不同血片递送方式对汕头市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症检测结果的影响探讨

邱少汕

汕头市妇幼保健院检验科，广东 汕头 515000

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD）缺乏症是由于红细胞中的G6PD 先天性缺乏引起的红细胞抗氧化能力减低，当机体摄入氧化性食物，如蚕豆、刀豆，和氧化性药物时，红细胞容易破裂，因而造成溶血性贫血，故又称为蚕豆病。G6PD 缺乏症的致病机理是由于G6PD 基因的突变，红细胞葡萄糖代谢异常，机体摄入氧化性物质时，氧化作用产生的过氧化氢不能被及时代谢还原成水，高浓度的过氧化氢容易导致红细胞膜的氧化损伤甚至破裂。G6PD 缺乏症属于X 性染色体连锁不完全显性遗传病，很多研究［1-3］表明，男性发病率高于女性。G6PD 缺乏症在我国的有一定的发病率，尤其在海南、贵州和两广地区等有较高的发病率，平均发病率约占总人口的4%～15%［4-6］。G6PD 缺乏症发病的临床表现为急性溶血性贫血，并由此产生高胆红素血症，高胆红素血症可导致新生儿黄疸甚至发展为新生儿智力不可逆的损伤，严重危害新生儿的发育健康［7-9］，目前还无法治愈，为终身性疾病，因而我国将G6PD 缺乏症定为新生儿疾病筛查的疾病之一。汕头市自2011 年开展新生儿筛查工作，采血医院通过两种方式将采集后的血滤纸片送至汕头市新生儿疾病筛查中心：一是派专人送达筛查中心，二是通过普通快递的方式送达筛查中心。G6PD活性会随着温度的升高和时间的延长而自然减低，不同的递送方式使得血滤纸片标本到达筛查中心的时间不同，从而影响G6PD的筛查结果。鉴于此，本研究对不同递送方式的筛查阳性结果与召回复查结果进行比较，探讨血滤纸片递送方式对G6PD检测值的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年1 月1 日—2020 年12 月31 日汕头市全市53 个各级助产机构中部分住院分娩的126 249 例新生儿作为研究对象，家属均签署了知情同意书。按递送方式分为派专人递送标本组和普通快递递送标本组，其中25家采血机构通过派专人递送的方式送标本，共82 820例；28家采血机构通过普通快递的方式送标本，共43 429例。

1.2 方法

根据《新生儿疾病筛查血片采集技术规范》的要求，新生儿在出生72 h 后并充分哺乳8 次以上，采集3 滴足跟血滴于专用滤纸上，自然渗透，滤纸正反两面血斑应一致大小，血斑直径需大于8 mm，阴凉处自然晾干后置于封口袋内，4 ℃保存，并在5 d 内送达汕头市新生儿疾病筛查中心进行统一检测，汕头市新生儿筛查中心在收到标本的3 个工作日内完成检测。筛查实验采用芬兰PerkinElmer公司的试剂，在室温下使血斑样品和含有D-6-P 及NAPD的底物试剂孵育震荡50 min后，加入铜试剂使反应速度减慢，使用激发波长355 nm 和发射波长460 nm 进行荧光强度测量，仪器使用芬兰PerkinElmer 公司的VICTOR2D 1420荧光分析仪，G6PD 筛查切值为2.6 IU/gHb，＞2.6 IU/gHb 为正常，≤2.6 IU/gHb 为筛查阳性；确诊实验使用G6PD/6PGD 比值法，使用美国Beckman 全自动生化分析仪及其配套试剂，当G6PD/6PGD＜1.0时确诊为G6PD 缺乏。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0 软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用u检验。计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同递送方式血片收到时间情况

派专人递送标本组每张血滤纸片的采血时间至收到时间的平均天数为（3.9±1.2）d，普通快递递送标本组每张血滤纸片的采血时间至收到时间的平均天数为（8.4±3.5）d，派专人递送标本组血片采血时间至收到时间明显较短，差异有统计学意义（u=513，P＜0.01）。

2.2 不同递送标本方式的检测结果情况

2019—2020 年汕头市一共筛查出1 437 例G6PD 缺乏症阳性，普通快递递送标本组筛查阳性率明显高于派专人递送标本组，差异有统计学意义（P＜0.01）；两组标本确诊率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 不同递送标本方式的检测结果情况例（%）

