不孕症患者生殖道支原体、衣原体感染及药敏分析

姚观昀 蔡丽萍 詹华深 杨川艺 刘媛娉 陈祖阵 黄海燕

生殖道感染是指生殖道受细菌、霉菌、衣原体、支原体等病原微生物感染的总称。据统计, 我国常见的生殖道感染患病率为40.2%, 且患病率呈逐年递增的趋势［1］。生殖道感染中常见的病原体主要有支原体和衣原体, 且随着抗菌药物的滥用, 其病原体的耐药性也发生了改变。支原体和衣原体感染可引起宫颈炎、尿道炎和前列腺炎等生殖道疾病, 这些疾病也是导致女性不孕、早产及流产的主要因素。而支原体感染是引起女性不孕的主要病原体, 支原体可寄生在人体各种细胞上, 如输卵管细胞、泌尿生殖道、呼吸道等, 常见的衣原体和支原体类型包括沙眼衣原体、解脲支原体和人型支原体［2,3］。女性尿道炎、宫颈炎和盆腔炎常见的病原体为沙眼衣原体, 研究表明, 支原体耐药性与抗菌药物的滥用密切相关［4］。因此, 分析不孕症患者生殖道衣原体、支原体的感染率, 并根据药敏结果确定支原体敏感药物, 对不孕症患者生殖道感染的临床治疗、保障女性生殖健康具有重要意义。本研究选取福建省三明市中西医结合医院诊治的130 例不孕症患者为研究对象, 检测患者生殖道支原体、衣原体感染率, 并分析支原体对常规抗菌类药物的耐药情况, 旨在为改善不孕症患者生殖道感染的临床症状, 合理使用抗菌类药物提供参考依据, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020 年1 月～2021 年12 月福建省三明市中西医结合医院诊治的130 例不孕症患者为研究对象, 患者年龄22～41 岁, 平均年龄(30.56±3.48)岁；病程1～3 年, 平均病程(1.67±0.45)年。纳入标准：①患者年龄≥22 岁；②符合世界卫生组织(WHO)制定的不孕症的诊断标准［5］；③临床资料完整,且依从性良好；④近1 个月内未使用过相关抗菌药物进行治疗。排除标准：①合并其他严重心脏、肾脏等重要器官功能障碍的患者；②合并严重感染性疾病或免疫缺陷类疾病的患者；③有严重精神疾病或精神病史的患者；④不能配合完整研究内容的患者。

1.2 方法 取样：利用阴道扩张器扩张阴道, 使宫颈暴露, 先用无菌大棉签擦拭阴道及宫颈分泌物, 再将无菌拭子插入子宫颈管内约2 cm 处, 旋转无菌拭子至少30 s 后取出宫颈分泌物, 0.5 h 内送检。采用支原体培养、鉴定药敏试剂盒(改良肉汤稀释法)(珠海浪峰生物技术有限公司生产), 沙眼衣原体抗原检测试剂盒(乳胶法)(艾博生物医药有限公司生产)对130 例不孕症患者的生殖道分泌样本中的支原体进行筛查及药敏分析, 将待测生殖道分泌物样本接种于培养基中, 控制培养温度在37℃左右, 培养时间48 h, 严格按照试剂盒说明书要求检测药物敏感性, 包括交沙霉素、克拉霉素、美满霉素、多西环素、阿奇霉素等。按照衣原体抗原检测说明书操作, 进行衣原体抗原检测。

1.3 观察指标 分析不孕症患者基本情况, 生殖道支原体、衣原体感染率, 生殖道支原体药敏结果；比较原发性不孕症和继发性不孕症患者病原体感染情况。①衣原体感染：10～20 min 内, 检测板仅出现1 条红色质控线(C)表示衣原体阴性；同时出现1 条红色检测线(T)和1 条红色质控线(C)表示衣原体阳性。②支原体感染：培养基持续48 h 不变色表示支原体阴性；培养基中解脲支原体鉴定孔在24 h 内由橙黄色变为红色表示解脲支原体阳性；培养基中人型支原体鉴定孔在48 h 内由橙黄色变为红色表示为人型支原体阳性。③单纯衣原体感染：在解脲支原体和人型支原体感染均阴性情况下, 衣原体感染阳性；混合感染：解脲支原体感染阳性, 人型支原体感染阴性, 衣原体感染阳性。④单纯支原体感染：在衣原体感染阴性情况下, 解脲支原体感染或解脲支原体与人型支原体感染。⑤药敏分析：药敏孔变红, 表示孔中有支原体生长, 显示支原体对该种抗生素耐药或者中敏, 反之则为敏感。以An 表示高浓度药敏孔, Bn 表示低浓度药敏孔。敏感：An(-)Bn(-)；中敏：An(-)Bn(+)；耐药：An(+)Bn(+)。

