、42、43、44、54、61、81、83）。由专业人员采用肉眼观察或分析软件，以见到清晰的蓝紫色圆点为检测结果阳性。

1.2.3 阴道镜和组织病理学检测

对TCT 和（或）HR⁃HPV 基因检测结果异常者行阴道镜和组织病理学检测。严格遵循阴道镜诊断程序进行检查，在宫颈异常部位及可疑浸润癌处取活组织送检，若宫颈光滑，无明显异常则常规取3、6、9、12 等多个位点组织送检。诊断参考文献［7］，分为宫颈正常或慢性炎症（NILM），LSIL（CIN1 级），HSIL（包括CIN3 和大部分的CIN2）和宫颈癌。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0 软件进行数据分析。计数资料以n（%）表示，行χ2检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TCT、HR⁃HPV 基因检查情况

6 762 例受检者中TCT 检查和HR⁃HPV 基因检测阳性分别有705 例和884 例，占比分别为10.43%、13.07%。见表1、2。

表1 TCT 检查结果（n，%）Table 1 TCT results（n，%）

表2 HR⁃HPV 基因检查结果Table 2 HR⁃HPV gene detection results

2.2 组织病理学检查情况

对TCT 和（或）HR⁃HPV 基因检测的1 289 例阳性者行阴道镜及组织病理学检查，共检出阳性838 例，占65.01%，其中CIN1 452 例，占53.94%；CIN2 180 例，占21.48%；CIN3 129 例，占15.39%；宫颈癌77 例，占9.19%。其余451 例均为病检结果正常或慢性炎症。

2.3 TCT 检查、HR⁃HPV 基因检测与病理组织学诊断结果的比较

TCT 检查病理阳性率为40.65%；HR⁃HPV 基因检测病理阳性率49.50%；TCT+HR⁃HPV 基因检测病理阳性率54.38%。TCT+HR⁃HPV 基因检测的病理阳性率显著高于单独TCT 检查和HR⁃HPV基因检测，差异有统计学意义（χ2=48.730、6.168，P＜0.05）。见表3。

表3 TCT 检查及HR⁃HPV 基因检测阳性与病理组织学诊断结果的比较［n（%）］Table 3 Comparison between the positive results of TCT and HR⁃HPV gene detection and pathological results［n（%）］

2.4 TCT 检查、HR⁃HPV 基因检测及联合检测对宫颈癌及癌前病变的诊断价值

以组织病理学诊断≥CIN1 为阳性标准。TCT检查与HR⁃HPV 基因检测联合诊断宫颈病变的灵敏度、准确率均高于TCT 检查与HR⁃HPV基因检测单独诊断，差异有统计学意义（χ2=79.550、41.259、15.145、4.262，P＜0.05）。见表4。

表4 TCT 及HR⁃HPV 基因检测单独及联合诊断的比较Table 4 Comparison of single and combined diagnosis with TCT and HR⁃HPV gene detection

3 讨论

近几年，随着国内多地宫颈癌普查项目的实施，部分地区宫颈癌患病率略有降低，但从全国来看，其患病率仍处于较高水平［8］。宫颈癌前病变及宫颈癌早期可无任何症状，许多受检者在就诊时多已进展为中晚期，治疗已然较为困难［9］。因此，如何早期、高效地筛查具有癌变风险的宫颈癌前病成为临床医师关注的热点。

TCT 技术由巴氏涂片发展而来，与巴氏涂片相比，其在采样环节、保存环节、制片环节和诊断效果上优势更明显，但对宫颈病变的诊断灵敏度欠理想［10］。HR⁃HPV 基因检测一度被视为排除ASCUS 的最佳诊断方法，该方法能同时检测出多种高危型HPV 感染，提高宫颈癌前病变及宫颈癌的检出率，但无法分辨同一探针池中的HPV 亚型，并且易受感染水平、避孕药、阴道冲洗等干扰，导致诊断结果呈假阴性［11］。阴道镜检查作为一种创伤性辅助诊疗手段，其能在宫颈异常部位作定位活检，提高癌前病变的阳性诊断符合率。但临床认为只有当TCT 细胞学检查＞ASCUS 或HR⁃HPV基因检测提示高病毒载量时，才应进一步行阴道镜检查，以避免过度诊疗，造成医疗资源浪费［12］。

本研究TCT 检查阳性者中ASCUS、LSIL、HSIL、SCC 与HR⁃HPV 基因检测阳性者中高危型HPV 感染、疑似高危型HPV 感染、低危型HPV 感染分布与文献［13］报道数据趋一致，但具体数值相差较大，这可能与样本数据、样本来源、实验方法等不同有关，需要进一步研究。以病理组织学活检为最终诊断标准，对TCT、HR⁃HPV 基因检测单独或联合检测结果进行对比分析，结果显示，TCT+HR⁃HPV 基因检测的病理阳性率显著高于单独TCT 检查和HR⁃HPV 基因检测。陆亚玲等［14］研究认为，HR⁃HPV 检查在宫颈癌及癌前病变筛查中的价值略高于TCT，但二者均存在一定程度的漏诊、误诊情况，本研究结果与之基本吻合，提示单独TCT 检查或HR⁃HPV 基因检测对宫颈癌及癌前病变的诊断准确率欠理想。有学者认为，SACUS受检者有发展为癌前病变甚至浸涧癌的风险，需及时处理，但反复TCT 检查或立即行阴道镜检查甚至取宫颈组织送检，可能导致过度治疗，增加不必要的经济费用，加重受检者精神心理压力［15］。李乐等［16］研究发现，在TCT 检查的同时行HPV检查，对宫颈病变受检者来说可提高诊断符合率，减少漏诊情况。本研究中，除特异度外，TCT检查与HR⁃HPV 基因检测联合诊断宫颈病变的灵敏度、准确率均高于TCT 与HR⁃HPV 基因检测单独诊断，提示TCT 与HR⁃HPV 基因检测联合诊断效能更高。

综上，TCT 与HR⁃HPV 基因检测联合对于宫颈病变的早期诊断效能较好，灵敏度、准确率均较高。但本研究联合诊断的特异度较低，此外，本研究未对受检者的吸烟、婚孕史、性生活史、既往病史等资料进行统计，建议今后的研究中全面收集相关信息，以获得更准确的结果。