不同供应商十八醇对盐酸吗啡缓释片关键质量属性的影响*

董泽民，余春梅，熊莉平，徐 洁，罗立骏，曾令高△

（1.西南药业股份有限公司，重庆 400038； 2.重庆市食品药品检验检测研究院·国家药品监督管理局麻醉精神药品质量监测重点实验室，重庆 401121）

癌性疼痛临床治疗主要采用三阶梯疗法，吗啡为第三阶梯代表药物，主要用于治疗中度或重度癌性疼痛，但近年来有报道其可用于治疗急性心肌梗死并急性肺水肿［1］。目前，国内上市的吗啡缓释片仅有硫酸吗啡缓释片（商品名美施康定，萌蒂< 中国> 制药有限公司）和盐酸吗啡缓释片（商品名美菲康，西南药业股份有限公司）。盐酸吗啡缓释片以十八醇为缓释骨架材料，通过熔融法制粒压片包衣，产品在体内外均具有12 h 缓慢释放的特征，临床疗效显著［2-5］，可克服吗啡生物半衰期短、需频繁给药的缺点。十八醇作为盐酸吗啡缓释片的释药控制型辅料，其来源变化可能会对产品关键质量属性造成影响。根据《已上市化学药品药学变更研究技术指导原则（试行）》［6］，口服缓释制剂处方中释药控制性辅料的供应商变更属于微小变更，变更后样品应符合质量标准规定，药物溶出曲线应与变更前一致，应对变更后生产的样品进行稳定性考察。本研究中采用不同供应商的十八醇制备盐酸吗啡缓释片，考察其对制剂晶型、硬度、脆碎度、含量、有关物质、溶出曲线等关键质量属性的影响及制剂的稳定性。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

LD3100-1 型电子天平（沈阳龙腾电子有限公司，精度为十分之一）；DF-101S型集热式恒温加热搅拌器（郑州科丰仪器设备有限公司）；YK - 160 型摇摆式颗粒机（常州市振力干燥设备有限公司）；ZP10A型旋转式压片机（北京新龙立科技有限公司）；BG1-5 型高效包衣机（中国航空工业集团公司北京航空制造工程研究所）；SHH-500SD型药品稳定性试验箱，SHH-300GD-2 型药品强光照射试验箱，均购自重庆市永生实验仪器厂；SY-3型片剂多用测定仪（上海黄海药检仪器有限公司）；ME203E型电子天平（梅特勒-托利多仪器<上海> 有限公司，精度为千分之一）；FADT-1202RC型自动溶出度仪（上海富科思分析仪器有限公司）；1260VWD型高效液相色谱仪（Agilent 科技有限公司）；XRD-700010300型X射线粉末衍射仪（日本Shimadzu公司）。

1.2 试药

盐酸吗啡原料药（青海制药厂有限公司，批号为20171004）；十八醇（供应商A，湖南尔康制药股份有限公司，批号为105220170602；供应商B，江西阿尔法高科药业有限公司，批号为20180101）；羟丙甲纤维素（陶氏化学公司，批号为D011F3CL01）；硬脂酸镁（湖州展望药业有限公司，批号为20170115）；胃溶型薄膜包衣预混剂（上海卡乐康包衣技术有限公司，批号为SH599531）；水为纯化水；吗啡对照品（中国药品生物制品检定所，批号为043-9209，含量为100.0%）；杂质A（可待因）对照品（批号为170317，含量为94.2%），杂质B（伪吗啡）对照品（批号为170720，含量为97.9%），杂质C（东罂粟碱）对照品（批号为170718，含量为95.1%），杂质D（10 - 羟基吗啡）对照品（批号为170914，含量为95.9%），杂质E（吗啡酮）对照品（批号为170520，含量为92.3%）；杂质F（N-氧吗啡）对照品（批号为170523，含量为94.3%），购于上海医药工业研究总院。

