不同贮藏条件下吴茱萸饮片稳定性考察*

罗干明，朱小凤，江 珊

（广东省佛山市食品药品检验检测中心，广东 佛山 528000）

吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Euodia rutaecarpa（Juss.）Benth.、石虎Euodia rutaecarpa（Juss.）Benth.var.officinalis（Dode）Huang 或疏毛吴茱萸Euodia rutaecarpa（Juss.）Benth.var.bodinieri（Dode）Huang 的干燥近成熟果实，功效为散寒止痛、降逆止呕、助阳止泻［1］。吴茱萸的主要药效成分有吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素等［2-6］，同时也是2020 年版《中国药典（一部）》中吴茱萸药材及饮片质量控制的指标。吴茱萸为“陈久者良”的6 种药材之一，有研究认为，随着贮藏时间的延长，吴茱萸药材中挥发油总量和柠檬苦素含量均有下降趋势，吴茱萸碱和吴茱萸次碱的总含量均有增加趋势［7-10］。目前，市场销售的吴茱萸药材大多未经陈化即制成饮片。为更好地控制吴茱萸饮片的质量，本研究中以目前常用的牛皮纸袋、聚乙烯塑料袋（真空、非真空）包装吴茱萸饮片，进行吴茱萸饮片长期留样稳定性试验，以性状、水分、浸出物及多指标成分含量的变化考察贮藏条件对吴茱萸饮片质量的影响，以及指标性成分含量在不同干燥、光照、避光条件下的稳定性，探讨了影响吴茱萸药材及饮片质量的主要因素，为吴茱萸饮片的贮藏及含吴茱萸制剂的开发提供了参考。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters E2695e 型高效液相色谱仪（美国Waters 公司）；AE100 型电子天平（瑞士Mettler Toledo 公司，精度为0.1 mg）；KQ-500DA 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，功率为300 W，频率为40 kHz）。

1.2 试药

吴茱萸饮片（市售，12 批样品信息见表1）；吴茱萸碱对照品（批号为110802-202111，含量为99.8%），吴茱萸次碱对照品（批号为110801 - 202109，含量为99.3%），柠檬苦素对照品（批号为110800-201707，含量为97.9%），均购自中国食品药品检定研究院；乙腈为色谱纯，水为自制超纯水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 贮藏稳定性

2.1.1 贮藏条件

将吴茱萸饮片样品分别采用牛皮纸袋、聚乙烯塑料袋（真空和非真空）进行包装，放在药品阴凉柜（温度为16～17 ℃，相对湿度为50%～60%）中贮藏，分别在0～3年内取样。

2.1.2 性状

按表2 中的条件分别贮藏吴茱萸饮片，结果12 批样品的表面呈暗黄绿色至褐色，气味芳香浓郁，放置后颜色逐渐加深；其中，牛皮纸袋包装的样品气味稍变淡，性状无显著变化，符合标准规定。详见表2。

表2 不同贮藏年限吴茱萸饮片贮藏稳定性试验结果Tab.2 Results of the stability test of Evodiae Fructus decoction pieces with different storage years

2.1.3 鉴别

水分：按2020 年版《中国药典（四部）》通则0832水分测定法测定，结果水分为9.34%～14.13%。除真空聚乙烯塑料袋包装样品外，其余样品放置后水分均逐渐减少，差异不大，较稳定，均符合标准规定（不得过15.0%）。详见表2。

浸出物：按2020 年版《中国药典（四部）》通则2201浸出物测定法项下醇溶性浸出物浸定法测定，以稀乙醇为溶剂，结果浸出物为42.75%～51.15%，放置后浸出物变化不大，较稳定，均符合标准规定（不得少于30.0%）。详见表2。

2.1.4 含量测定

1）色谱条件

色谱柱：Waters Kromasil C18柱（200 mm ×4.6 mm，5 μm）；流动相：［乙腈- 四氢呋喃（25∶15，V/V）］-0.02%磷酸溶液（35∶65，V/V）；流速：1.0 mL/ min；检测波长：215 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。

2）溶液制备

取吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素对照品各适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL 含吴茱萸碱80 μg 和吴茱萸次碱50 μg、柠檬苦素0.1 mg 的混合对照品溶液。取样品粉末（过3 号筛）0.3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25 mL，称定质量，浸泡1 h，超声处理（功率为300 W，频率为40 kHz）40 min，放冷，再次称定质量，用70%乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