3 讨论

G6PD 缺乏症患者的临床症状常表现轻重不同，患者不接触氧化性物质时没有症状，当患者接触氧化性物质有时会表现轻微的症状，有时会造成慢性溶血性贫血反应，甚至会产生急性溶血性反应，如果没有得到及时救治，则会对患者包括肾、肝在内的多器官造成不可逆影响［10-12］。G6PD 缺乏症容易造成新生儿病理性黄疸，为新生儿黄疸的一个很常见的诱因，严重时甚至会出现胆红素脑病，导致患儿智力低下，影响患儿终身［13-15］，因此，在新生儿时期进行G6PD 缺乏症筛查意义重大。《新生儿疾病筛查血片采集技术规范》要求滤纸干血片应在采集后的5 个工作日内递送到筛查检测机构，新生儿筛查中心应在3 个工作日内对标本完成检测。汕头市新生儿疾病筛查中心根据该规范，要求各采血机构在血滤纸片采集后5 d 内送达新生儿疾病筛查中心，位于汕头市区的采血机构离筛查中心比较近，大多数是派专人递送新生儿筛查标本，一般1 周递送2～3 次，血片的采集时间至筛查中心收到时间较短。汕头市潮阳区、潮南区、澄海区和南澳县等地区距离筛查中心较远，因此大多数采血机构选择通过普通快递的方式递送标本到新生儿筛查中心，在实际工作中多数是1 周寄1次，有个别单位甚至超过10 d才寄出，导致血片的采集时间至筛查中心收到时间的平均天数要比派专人送标本的时间明显增加。通过普通快递的方式递送标本的血片采集时间至筛查中心收到时间的平均天数为8.4 d，这远大于《新生儿疾病筛查血片采集技术规范》要求的5 d，新生儿筛查中心应当以此次数据调查来加强一些偏远地区采血机构血片采集的管理，规范偏远采血机构血片的采集和递送流程，缩短血片到达新筛中心的时间，保证G6PD 缺乏症筛查的准确性。

相关研究［16-18］表明，G6PD 活性会随着时间增加而降低，这说明保存的时间增加会影响G6PD 活性。新生儿疾病筛查所使用的滤纸干血片送到筛查中心的时间过长，会影响血斑的质量而使G6PD 活性下降，使G6PD 的检测结果阳性率上升，假阳性率增加［19-20］，本研究的结果与此相符。本研究中通过普通快递递送血滤纸片阳性率要明显高于专人递送，但确诊率相近，说明普通快递递送的血滤纸片假阳性率较高。这是由于通过普通快递递送的血滤纸片采血时间至收到时间的平均天数要比派专人送标本的时间明显增加，导致G6PD 活性降低。血滤纸片假阳性率增加的另一个影响因素是保存方式，保存的温度条件也是G6PD 活性的另外一个决定性因素，因为G6PD 是蛋白质，存放的温度过高会逐渐使蛋白质活性改变，因而影响G6PD 的活性。如果保存温度太高也会导致G6PD 活性降低［21-23］，出现假阳性。血片采集完成后应注意保存的温度环境，派专人递送标本的单位在送标本时通常是把血滤纸片置于冰盒中运送，有效地维持了G6PD 活性；而血片如果通过普通快递递送往往不能保证运送时的温度要求，温度过高会导致G6PD 活性降低。假阳性结果的出现会造成召回率和召回数增加，不仅增加了筛查成本，同时也给疑似G6PD 缺乏症患儿的家属带来不必要的经济和心理上的负担。解决这个问题可以通过改变递送标本的方式，派专人递送血片标本，确实无法做到派专人递送标本的单位应采用冷链快递递送血片，缩短标本寄出的时间，最好是1周至少寄出2 次，缩短采血时间至筛查中心收到的时间，才能有效维持G6PD 活性，减少假阳性率，提高G6PD 检测的准确性。

综上所述，不同的血片递送方式会直接影响G6PD 缺乏症筛查阳性的检出率。通过本次的调查研究，明确了这段时间汕头市新生儿疾病筛查存在的有关递送标本方式的问题，在接下来的工作种应重点解决这个问题；同时，汕头市新生儿疾病筛查中心应对确诊为G6PD 缺乏症的患儿家属发放G6PD 缺乏症注意事项，医生向家属详细解释患儿平时生活中应如何避免接触氧化性物质，预防溶血性疾病的发生，对患儿身心的健康成长、人口身体素质的提高有重大意义。