1.4 统计学方法 采用SPSS22.0 统计学软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不孕症患者基本情况分析 130 例不孕症患者的平均年龄为(30.56±3.48)岁, 其中年龄＞35 岁的患者54 例, 占41.5%；居住在农村的患者79 例, 占比60.8%；平均病程为(1.67±0.45)年, 其中病程≥2 年的患者68 例, 占比52.3%；原发性不孕症患者57 例, 占比43.8%。见表1。

表1 130 例不孕症患者的基本情况分析 (n, %)

2.2 不孕症患者生殖道支原体、衣原体感染率分析130 例不孕症患者中检出支原体、衣原体共62 例, 总感染率为47.7%, 主要为生殖道解脲支原体、人型支原体和沙眼衣原体, 其中单独检出解脲支原体28 例,感染率为45.1%, 单独检出人型支原体4 例, 感染率为6.5%, 单独检出沙眼衣原体14 例, 感染率为22.6%, 检出解脲支原体+人型支原体8 例, 感染率为12.9%, 检出解脲支原体+沙眼衣原体6 例, 感染率为9.7%, 检出人型支原体+沙眼衣原体0 例, 感染率为0, 检出解脲支原体+人型支原体+沙眼衣原体2 例, 感染率为3.2%。见表2。

表2 130 例不孕症患者生殖道支原体、衣原体感染率分析 (n, %)

2.3 原发性不孕症和继发性不孕症患者病原体感染情况比较 继发性不孕症患者生殖道解脲支原体、人型支原体、沙眼衣原体、解脲支原体+人型支原体、解脲支原体+沙眼衣原体、解脲支原体+人型支原体+沙眼支原体感染率与原发性不孕症患者比较, 差异无统计学意义(P＞0.05)。见表3。

表3 原发性不孕症和继发性不孕症患者病原体感染情况比较［n(%)］

2.4 不孕症患者生殖道支原体药敏结果分析 40 例支原体阳性菌株对交沙霉素、诺氟沙星、环丙沙星、罗红霉素、多西环素、氧氟沙星、阿奇霉素、克拉霉素、美满霉素、红霉素等10 种抗菌药物的药敏试验结果显示, 支原体耐药的药物包括氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、罗红霉素、阿奇霉素和美满霉素, 其中单纯解脲支原体耐药性较高的有氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、罗红霉素、阿奇霉素和美满霉素, 单纯人型支原体耐药性较高的有氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、阿奇霉素和美满霉素, 解脲支原体混合人型支原体耐药性较高的有氧氟沙星、阿奇霉素。支原体敏感的药物包括克拉霉素、交沙霉素、多西环素、红霉素, 其中单纯解脲支原体敏感性较高的药物有多西环素、交沙霉素、红霉素和克拉霉素, 单纯人型支原体敏感性较高的药物有多西环素和克拉霉素, 解脲支原体混合人型支原体敏感性较高的药物有多西环素和克拉霉素。见表4。