3）含量测定

12 批样品的含量测定结果见表2。结果显示，所有样品中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的总含量均符合标准规定（不得少于0.15%），其中2批样品中柠檬苦素含量不符合标准规定（不得少于0.20%）；在贮藏期内，吴茱萸碱和吴茱萸次碱的总含量随着贮藏年限的延长有一定增加趋势，柠檬苦素含量随着贮藏年限的延长有一定下降趋势。

2.2 指标性成分含量的稳定性考察

干燥条件稳定性试验：取7 号样品粉末（过3 号筛）2 g，平铺于干燥的扁形称量瓶中，精密称定，开启瓶盖，在0，60，80，105 ℃温度条件下分别干燥0，4，6，8 h，将瓶盖盖好，移至干燥器中，放冷30 min，精密称定，分别取样，按2.1.4项下色谱条件测定样品含量。结果显示，吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素的含量基本稳定。详见表3。

表3 吴茱萸饮片中3种指标性成分含量在不同干燥条件下的稳定性试验结果（%）Tab.3 Results of the stability test of three index components in Evodiae Fructus decoction pieces under different drying conditions（%）

光照条件稳定性试验：取7 号样品的供试品溶液，分别置日光灯下（光照强度159 lx）照射0，4，8，16，32 h后，按2.1.4项下色谱条件测定样品含量。结果显示，吴茱萸次碱的光稳定性较好；吴茱萸碱和柠檬苦素对光照较敏感，随着光照时间的延长而逐渐降解。详见表4。

表4 吴茱萸饮片中3种指标性成分含量在不同光照时间下的稳定性试验结果（%）Tab.4 Results of the stability test of three index components in Evodiae Fructus decoction pieces under different lighting conditions（%）

避光条件稳定性试验：取7号样品供试品溶液，分别于室温条件下避光放置0，1，3，5 d后，按2.1.4项下色谱条件测定样品含量。结果显示，在避光条件下，吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素含量基本稳定。详见表5。

3 讨论

历代文献记载吴茱萸“陈久者良”，是由于放置一段时间后，其中的化学成分含量有所下降，药性缓和［7］。本研究中以性状、水分、浸出物和含量为评价指标，考察评价指标在3 年贮存过程中的变化。结果显示，在3 年贮藏期内，吴茱萸饮片中的吴茱萸碱和吴茱萸次碱总含量有升高趋势，表明吴茱萸饮片贮藏有利于生物碱类含量的转化与积累，从而提高药效；但柠檬苦素含量有下降趋势，饮片颜色逐渐变深，气味变淡，影响疗效。可见，即使在阴凉条件下，吴茱萸饮片的贮藏时间也不是越久越好。挥发油是吴茱萸的有效成分之一，密封不利于其有毒性挥发油的挥发［7］，故建议吴茱萸药材陈化后再制成饮片。

市场销售的吴茱萸药材按成熟程度不同分为大花、中花、小花3种规格［11-12］，其中中花占主流。规格对吴茱萸药材质量的影响显著［9］，柠檬苦素含量不合格的2 批吴茱萸饮片均为大花。《中药材商品规格等级：吴茱萸》中记载，“当前市场上仍存在吴茱萸大花规格，顶端多开裂，不符合药典性状描述”，故将大花规格排除在外，建议加强对大花规格吴茱萸饮片的监管。

在以指标性成分含量探讨吴茱萸“陈久者良”和制剂稳定性方面，其含量变化主要由降解和成分之间的相互转化导致，影响因素主要有温度、湿度、光照等［13-16］。张慧芳等［8］认为，临床应用时应将吴茱萸密封并置遮光处保存，且贮藏年限不能太久。温英丽等［9］认为，柠檬苦素含量随陈放时间的延长而降低显著，推测与内酯类成分不稳定、易水解有关。本研究结果显示，在干燥条件下，吴茱萸指标性成分的含量基本稳定，表明短时间的高温处理不会导致吴茱萸指标性成分损失，但同时测定高温处理前后样品中挥发油的含量，发现挥发性成分损失明显，挥发油成分的大量减少必然影响其药理学活性，故低温环境有利于其长期稳定贮存；在避光条件下，吴茱萸指标性成分的含量基本稳定，表明柠檬苦素在提取时不易水解；在光照作用下，除吴茱萸次碱外，吴茱萸碱和柠檬苦素含量均不稳定，表明光是影响吴茱萸质量的主要因素。因此，在阴凉、遮光条件下，吴茱萸饮片可贮藏较长时间；在分析和开发含吴茱萸药材成分的制剂时，应尽量避光操作；在应用吴茱萸饮片时，不能只注重其是否陈久，也应关注其贮藏时间及条件［8］。