2 方法与结果

2.1 原辅料相容性试验

按《化学药物制剂研究基本技术指导原则》［7］中的相关要求进行原辅料相容性试验。将盐酸吗啡、盐酸吗啡分别与供应商A 和B 的十八醇混合物在强光照射条件［照度（5 000 ± 500）lx，紫外100 μW/ cm2）和高温高湿条件［60 ℃，相对湿度（RH）75%］下考察30 d，分别于第5，10，30 天取样，比较性状、有关物质的变化及吸湿增重等项目。

吸湿增重测定：照2020 年版《中国药典（四部）》中通则9103 药物引湿性试验指导原则［8］485测定。取干燥的具塞玻璃称量瓶，于试验前1 d 置高温高湿箱（温度60 ℃，RH 75%）内，精密称定质量（m1）；取原料或原辅料混合物适量，平铺于称量瓶中，厚度约1 mm，精密称定质量（m2）。将称量瓶敞口，并与瓶盖同置上述高温高湿条件下5，10，30 d，盖好称量瓶盖，精密称定质量（m3）。吸湿增重（%）=（m3-m2）/（m2-m1）×100%。

有关物质测定：照2020 年版《中国药典（四部）》通则0512 高效液相色谱（HPLC）法［8］61测定。取原料或原辅料混合物适量（约相当于盐酸吗啡60 mg），置50 mL容量瓶中，加溶剂（1%醋酸溶液，下同）40 mL，振摇、超声使盐酸吗啡溶解，加溶剂定容，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密量取1 mL，加溶剂稀释至盐酸吗啡质量浓度为2.4 μg/mL，作为对照品溶液；另取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、吗啡对照品各适量，加溶剂溶解，制成每1 mL 含杂质A，B，C，D，E，F 各6 μg及吗啡24 μg的溶液，作为系统适用性试验与杂质峰定位溶液。填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相为庚烷磺酸钠溶液（A，取庚烷磺酸钠1.01 g，加水1 000 mL使溶解，用磷酸调pH 至2.6）-甲醇（B），梯度洗脱；检测波长为230 nm；柱温为35 ℃；流速为1.5 mL/min。取系统适用性试验与杂质峰定位溶液20 μL注入液相色谱仪，各色谱峰间的分离度均符合要求，吗啡色谱峰保留时间约为17 min。精密量取对照品溶液与供试品溶液各20 μL，分别注入液相色谱仪。供试品溶液色谱图中，如有与系统适用性试验溶液中杂质保留时间一致的色谱峰，则按加校正因子的主成分自身对照法以峰面积计算各杂质的含量。

性状：由于十八醇的熔点为57～60 ℃，故高温高湿条件下盐酸吗啡和十八醇混合物会熔融形成块状。2 个供应商的十八醇与盐酸吗啡混合物在强光照射及高温高湿条件下放置30 d 与0 d 相比有关物质无变化，表明2 个供应商的十八醇与盐酸吗啡相容性良好，两者无相互作用。结果见表1。

2.2 盐酸吗啡缓释片制备

盐酸吗啡熔点较高且对热稳定，故采用熔融制粒法制备盐酸吗啡缓释片。将盐酸吗啡、羟丙甲纤维素进行预混，加热十八醇，根据物料状态可适当搅拌至其完全熔化，加入盐酸吗啡、羟丙甲纤维素预混物，不断搅拌至原辅料混匀，倒出物料，不断搅拌使其散热均匀，冷却至半固体状时用摇摆制粒机制粒，将颗粒整粒后加入硬脂酸镁进行总混，使用旋转压片机将总混颗粒压成素片，最后采用胃溶型薄膜包衣预混剂制备包衣液进行包衣。

2.3 十八醇对盐酸吗啡缓释片关键质量属性的影响

晶型：使用X 射线粉末衍射仪检测盐酸吗啡、十八醇及盐酸吗啡缓释片的晶型。测试条件为铜靶，管电流为40 mA，管电压为40 kV，步长为0.013°，扫描范围为3°～45°。将样品均匀置塑料盘中压平，放入样品台操作。结果2 个供应商的十八醇晶型相同，其制备的盐酸吗啡缓释片晶型也相同；盐酸吗啡缓释片的主要晶型特征峰与十八醇相似，且十八醇在片剂制备前后的晶型特征峰完全保留，表明盐酸吗啡在片剂制备过程中被十八醇包裹，两者无相互作用。详见图1。