表4 不孕症患者生殖道支原体药敏结果分析［n(%)］

3 讨论

不孕症分为原发性不孕和继发性不孕, 导致不孕症的原因为男性不育和女性不孕, 支原体、衣原体感染是引起男性不育或女性不孕的主要原因［6］。支原体是介于细菌和病毒间的原核微生物, 其可在男性或女性泌尿生殖道内繁殖, 当机体免疫能力下降或炎症反应导致内环境紊乱后, 支原体会大量繁殖并造成生殖道感染, 从而影响男性生殖道功能与精子质量, 引起女性尿道炎、宫颈炎和盆腔炎, 甚至流产［7］。支原体通过在机体生殖道黏膜细胞表层粘附, 导致细胞损伤或死亡, 从而引起局部黏膜炎症反应, 最终导致输卵管功能障碍, 其还通过粘附在精子细胞表面, 阻挠精卵细胞结合, 发生不孕不育。解脲支原体、人型支原体在女性泌尿生殖道中较为常见, 是引起女性生殖道感染和不孕症的主要病原体, 同时还与不良妊娠结局和新生儿慢性疾病有关［8］。沙眼衣原体属革兰阴性病原体,是一种含有脱氧核糖核酸和核糖核酸, 在细胞内寄生,能够以二次分裂方式进行繁殖的原核细胞型微生物。沙眼衣原体与不良妊娠结局的相关性较高, 衣原体感染细胞使得细胞产生抗原, 诱导机体发生自身免疫反应, 恶化母胎耐受机制, 造成不良妊娠结局［9］。沙眼衣原体可寄生于机体黏膜上皮细胞中, 机体遭受感染后能够生成特异性细胞免疫和体液免疫, 但通常免疫力不强, 且持续较短, 可使患者出现免疫病理损伤、隐性感染、反复感染［10,11］。沙眼衣原体可分为两种形态, 即原体和始体, 原体具有高度传染性且在细胞外呈孢子样；而始体体积较大, 形状不规则, 主要在细胞内进行复制, 代谢不活跃［12,13］。沙眼衣原体主要存在于阴道分泌物、精液中, 可通过亲密接触传播。当女性患者遭受沙眼衣原体感染后, 沙眼衣原体可侵入子宫颈、输卵管等柱状上皮细胞, 使宫颈局部出现充血、肿大, 促使分泌物产生, 影响精子向子宫上行, 进而导致患者出现不孕不育, 此外患者经感染后还可出现盆腔炎、宫颈炎等疾病。解脲支原体是一种最小原核生物, 介于细菌与病毒之间, 是性传播疾病的重要病原体之一。解脲支原体可定植于生殖道黏膜上皮细胞、尿道, 性接触是感染解脲支原体的主要途径, 此外接触污染物也可导致感染［14,15］。解脲支原体在泌尿生殖道上皮细胞定植后, 通过释放神经毒素、促使过氧化氢生成、吸收细胞膜上的脂质与胆固醇等, 造成细胞损伤。当女性患者遭受支原体感染后, 支原体能够侵入患者输卵管黏膜, 使黏膜上皮细胞凋亡, 导致输卵管堵塞或粘连, 影响卵细胞进入子宫, 进而导致不孕不育［16,17］。此外, 支原体感染细胞后能够激活机体免疫应答, 导致抗子宫内膜的抗体生成, 影响子宫内膜功能, 使受精卵难以着床, 进而诱发不孕不育。女性患者经支原体感染后还可出现宫颈炎、阴道炎、盆腔炎、子宫内膜炎等疾病。本研究收集130 例生殖道感染的不孕症患者为研究对象, 检测并分析支原体、衣原体在患者中的阳性感染率及对抗菌类药物的耐药性和敏感性。

蔡晶晶等［18］通过观察育龄期不孕症患者支原体、衣原体感染情况及药敏结果发现, 育龄期不孕症患者衣原体、支原体感染率较高, 耐药谱也较复杂, 支原体对强力霉素和阿奇霉素的敏感性较高。万优萍［19］通过观察并分析沙眼衣原体和解脲支原体与不孕不育症患者的关系发现, 生殖道感染沙眼衣原体和解脲支原体与不孕不育症具有相关性, 药敏结果发现, 解脲支原体对阿奇霉素、环酯红霉素和强力霉素等抗菌药物敏感性较高。本研究结果显示, 130 例不孕症患者中检出支原体、衣原体共62 例, 总感染率为47.7%；感染类型主要为生殖道解脲支原体、人型支原体和沙眼衣原体。对支原体敏感的药物包括克拉霉素、交沙霉素、多西环素、红霉素, 其中单纯解脲支原体敏感性较高的药物有多西环素、交沙霉素、红霉素和克拉霉素,单纯人型支原体敏感性较高的药物有多西环素和克拉霉素。与上述文献研究结果相符, 结果提示, 诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星等抗菌类药物的长期不规范使用导致支原体染色体基因位点发生突变, 使得细胞膜通透性降低, 细胞内药物积累浓度降低从而产生耐药性。多西环素和克拉霉素的支原体敏感性均较高, 可将这两种抗菌药物作为不孕症患者支原体感染的首选药物,但需要根据临床医师建议进行用药, 防止耐药率升高,从而保障临床疗效。

综上所述, 不孕症患者生殖道支原体、衣原体感染率较高, 耐药性和敏感性较为复杂, 建议临床首选药物为多西环素和克拉霉素, 降低不孕症患者生殖道感染发生率, 保障女性生殖健康。同时, 本研究也存在不足之处, 本研究选取的样本量为130 例, 样本量需要增大, 对衣原体的耐药性及敏感性需进一步研究。