高效液相色谱-串联质谱法测定草莓中4 种苯甲酰脲类农药残留

王 妙，王秀丽，郐 鹏，王振东

（威海市食品药品检验检测研究院，山东 威海 264210）

草莓是世界上用量最大的浆果之一，它富含氨基酸、维生素等多种营养物质，其中含有的多酚类物质不仅对人体生长发育有良好的促进作用[1-2]，还能起到消炎和抑制癌细胞生长的作用[3-4]。由于草莓以大棚种植为主，高温高湿的大棚环境极易滋生病菌而使其受到害虫侵害。为保证草莓的品质和成果率，种植户会在草莓种植过程中使用多种农药，导致草莓中农药残留检出种类繁多[5-6]，因此需要建立一种简便快速的检测方法，以便相关部门对草莓进行安全监管。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

本地市场采购的甜宝草莓；乙腈，色谱纯，赛默飞世尔科技（中国）有限公司；硫酸镁（无水）、氯化钠，均为分析纯，天津市致远化学试剂有限公司；氟苯脲、氟虫脲、除虫脲、灭幼脲，浓度均为100 μg·mL-1，TMstandard。

1.2 仪器与设备

Qtrap 6500 液相色谱-质谱联用仪，美国AB SCIEX；V4DS025 旋涡振荡器，德国IKA 有限公司；G-16C 高速冷冻离心机、SQP PRACTUMl102-1CN 分析天平（感量0.01 g）、SQP QUINTIX224-1CN分析天平（感量0.000 1 g），均购自德国赛得利斯有限公司；MB550 组织捣碎机，德国WIGGENS 有限公司；GM300 刀式研磨仪，德国莱驰有限公司；MS-NANO-C NANO 净化管，博纳艾杰尔科技。

1.3 标准溶液配制

混合标准储备溶液：准确量取氟苯脲、氟虫脲、除虫脲和灭幼脲标准品各1.00 mL 到10.00 mL 容量瓶内，用乙腈定容至刻度，配制成浓度10 mg·L-1的混合标准储备液，4 ℃冷藏避光保存，有效期3 个月。

混合标准工作溶液：分别准确吸取0.01 mL、0.02 mL、0.05 mL、0.10 mL、0.50 mL、1.00 mL和2.00 mL混合标准储备液，然后用乙腈定容至10.00 mL，分别配制成质量浓度是0.01 μg·mL-1、0.02 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1、1.00 μg·mL-1和2.00 μg·mL-1的标准系列工作液，现配现用。

1.4 样品前处理

1.4.1 制备样品

称取样品500 g，切碎其可食用部分（不可用水洗），并用捣碎机把样品加工成浆状。

1.4.2 提取样品

称取匀浆试样10.0 g（准确到0.1 mg），放到50.0 mL离心管内，再加入10.0 mL 乙腈溶液，通过1 min 的涡旋振荡，然后在高速冷冻离心机上5 000 r·min-1离心5 min，先加入氯化钠1.0 g，经过1 min 涡旋振荡，再加入无水硫酸镁3.0 g，再经过1 min 涡旋振荡，然后在高速冷冻离心机上6 000 r·min-1离心10 min，留取上清液待测。

1.4.3 净化样品

量取上清液1.0 mL，加入到博纳艾杰尔MSNANO-C 净化管中，涡旋振荡1 min，于高速冷冻离心机中8 000 r·min-1离心5 min，将上清液经过0.22 μm有机相滤膜过滤，以待上机测定。

1.5 仪器条件

1.5.1 液相色谱条件

色谱柱：C18柱，Kinetex®（100 mm×2.1 mm，2.6 μm 或1.8 μm）；柱温：30 ℃；流速：0.3 mL·min-1；进样量：5 μL；流动相：A（1%甲酸水溶液）、B（乙腈），梯度洗脱详情见表1。

表1 液相色谱的梯度洗脱条件表

1.5.2 质谱条件

离子源：电喷雾源；扫描方式：负离子模式；分辨率：单位分辨率；电喷雾电压：5 500.0 V；离子源温度：550 ℃；雾化气压力：50.00 psi；辅助气压力：50.00 psi；气帘气压力：35.00 psi。其他质谱条件见表2。

表2 4 种苯甲酰脲农药质谱多反应监测情况表

2 结果与分析

2.1 标准品色谱图

在上述色谱、质谱条件下，对氟苯脲、氟虫脲、除虫脲和灭幼脲标准品进行上机测定，色谱图见图1。结果发现，4 种苯甲酰脲类农药的保留时间分别为氟虫脲（9.27 min）、氟苯脲（8.67 min）、除虫脲（7.81 min）和灭幼脲（7.98 min）。

图1 4 种苯甲酰脲类农药标准品色谱图

2.2 线性方程和相关性

按照1.3 配制的混合标准工作溶液进行线性回归分析，用所得结果绘制农药标准曲线，最终通过空白基质加标的方式，确定4 种物质的方法检出限（以S/N≥3）为0.01～0.02 mg·kg-1。4 种农药在0.05～2.00 μg·mL-1时，浓度与峰面积呈现出良好的线性关系，相关系数均在0.999 以上，详见表3。

表3 线性回归方程和相关性表

2.3 回收率和精密度

分别向空白样品中添加浓度为0.01 mg·kg-1、0.02 mg·kg-1的4 种苯甲酰脲类农药，进行6 次平行测定，按照1.4 前处理方法提取，1.5 仪器条件测定加标后样品含量并计算加标回收率，结果见表4。结果发现平均回收率为85.2%～92.5%，相对标准偏差为2.2%～7.9%。

表4 4 种苯甲酰脲类农药的加标回收率表

3 结论

本文以高效液相色谱-串联质谱法为基础，建立了草莓中苯甲酰脲类农药残留快速测定的方法，平均回收率为85.2%～92.5%，相对标准偏差为2.2%～7.9%，能够满足草莓等果蔬质量安全监测量大和高频的检测需求，为有效控制草莓质量安全提供了可靠的技术保障。