A - B.盐酸吗啡缓释片（辅料十八醇分别源于供应商B和A）C - D.十八醇（分别为供应商B和A） E.盐酸吗啡图1 X射线粉末衍射图A - B.Morphine Hydrochloride Sustained - Release Tablets（prepared by stearyl alcohol from suppliers B and A respectively） C - D.Stearyl alcohol（suppliers B and A respectively） E.Morphine hydrochlorideFig.1 X - ray powder diffraction pattern

硬度：取供应商A 和B的十八醇所制备盐酸吗啡缓释片素片各10片，使用片剂多用测定仪测定样品硬度。结果2 种片剂的平均硬度分别为5.80，5.87 kg，RSD分别为3.65%，3.24%（n=10），表明2 个供应商的十八醇所制备的盐酸吗啡缓释片的硬度无显著差异。

脆碎度：照2020 年版《中国药典（四部）》通则0923片剂脆碎度检查法［8］131检查，取供应商A 和B 的十八醇所制备的盐酸吗啡缓释片素片各6.5 g，精密称定初始质量，置片剂多用测定仪圆筒中，转动（转速为25 r/min）4 min，取出，吹去粉末，精密称定质量，计算减失质量，观察有无断裂、龟裂及粉碎的片。结果2 种片剂的减失质量分别为0.17%，0.15%，无显著差异，且均无裂片与碎片，表明2个供应商十八醇所制备的盐酸吗啡缓释片的脆碎度无显著差异。

含量：照（2020 年版《中国药典（四部）》通则0512 HPLC 法［8］61测定。填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相为甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（1∶4，V/V）；检测波长为280 nm。取供应商A和B的十八醇所制备的盐酸吗啡缓释片各10片，精密称定，玛瑙乳钵研细，取适量（约相当于盐酸吗啡35 mg），精密称定，置250 mL容量瓶中，加水适量，充分振摇使溶解，用水定容，摇匀，用0.45 μm滤膜滤过，精密量取续滤液20 μL，注入液相色谱仪测定，记录色谱图；另取吗啡对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释成每1 mL 含0.1 mg 的溶液，按拟订色谱条件进样测定，按外标法以峰面积计算含量，结果乘以1.317，即得供试品中的盐酸吗啡含量。结果见表2，表明2 个供应商的十八醇所制备的盐酸吗啡缓释片的含量无显著差异。

表2 2个供应商的十八醇所制备片剂的含量、有关物质测定结果（%）Tab.2 Determination results of the content and related substance of tablets prepared by stearyl alcohol from two suppliers（%）

有关物质：按2.1 项下有关物质测定方法测定。结果见表2，表明2 个供应商的十八醇所制备的盐酸吗啡缓释片的有关物质无显著差异。

溶出曲线：取2个供应商的十八醇所制备的盐酸吗啡缓释片，照2020 年版《中国药典（四部）》通则0931）溶出度与释放度测定法［8］132测定，以水、pH 1.2 盐酸溶液、pH 4.5醋酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液各500 mL为溶出介质，转速为50 r/ min，依法操作，分别于1，2，3，4，5，6 h 时取续滤液1.5～5.0 mL（自动取样，取样口加装10 μm 过滤头）作为供试品溶液，并及时在溶出杯中补充相同温度的溶出介质1.0～5.0 mL。另精密量取含量测定的对照品溶液适量，分别加流动相稀释成每1 mL 含0.05 mg 的对照品溶液，取适量，并进行含量测定，计算样品在不同时间的溶出量。采用非依赖模型的相似因子（f2）衡量2 条溶出曲线的相似度，按公式（1）计算。f2值越接近100，认为2 条曲线越相似。一般情况下，f2值高于50，可认为2条曲线具有相似性。

供应商B 的十八醇所制备的片剂在各介质中的溶出速率均略快于供应商A 的十八醇制备的片剂；2种片剂在各溶出介质中溶出曲线的f2均大于50，表明2种片剂在各溶出介质中溶出曲线均相似。详见图2。

A.水（f2 = 85） B.pH 1.2盐酸溶液（f2 = 69） C.pH 4.5醋酸盐缓冲液（f2 = 67） D.pH 6.8磷酸盐缓冲液（f2 = 70）图2 2个供应商的十八醇所制备片剂在不同溶出介质中的溶出曲线A.Water（f2 = 85） B.pH 1.2 hydrochloric acid solution（f2 = 69）C.pH 4.5 acetate buffer（f2 = 67） D.pH 6.8 phosphate buffer（f2 = 70）Fig.2 Dissolution profiles of tablets prepared by stearyl alcohol from two suppliers in different media

2.4 稳定性考察

取2个供应商的十八醇所制备的盐酸吗啡缓释片，照2020 年版《中国药典（四部）》指导原则9001 原料药物与制剂稳定性试验指导原则［8］457，在温度（40±2）℃、RH（75± 5）%条件下考察0，3，6 个月。在上述条件下，2个供应商的十八醇所制备片剂均为薄膜衣片，除去包衣后显类白色；有关物质、溶出度、含量均未见显著变化。2 种片剂在各时间点的关键质量属性无显著差异，详见表3。

表3 2个供应商的十八醇所制备片剂的稳定性考察结果Tab.3 Results of the stability test of tablets prepared by stearyl alcohol from two suppliers

3 讨论

我国制药企业过去存在“重原料，轻辅料”的现象，企业为降低成本而采用劣质辅料曾导致“毒胶囊事件”［9］，甚至出现因替换辅料导致患者用药后死亡的“齐二药事件”。国家药品监督管理局2012 年发布《加强药用辅料监督管理有关规定》［10］，2016 年发布《关于药包材药用辅料与药品关联审评审批有关事项的公告》［11］。一系列政策加强了药用辅料生产企业、药品制剂生产企业及药品监督管理部门对药用辅料的管理与质量保证。近年来，随着进口药用辅料在国内的推广应用及仿制药质量与疗效一致性评价的全面开展［12］，制药企业越来越重视辅料对制剂关键质量属性的影响。药用辅料功能性相关指标原则［8］539也被纳入《中国药典》，指导制药企业选择与应用辅料。

不同供应商的十八醇虽均符合《中国药典》规定，但其制备工艺或功能性指标的差异可能对制剂产品质量造成影响，故在进行供应商更换前必须进行产品关键质量属性的对比研究。国家药品监督管理局药品审评中心的药用辅料登记数据显示，国内仅4家企业具有十八醇的批准文号且登记状态标识为“A”，其中湖南尔康制药股份有限公司的十八醇于2008 年获得批准文号，早于其他企业，且该企业为国内药用辅料优秀企业之一；江西阿尔法高科药业有限公司的十八醇具有多种粒径，还有专供缓释制剂的定制产品，产品竞争力较强。故本研究中采用供应商A和B的十八醇所制备盐酸吗啡缓释片进行关键质量属性的对比研究。结果显示，2 个供应商的十八醇制备的产品关键质量属性无显著差异，且稳定性良好，符合变更制剂处方中辅料供应商相关技术要求［6］。故2 个供应商的十八醇可相互替换，均能保证盐酸吗啡缓释片的质量稳定、可控。

盐酸吗啡缓释片为蜡质类骨架缓释片，十八醇在处方中作为蜡质缓释骨架材料，本身不溶解，但在胃肠道环境下可逐渐溶蚀，盐酸吗啡可通过孔道扩散和骨架溶蚀相结合的机制而释放。在释药过程中，由于骨架的释药面积随时间而不断变化，故难以维持零级释放速率，呈一级速率释药［13］。本研究中的2 个供应商的十八醇所制备的盐酸吗啡缓释片在各溶出介质中的溶出曲线相似，但供应商B 的十八醇所制备片剂释放略快，这可能与十八醇溶解度、熔点等功能性指标相关，需作进一步研究，考察辅料功能性指标与制剂产品溶出速率的相关性，更好地控制制剂质量。